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文檔簡介
1、目的：(1)克隆人癌胚抗原(carcinoembryonic antigen)基因片段，構(gòu)建pcDNA3.1-CEA基因疫苗。(2)檢測其在人舌癌Tca8113細胞株(human tongue squamous cell carcinoma cell line8113，Tca8113)中的表達。 方法：(1)采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應(yīng)(RT-PCR)技術(shù)，從人結(jié)腸癌組織中擴增出人CEA基因片段，通過DNA重組技術(shù)將該基因片段重組于
2、pcDNA3.1真核表達載體上，構(gòu)建成pcDNA3.1-CEA基因疫苗。(2)通過用酶切、PCR擴增電泳分析及DNA測序的方法對重組DNA進行鑒定。(3)轉(zhuǎn)染人舌癌Tca8113細胞，以轉(zhuǎn)染空載體組做實驗對照組，以未轉(zhuǎn)染的舌癌細胞作空白對照組，通過RT-PCR和免疫組化檢測其在人舌癌Tca8113細胞中的表達。 結(jié)果：(1)經(jīng)酶切、PCR擴增電泳分析和DNA測序證實，本實驗構(gòu)建的重組質(zhì)粒目的基因片段為人CEA-cDNA。(2)經(jīng)
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