氧活性產(chǎn)物介導縮血管活性物質(zhì)促進心肌細胞分泌內(nèi)皮素.pdf

1、目的：探討氧活性產(chǎn)物(reactiveoxygenspecies，ROS)在血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)，內(nèi)皮素-1(ET-1)等縮血管活性物質(zhì)在致心肌細胞肥大時同時促進心肌細胞分泌內(nèi)皮素中所起的作用。 方法：在原代培養(yǎng)的大鼠乳鼠心肌細胞中進行實驗。實驗分為5組，分別為空白對照組、加有ET-1組、加有AngⅡ組、加有ET-1和N-乙酰半胱安酸(N-acetylcysteine)組、加有AngⅡ和N-acetylcysteine組。細

2、胞內(nèi)的氧活性產(chǎn)物用ROS敏感的熒光探針2，7-dichlorofluorescindictate(DCF-DA)來檢測。用RT-PCR的方法檢測內(nèi)皮素基因的表達。 實驗結果：空白對照組細胞內(nèi)發(fā)現(xiàn)極少量氧活性產(chǎn)物的生成；內(nèi)皮素-1基因僅少量表達。所有加有N-乙酰半胱安酸(N-acetylcysteine)的實驗組內(nèi)僅有極少量氧活性產(chǎn)物，和對照組相比細胞內(nèi)DCF-DA熒光強度增加分別為N-acetylcysteine加有ET-1組增

3、加4.8％，N-acetylcysteine加有AngⅡ組增加3.0％；內(nèi)皮素-1基因的表達與空白對照組沒有明顯差異，Prepro-ET相對量增加依次為N-acetylcysteine加有ET-1組增加3.8％，N-acetylcysteine加用AngⅡ組增加2.9％。ET-1及AngⅡ組均見到大量氧活性產(chǎn)物，細胞內(nèi)DCF-DA熒光強度增加依次為108.8％，104.9％；內(nèi)皮素-1基因的表達也明顯增強，Prepro-ET相對增量加依

4、次為52.4％，51.1％。 結論：實驗結果發(fā)現(xiàn)在單純加入ET-1、AngⅡ等縮血管因子的的實驗組中ROS的量顯著增加，而空白對照組和同時加入N-acetylcysteine與縮血管因子的實驗組中則ROS的量極小，這提示ROS在縮血管因子致心肌心細胞的肥大過程中起到信號傳遞作用。同時也發(fā)現(xiàn)在單純加入ET-1、AngⅡ等縮血管因子的的實驗組中心肌表達內(nèi)皮素的量顯著增加，而在空白對照組和同時加入N-acetylcysteine與縮血