丙泊酚和缺血預處理對大鼠肺缺血再灌注損傷時肺細胞凋亡的影響及機制探討.pdf

1、目的：觀察丙泊酚(propofol，Pro)、缺血預處理(ischemic preconditioning，IP)及兩者聯(lián)合應用對大鼠肺缺血再灌注(ischernia reperfusion，IR)損傷時肺組織細胞凋亡的影響；并觀察相關蛋白Bcl-2、Bax表達的變化，以初步探討可能的作用機制。 方法：60只健康雄性SD大鼠隨機分為以下6組：(1)假手術組(Sham組，n=10)，術中僅行右側開胸和右肺門穿帶，機械通氣3h；(2

2、)單純缺血組(IS組，n=10)，開胸夾閉肺門1h后直接處死動物取肺組織；(3)缺血再灌注組(IR組，n=10)，開胸夾閉肺門缺血1h后松開，再灌注2h；(4)丙泊酚干預組(Pro組，n=10)，夾閉肺門前30min給予丙泊酚干預，余同IR組；(5)缺血預處理組(IP組，n=10)，夾閉肺門前給予夾閉右肺門5min，開放5min，反復3次的缺血預處理，余同IR組；(6)丙泊酚干預+缺血預處理組(Pro+IP組，n=10)，夾閉肺門前30

3、min同時給予丙泊酚干預和缺血預處理，余同IR組。制作大鼠單肺原位熱缺血再灌注模型，各組分別于實驗結束時處死大鼠留取右肺組織，根據需要處理肺標本。測定肺組織濕/干重比(W/D)；采用光鏡觀察肺組織形態(tài)學的改變；采用透射電鏡觀察細胞的超微結構改變；采用末端脫氧核苷酸轉移酶介導的dUTP缺口末端標記(TUNEL)法檢測肺組織細胞凋亡，并計算凋亡指數(shù)(apoptosis index，AI)；免疫組化法檢測肺組織細胞Bcl-2、Bax蛋白表達的

4、變化，并利用圖像分析系統(tǒng)進行半定量分析。 結果： Sham組幾乎未見凋亡細胞，IR組、Pro組、IP組及Pro+IP組的W/D、AI值均較Sham組明顯升高(P<0.01或P<0.05)；而Pro組、IP組及Pro+IP組的W/D、AI值均明顯低于IR組(P均<0.01)；Pro+IP組與Pro組、IP組相比W/D、AI顯著下降(P<0.01或P<0.05)。與Sham組相比，IR組Bcl-2、Bax蛋白表達明顯上調(P均<0.

5、01)，而Bcl-2/Bax比值下降(P<0.01)；與IR組比較，IP組、Pro+IP組Bax蛋白水平顯著下降(P均<0.05)，而Pro組無明顯變化(P>0.05)；Pro組、IP組及Pro+IP組Bcl-2蛋白、Bcl-2/Bax比值顯著升高(P<0.01或P<0.05)。IS組與Sham組比較各項指標無明顯變化(P均>0.05)。W/D與AI呈顯著正相關(r=0.951，P<0.01)，而AI與Bcl-2/Bax比值呈顯著負相關