白藜蘆醇及聯(lián)苯二酚選擇性抗腫瘤作用的初步研究.pdf

1、目的：探討白藜蘆醇及聯(lián)苯二酚能夠選擇性抗腫瘤的藥物濃度及機制。
　　方法：用不同濃度(0~60μM)的白藜蘆醇(Resveratrol, RES)及聯(lián)苯二酚(4,4’-Dihydroxybiphenyl, DID)分別作用于不同的肺癌細胞、鼻咽癌細胞和人正常支氣管上皮細胞。用CCK8法檢測RES、DID對腫瘤細胞活力的影響，初步篩選能抑制腫瘤細胞增殖而對正常細胞生長無抑制影響的藥物濃度范圍；用平皿克隆法檢測在選擇性抗腫瘤藥物濃度作

2、用下不同腫瘤細胞克隆集落生成的差異；用Transwell實驗檢測不同濃度的RES、DID對腫瘤細胞遷移的影響；通過流式細胞術(FCM)分析不同濃度的RES、DID對腫瘤細胞和正常細胞的細胞周期影響，同時DNA Ladder法觀察不同濃度、時間的RES、DID對腫瘤細胞凋亡影響；Western blot分析 CAV-1、NQO1、HSP90、ATP、PCNA是否可以作為RES、DID選擇性抗腫瘤作用下療效的評價指標。
　　結果：CC

3、K8法結果顯示RES、DID在(7.5~30μM)范圍內能夠抑制不同的腫瘤細胞的增殖，且并不影響正常人支氣管上皮細胞16HBE生長。平皿克隆、Trans well實驗結果進一步證實了(10~30μM)的RES、DID能明顯抑制腫瘤細胞克隆集落數(shù)的生成和細胞遷移。同時 FCM檢測到(10~30μM)的RES、DID能促使腫瘤細胞的細胞周期阻滯于S期但并不影響正常細胞的細胞周期運行。DNA ladder實驗結果顯示50μM的RES、DID處

4、理后的CNE-2細胞未見DNA斷裂現(xiàn)象，但較大劑量(100μM以上)、藥物作用時間長(24h以上)的RES、DID能促使 CNE-2細胞 DNA凋亡。Western-blot檢測結果顯示，在(10~30μM)的RES與DID作用腫瘤細胞可以濃度依賴性下調PCNA、HSP90、ATP的表達，上調CAV-1、NQO1的表達。
　　結論：
　　1.30μM的RES、DID能夠阻滯肺癌與鼻咽癌細胞的細胞周期于S期，能抑制其增殖和遷移