過表達細胞間粘附分子-1間充質干細胞對實驗性自身免疫性甲狀腺炎干預作用及其機制的初步研究.pdf

1、研究目的:
　　1.探討實驗室前期獲得的過表達細胞間粘附分子-1(Intercellular adhesionmolecules1，ICAM-1)的間充質干細胞系 C3H10T1/2(C3H10T1/2-MIGR1-ICAM-1/MSCs)的免疫功能;
　　2.采用豬甲狀腺球蛋白(Porcine Thyrogiobulin，pTg)與弗氏佐劑(Freund'sadjuvant)免疫C57BL/6小鼠，建立實驗性自身免疫性甲狀

2、腺炎(experimentalautoimmune thyroiditis，EAT)小鼠模型;
　　3.探討C3H10T1/2-MIGR1-ICAM-1/MSCs對EAT小鼠的干預作用及作用機制。
　　研究方法:
　　1.體外采用淋巴細胞轉化實驗(Lymphocyte transformation test，LTT)及混合淋巴細胞反應(Mixed lymphocyte reaction，MLR)，測定cpm值，檢測C3

3、H10T1/2-MIGR1-ICAM-1/MSCs的免疫學功能;
　　2.采用PTg及FA乳化后免疫6周齡雌性C57BL/6小鼠，并在實驗第14天加強免疫一次，誘導EAT模型形成。實驗第28天眼球取血，檢測血清中自身抗體水平;分離甲狀腺組織，進行HE染色。
　　3.在成功建立小鼠EAT模型的基礎上，在建模早期即給予間充質干細胞(Mesenchymal Stem Cells，MSCs)進行干預。實驗分為正常對照組、單純模型組、

4、C57BL/6小鼠骨實質來源MSCs(B-MSCs)干預組、C3H10T1/2MSCs干預組、C3H10T1/2-MIGR1/MSCs干預組及C3H10T1/2-MIGR1-ICAM-1/MSCs干預組。在建模同時，分別于實驗第0、7、14、21天對各MSCs治療組小鼠尾靜脈分別給與對應MSCs干預，正常對照組和單純模型組小鼠均于同一時間給予等量生理鹽水作為對照。所有小鼠均于實驗第28天眼球取血，收集各組血清及脾臟，分別用于測定各組血清

5、中TT3、TT4、自身抗體水平及炎性因子基因的表達量;分離甲狀腺組織，進行HE染色。
　　研究結果:
　　1.體外LTT及MLR實驗結果表明，B-MSCs、C3H10T1/2/MSCs、C3H10T1/2-MIGR1/MSCs及C3H10T1/2-MIGR1-ICAM-1/MSCs均具有抑制T淋巴細胞增殖的作用，其中C3H10T1/2-MIGR1-ICAM-1/MSCs的抑制作用最為明顯。
　　2.與正常對照組相比，單

6、純模型組小鼠甲狀腺組織可見甲狀腺濾泡破壞以及炎癥細胞浸潤，血清中自身抗體水平顯著升高，且具有統(tǒng)計學意義，提示成功建立EAT小鼠模型。
　　3.應用不同種類MSCs對各組小鼠進行干預后，結果表明，與單純模型組相比，各MSCs干預組小鼠甲狀腺組織濾泡破壞程度和炎癥細胞浸潤程度均減輕，其中C3H10T1/2-MIGR1-ICAM-1/MSC干預組減輕程度最為明顯;與單純模型組比較，各MSCs干預組自身抗體水平、脾細胞中IFN-γ、IL-

7、1β基因表達量均明顯升高，而IL-10基因表達量卻降低;與其他3組MSCs干預組相比，C3H10T1/2-MIGR1-ICAM-1/MSC干預組三種自身抗體水平、IFN-γ、IL-1β基因表達量下降及IL-10增高程度均最為明顯。
　　研究結論:
　　1.體外LTT及MLR均表明，C3H10T1/2-MIGR1-ICAM-1/MSCs具有顯著抑制T細胞增殖的能力，且存在劑量效應關系。
　　2.應用PTg與FA免疫C57