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文檔簡介
1、目的: 1.研究地黃提取物對早期阿霉素腎病大鼠的血、尿生化及腎臟病理的影響。 2.研究地黃提取物對早期阿霉素腎病大鼠腎組織中TGF-β1及下游的Smads信號通路表達的影響。 方法: 1.動物模型的制備與干預:成年雄性SD(Sprague-Dawlay)大鼠50只,隨機分為: (1)正常對照組(Z組,10只):采用一次性經尾靜脈注射等量生理鹽水。(2)模型組(40只):采用大鼠尾靜脈內一次性注射阿
2、霉素溶液,2周后腎病模型成立,達到標準者為32只,隨后將模型組隨機分為:腎病模型對照組(M組,16只)、地黃提取物組(D組,16只)。D組于造模2周后開始予2g/ml的地黃提取物(10g/Kg)每日一次灌胃,灌胃共8周;Z組和M組2周后每天予等量生理鹽水灌胃,灌胃共8周。 2.生化指標檢測:大鼠實驗前及實驗2、4、6、8、10周末,留24小時尿液測定24小時尿蛋白含量,實驗10周末取血測定血白蛋白、膽固醇、血尿素氮、血肌酐。
3、 3.腎臟病理學檢查:實驗第10周末常規(guī)光鏡下及電鏡下作形態(tài)學觀察。 4.免疫組織化學染色法檢測大鼠腎臟組織中TGF-β1及Smad3、Smad7蛋白表達:采用SABC法免疫組織化學方法染色組織切片觀察各指標的表達。 5.RT-PCR法檢測大鼠腎臟組織中TGF-β1及Smad3、Smad7的基因表達:余下腎臟組織保存于-80℃冰箱中,Trizol法提取其總RNA,RT-PCR法檢測腎臟組織內TGF-β1及Smad3、
4、Smad7基因表達水平。 結果: 1.血液、尿液生化指標比較:實驗6周末,與M組比較,D組24h尿蛋白開始明顯減少,有顯著統(tǒng)計學意義(p<0.01)。實驗10周末,與Z組比較,M組大鼠24h尿蛋白定量、TC、Scr和BUN水平均顯著上升,(p<0.01),而血白蛋白則顯著降低(P<0.01);與M組比較,D組大鼠24h尿蛋白定量、TC、Scr和BUN水平均顯著下降(p<0.05),而血白蛋白則顯著升高(p<0.05)。
5、 2.病理結果:(1)光鏡下M組大鼠腎臟組織腎小球基本正常,腎小管上皮細胞腫脹,腎小囊擴張,囊壁增厚,球囊粘連,部分腎小管管腔內可見蛋白管型。(2)電鏡下可見到系膜區(qū)擴張,系膜基質增多,腎小球臟層上皮細胞廣泛足突變形、融合、足突間閉合連接形成,部分上皮細胞足突斷裂;D組大鼠腎組織病理改變明顯減輕。 3.腎組織免疫組織化學染色結果:M組大鼠腎皮質內TGF-β1、Smad3蛋白的表達較Z組明顯上調,而D組TGF-β1、Smad
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