異氟醚對老齡大鼠學習記憶功能和海馬蛋白質組的影響.pdf

1、目的:應用"Y"迷宮訓練檢測異氟醚吸入全身麻醉后老齡大鼠學習能力和記憶功能變化，采用雙向凝膠蛋白電泳結合質譜分析技術篩選和鑒定相應情況下海馬蛋白質組表達差異，旨在進一步確定異氟醚麻醉后老齡大鼠記憶和學習功能的變化情況，探討異氟醚對老齡大鼠海馬蛋白質組是否有影響以及影響程度，盡可能找出與麻醉后認知功能改變相關的特異蛋白。 方法: (1)本課題的第1階段：①.隨機將75只22月齡SD大鼠分為C組(對照組，n=35)和Ⅰ組(異

2、氟醚組，n=40)。C組吸入含40％氧氣的空氧混合氣體2小時。Ⅰ組以3％異氟醚+40％氧氣吸入誘導，隨后以1.2％異氟醚+40％氧氣維持全身麻醉2小時。②.兩組大鼠于吸氧對照或麻醉蘇醒后24小時開始應用"Y"型迷宮連續(xù)3天訓練檢測其學習記憶功能，每天訓練20次，記錄正確反應次數(shù)、全天總反應時間、主動回避次數(shù)和三天學會率。③.麻醉結束后24小時和72小時分別于兩組中隨機抽取5只大鼠，取左側海馬-80℃凍存。取右側海馬行尼氏染色和電鏡觀察。

3、 (2)本課題的第2階段：取凍存的左側海馬組織進行勻漿、裂解、水化制備蛋白溶液樣品，應用雙向凝膠電泳獲取含有蛋白質斑點的凝膠，然后考染顯色，掃描儀掃描獲取圖像，運用軟件識別、合成、匹配，分析組間差異，切取凝膠中差異蛋白點，胰酶消化分解，ZipTip<'TM>脫鹽，經質譜分析，獲取肽指紋圖，登陸互聯(lián)網查詢結果以鑒定差異蛋白點。 結論: (1)老齡大鼠吸入1.2％異氟醚2小時后早期學習記憶能力下降，這一現(xiàn)象可能和海馬