B細胞淋巴瘤獨特型DNA疫苗誘導特異性免疫反應的實驗研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、該研究選用來源于人B細胞淋巴瘤臨床活檢標本和人B細胞淋巴瘤Namalwa細胞系的獨特型抗原的免疫原性,該研究克隆小鼠趨化因子MCP-3作為免疫佐劑分子,分別與scFv、VH、CDR3三種獨特型抗原基因融合構建DNA疫苗.在前人基礎上,我們所構建的MCP-CDR3和MCP-VH均為新的疫苗方案,探討這兩種獨特型DNA疫苗在小鼠體內誘導特異性抗獨特型免疫瓜的效果有無差異,并且比較三種疫苗在構建和制備方面的優(yōu)缺點.這對于獨特型DNA疫苗治療B

2、細胞淋巴瘤的臨床應用是必須的.該研究首先通過RT-PCR方法擴增人B細胞淋巴瘤細胞系Namalwa免疫球蛋白重鏈可變區(qū)和臨床活檢組織細胞免疫球蛋白重鏈和輕鏈可變區(qū)序列.將活檢組織細胞的VH和VL用不著15aa的連接片段組裝為scFv片段.通過DNA比對分析,確定Namalwa免疫球蛋白重鏈可變區(qū)中互補決定區(qū)3(CDR3)序列,以PCR的方法對所確定的CDR3序列進行修飾以利于重組PCR.MCP-3完整cDNA同樣修飾后與CDR3序列中間

3、以8aa的連接片段通過重組PCR的方法融合在一起作為抗原基因片段,構建DNA疫苗.以同樣的策略構建分別含有MCP3-NVH、MCP3-scFv融合基因的DNA疫苗.綜上所述,我們成功構建了3種來源于人B細胞淋巴瘤腫瘤細胞的DNA疫苗,分別是pcDNA3.1/MCP-CDR3、pcDNA3.1/MCP-NVH、pcDNA3.1/MCP-scFv質粒.用其免疫動物后可誘導出特異性抗腫瘤細胞的免疫反應,證明以CDR3為特異性抗原基因的DNA疫

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