漢族人群中SLC26A4和線粒體轉錄因子A基因多態(tài)性與阿爾茨海默病的關聯(lián)研究.pdf

1、阿爾茨海默病（Alzheimer’s disease, AD）是一種與年齡相關的進行性神經(jīng)系統(tǒng)變性病，是老年人發(fā)生認知功能減退及癡呆的最常見的病因。臨床表現(xiàn)為進行性記憶力減退和嚴重的智能減退，神經(jīng)系統(tǒng)病理改變主要有腦內(nèi)β-淀粉樣肽（Aβ）沉積、神經(jīng)原纖維纏結和神經(jīng)元缺失等。AD在世界范圍內(nèi)廣泛發(fā)病，隨著老年化時代的到來，AD以成為影響人類健康的最主要疾病之一。據(jù)統(tǒng)計到2010年，全世界已有3500萬人罹患AD，并且隨著年齡的增長,其發(fā)病

2、風險每5年會成倍增加。AD的致殘率和致死率給家庭和社會帶來了沉重的負擔。但目前AD的發(fā)病機制還不十分清晰，比較有影響的假說主要有“膽堿能學說”和“β-淀粉樣蛋白學說”等。隨著遺傳分子生物學的發(fā)展，人類開始從基因層面來尋找AD的發(fā)病機制及治療方法，目前全基因組關聯(lián)研究(Genome-wide Association Studies，GWAS）已發(fā)現(xiàn)許多染色體區(qū)域很可能存在與 AD有關的基因突變，如CLU、CRl、PICALM、PCDH11

3、X、NEDD9以及一些神經(jīng)營養(yǎng)因子等。目前只有載脂蛋白（ApoE）ε4等位基因在世界范圍內(nèi)得到了公認，但ApoEε4等位基因只占遲發(fā)型阿爾茨海默?。↙OAD）患者遺傳風險的42％。因此，尋找更多的候選基因，對將來AD的基因診斷和治療至關重要。近期一項大規(guī)模的全基因關聯(lián)研究發(fā)現(xiàn)SLC26A4基因rs2072064多態(tài)性位點與高加索人群遲發(fā)型阿爾茨海默病的發(fā)病風險相關聯(lián)，然而目前在漢族人群中還沒有關于上述基因位點多態(tài)性與LOAD的發(fā)病風險關

4、系的研究報道。
　　1.SLC26A4基因rs2072064位點多態(tài)性與阿爾茨海默病的相關性研究：
　　近期一項大規(guī)模的全基因關聯(lián)研究發(fā)現(xiàn)SLC26A4基因rs2072064多態(tài)性位點與高加索人群遲發(fā)型阿爾茨海默病（LOAD）的發(fā)病風險相關聯(lián)，然而目前還沒有關于該位點基因變異與亞洲人群LOAD的發(fā)病風險關系的研究報道。本研究旨在探討SLC26A4基因rs2072064多態(tài)性位點與北方漢族人群遲發(fā)型阿爾茨海默?。↙OAD）易感

5、性的關系。采用病例-對照研究方法，選取599例LOAD患者和598例年齡和性別相匹配的健康對照作為研究對象，利用聚合酶鏈式反應—連接酶檢測反應(PCR—LDR)技術進行基因分型。結果發(fā)現(xiàn)SLC26A4基因rs2072064多態(tài)性位點的基因頻率和等位基因頻率在病例組和對照組中有顯著差異(P=0.001；P<0.001)，其中等位基因型A顯著降低LOAD的發(fā)病風險(OR=0.792, P=0.007)。但是，經(jīng)ApoEε4分層后，僅在Apo

6、Eε4非攜帶亞組中，SLC26A4基因型和等位基因型頻率在 AD組和對照組中存在顯著差異（基因型p=0.001;等位基因型p=0.001）。此外，logistic回歸分析發(fā)現(xiàn)，在校正性別、年齡和 ApoEε4攜帶狀態(tài)等因素后，該位點仍與LOAD的發(fā)病風險顯著關聯(lián)(顯性模型: OR=0.787,95%CI=0.619-1.000, P=0.050;隱性模型:OR=0.655,95%CI=0.448-0.959, P=0.030;累加模型:

7、 OR=0.792,95% CI=0.661-0.950, P=0.012)。本研究支持SLC26A4基因為中國北方漢族人群LOAD的易感基因。
　　2.線粒體轉錄因子 A基因遺傳多態(tài)性與阿爾茨海默病發(fā)表風險的關聯(lián)研究：
　　線粒體是ATP產(chǎn)生的主要場所，維持人體細胞的各種正常生理功能，對于能量需求量特別高的神經(jīng)細胞來說其功能的完整性尤為重要。有研究表明慢性線粒體 DNA的損傷和線粒體功能缺陷在阿爾茨海默病的發(fā)生和發(fā)展進程中

8、發(fā)揮了重要的作用。線粒體轉錄因子A（TFAM）具有維持線粒體DNA結構和功能的完整性的作用。越來越多的研究表明TFAM與阿爾茨海默病發(fā)病風險有關。本實驗采用大樣本病例-對照的研究方法，應用生物質(zhì)譜測序技術和等位基因特異性多重PCR技術（Multi-ARMS），檢測394例臨床確診的遲發(fā)型阿爾茨海默病患者（發(fā)病年齡≥65歲）和390名健康對照者的TFAM受體基因多態(tài)性位點的等位基因型，基因型和單倍體型及載脂蛋白E基因多態(tài)性位點的等位基因型

9、，基因型和單倍體型的分布特征情況，以探討TFAM基因多態(tài)性、載脂蛋白E基因多態(tài)性以及TFAM基因與載脂蛋白E基因相互作用與遲發(fā)型阿爾茨海默病的關系。本研究采用SPSS11.5軟件做統(tǒng)計學分析。兩組間人群一般特征差異采用student-t檢驗或卡方檢驗，Hardy-Weinberg平衡定律采用卡方檢驗。同時比較AD組和對照組間基因型、等位基因型和單倍體型分布的差異，計算比值比（OR）及其95%可信區(qū)間（CI），確定相對風險度。采用多因素L

10、ogistic回歸分析校正潛在的混淆因素。應用SHEsis軟件做單倍體頻率分析。所有統(tǒng)計學檢驗均為雙側概率檢驗，P﹤0.05為有統(tǒng)計學意義。結果顯示，載脂蛋白E（ApoE）ε4與散發(fā)、晚發(fā)性阿爾茨海默病的發(fā)病風險高度相關（P＜0.001,OR=2.91),兩組間rs1937基因型頻率和等位基因頻率差異有顯著性（基因型 p=0.03；等位基因型 OR=0.76,95%CI=0.59-0.99,p=0.04）。位點rs2306604基因型和

11、等位基因頻率在AD組與對照組間均無顯著差異（基因型p=0.76;等位基因型p=0.84）。按性別分層分析后，兩位點基因型和等位基因型頻率未見明顯差異。多因素 logistic分析表明ApoEε4與TFAM基因之間無交互作用，rs1937基因型頻率差異在三種logistic模型中均有顯著差異（顯性模型：OR=0.71,95%CI=0.51-0.97, P=0.03;隱性模型：OR=0.25,95%CI=0.08-0.82, P=0.02;

12、遞加模型：0R=0.68,95%CI=0.51-0.91, P=0.01）。單倍體型分析發(fā)現(xiàn)單倍體型CC在AD的發(fā)病中有保護作用（OR=0.76,95%CI=0.59-0.99, P=0.038）。中國漢族人群線粒體轉錄因子A基因多態(tài)性與阿爾茨海默病相關，其中rs1937位點等位基因C和單倍體型CC在遲發(fā)型AD發(fā)病進程中起保護作用，該作用可能與TFAM基因點突變Ser12Thr可影響TFAM功能進而影響線粒體 DNA的轉錄和線粒體結構和