子宮內膜異位癥血瘀證差異蛋白質組學研究.pdf

1、背景：子宮內膜異位癥（Endometriosis，EMT）是育齡婦女的多發(fā)病，嚴重影響女性生殖健康和生活質量。證候是疾病一定階段病因、病位、病性、病勢的綜合表現(xiàn)，也是中醫(yī)藥理論研究的核心內容，開展中醫(yī)“證候”本質研究，揭示證候的科學內涵是中醫(yī)基礎理論現(xiàn)代化進程中的關鍵環(huán)節(jié)，而證候生物學基礎研究的突破則是證候科學內涵得以闡明的保障。血瘀證是中醫(yī)臨床多種疾病的基本證型，也是子宮內膜異位癥的核心證候類型。在前期研究中，曾發(fā)現(xiàn)該證型的異位和在位

2、內膜在組織形態(tài)學和細胞凋亡相關因子的表達存在差異，為從蛋白組學水平探索EMT的不同證候的特異性標志物的研究工作奠定了基礎。對子宮內膜異位癥血瘀證進行深入、系統(tǒng)的現(xiàn)代研究，有助于對本病的準確診斷和有效治療。
　　目的：
　?、偻ㄟ^蛋白組學技術分離并鑒定EMT血瘀證、氣滯血瘀證、腎虛血瘀證患者在位和異位內膜的差異蛋白質，尋找EMT證候特異性蛋白質；
　?、趶牡鞍踪|水平探討EMT血瘀證、氣滯血瘀證、腎虛血瘀證的實質，揭示EM

3、T血瘀證辨證的分子生物學基礎，建立EMT的蛋白質分子微觀辨證和診斷體系，探討EMT證候的演變規(guī)律、證候的辨治靶點，尋找有意義的分子標記物及基因干預的靶點。
　　方法：取6例EMT血瘀證、氣滯血瘀證、腎虛血瘀證患者增生期在位和異位內膜組織和6例增生期正常子宮內膜組織標本，將各種證型的每兩例標本進行隨機等量混勻，得到3組標本并提取組織總蛋白。通過雙向電泳技術得到3組雙向電泳凝膠圖譜。檢測出的表達差異點經基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜

4、（MALDI-TOF-TOF/MS）及蛋白質數(shù)據(jù)庫檢索進行蛋白質鑒定。
　　結果：在3組差異蛋白中進行比較，最終得到三次重復試驗所獲得的各證型的差異蛋白。其中血瘀證在位內膜差異蛋白2個，異位內膜差異蛋白1個。腎虛血瘀證在位內膜差異蛋白3個，異位內膜差異蛋白3個。氣滯血瘀證瘀型在位內膜差異蛋白3個，異位內膜差異蛋白4個。根據(jù)各證型差異蛋白比較，可以發(fā)現(xiàn)膜聯(lián)蛋白在腎虛血瘀證在位內膜和異位內膜均有高表達，肌球蛋白輕鏈3在氣滯血瘀證在位內