CO-,2-激光膀胱粘膜剝脫術的實驗研究.pdf

1、本課題以經(jīng)國產(chǎn)空芯金屬紅外波導傳輸?shù)腃O<,2>激光為工具，首先進行開放性犬膀胱粘膜剝脫術的實驗研究，在對手術的有效性及安全性做出全面評估的基礎上，進一步對腔內(nèi)CO<,2>激光膀胱粘膜剝脫術的可行性進行了初步的探討。 1．目的： 探討以經(jīng)多晶鍺空芯金屬紅外波導傳輸?shù)腃O<,2>激光為工具的膀胱粘膜剝脫術的可行性、有效性與安全性，以及CO<,2>激光對膀胱組織的相關作用機制。 2．方法： 2.1 CO<,2

2、>激光犬膀胱粘膜剝脫術研究以Beagle犬為研究對象，以經(jīng)國產(chǎn)多晶鍺空芯金屬紅外波導傳輸?shù)腃O<,2>激光為手術工具，在觀察波導的機械性能、傳能功耗及光斑特性并篩選出針對膀胱組織的適宜激光工作參數(shù)的基礎上，行開放性CO<,2>激光膀胱粘膜剝脫術。采用膀胱組織測溫及常規(guī)組織病理學檢查等手段觀察CO<,2>激光對膀胱組織的汽化效果及膀胱粘膜上皮的再生過程；通過圍手術期觀察及膀胱測壓、靜脈腎盂造影等功能檢查方法觀察手術的遠期療效，進而綜合評價

3、CO<,2>激光膀胱粘膜剝脫術的可行性、有效性及安全性。 2.2 CO<,2>激光對犬膀胱組織作用范圍的顯微FT-IR分析以術后即刻的膀胱組織冰凍切片為研究對象，應用顯微：FT-IR原位檢測技術獲取來源于不同層次的膀胱肌肉組織的原始FT-IR光譜，通過光譜重建、差譜分析及曲線擬合等方法，定量分析膀胱肌肉組織蛋白質(zhì)二級結構組成及其相對含量的變化，觀察CO<,2>激光對膀胱組織在分子水平上的實際作用范圍。 2.3 CO<,2

4、>激光對成纖維細胞光生物調(diào)節(jié)效應的觀察以體外培養(yǎng)的人皮膚成纖維細胞為觀察對象，建立CO<,2>激光的光生物調(diào)節(jié)效應研究模型，通過對CO<,2>激光照射后成纖維細胞增殖規(guī)律的觀察，探討CO<,2>激光與膀胱纖維化間的潛在關系。 2.4腔內(nèi)CO<,2>激光膀胱粘膜剝脫術的體外模擬試驗以空芯金屬紅外波導為主要材料，設計制作膀胱粘膜剝脫器，建立以生理鹽水為充盈介質(zhì)的膀胱腔內(nèi)手術模型，以離體新鮮犬膀胱組織為實驗對象，進行水下CO<,2>激

5、光膀胱粘膜剝脫試驗，探討腔內(nèi)CO<,2>激光膀胱粘膜剝脫術的可行性。 3．結果： 3.1 CO<,2>激光膀胱粘膜剝脫術研究國產(chǎn)多晶鍺空芯金屬紅外波導的可曲半徑≤10.0cm，傳輸功耗約20％，照射距離≤5.0cm時的輸出光斑服從高斯分布，波導使用靈活，操作方便，能夠滿足膀胱粘膜剝脫術的需要。照射距離≤5cm、光斑移動速度2～8mm/s是膀胱粘膜剝脫的適宜工作參數(shù)。CO<,2>激光的汽化深度僅限于粘膜及粘膜下層，對膀胱肌

6、層無明顯損傷。術后2周膀胱組織以非特異性炎癥反應為主要病理變化，術后4周粘膜上皮再生活躍，術后12周膀胱粘膜完全再生。圍手術期動物康復順利，未見有大量血尿及膀胱穿孔等嚴重并發(fā)癥發(fā)生。觀察期末(12周)動物膀胱順應性良好，上尿路形態(tài)及功能未見異常。實驗結果表明，CO<,2>激光膀胱粘膜剝脫術安全、有效、可行。 3.2 CO<,2>激光對犬膀胱組織作用范圍的顯微FT-IR分析CO<,2>激光照射后，蛋白質(zhì)分子二級結構組成及其相對含量

7、的變化區(qū)域位于膀胱肌層的組織學損傷界面(光鏡水平)外約60μm的范圍內(nèi)，而蛋白質(zhì)分子能量狀態(tài)變化區(qū)域則延伸至約90μm的范圍內(nèi)。實驗結果提示，動態(tài)掃描式剝脫過程中的CO<,2>激光對膀胱肌層的實際作用范圍可超出其組織學損傷邊界，但仍小于其靜態(tài)作用時的范圍。 3.3 CO<,2>激光對成纖維細胞光生物調(diào)節(jié)效應的觀察CO<,2>激光對人皮膚成纖維細胞的增殖有明顯抑制作用，二者間存在一定的劑量—效應與時間—效應依賴關系，照射后24小時的抑制作

8、用最顯著。實驗結果表明，CO<,2>激光與術后膀胱膀胱纖維化間無直接的因果關系。 3.4腔內(nèi)CO<,2>激光膀胱粘膜剝脫術的體外模擬試驗CO<,2>激光可以在水下有效剝脫膀胱粘膜，組織碳化輕微，創(chuàng)面基底潔凈。實驗結果表明，CO<,2>激光可以在水下有效剝脫膀胱粘膜，具備與腔內(nèi)泌尿外科技術結合可行性。 4．結論： 經(jīng)國產(chǎn)多晶鍺空芯金屬紅外波導傳輸?shù)腃O<,2>激光在開放手術條件下能夠有效地剝脫膀胱粘膜，對膀胱肌肉組