白草花葉病毒變異的初步研究.pdf

1、本實驗對來自山西忻州的一些表現(xiàn)病毒病癥狀的白草、高粱和玉米材料(共15個樣品)采用生物學，血清學和分子生物學等方法和技術進行了檢測和序列的分析、比對?！　±枚喾N植物病毒的抗血清對全部標樣進行ELISA檢測，結果表明15個樣品都與白草花葉病毒的抗血清反應。其中10號樣品既與白草花葉病毒(PenMV)的抗血清反應，還與甘蔗花葉病毒北京分離物(SCMV-BJ)的抗血清呈陽性反應。使用SCMV-BJ特異性的引物從10號樣品中擴增出約700b

2、p的片段。包括3'-NTR和CP基因的C末端。所得的核苷酸序列與SCMV-BJ的同源性達到99.28％。所得CP的C末端其氨基酸序列與SCMV-BJ的同源性達100％。結合血清學結果，得出結論：10號樣品中同時含有兩種病毒，屬于混合侵染?！　±冒撞莼ㄈ~病毒特異性引物擴增這15個分離物的外殼蛋白基因序列。序列分析表明，15個樣品的外殼蛋白基因均為909個核苷酸(含終止密碼子)，編碼302個氨基酸。這15個樣品再加上已知的PenMV-A

3、，PenMV-B，PenMV-C三個分離物兩兩比對的核苷酸序列同源性在91.1％～100％，其中1號，4號，10號，15號的同源性為100％，11號和13號同源性也為100％，；氨基酸序列同源性在97.7％～100％。15個分離物均含有PenMV?！　⊥ㄟ^比對這15個樣品的外殼蛋白基因序列，可知15個樣品中只有2號和14號與蚜傳密切相關的保守基序為DAG，其余均突變?yōu)镈TG?！　】寺×?號、13號和15號樣品的HC-Pro的部分序列