大豆疫霉侵染早期機(jī)制的分子解析.pdf

1、分類(lèi)號(hào)墜絲：!學(xué)號(hào)2嫂絲QZ絲i南京愛(ài)鼉戈蓬博士學(xué)位論文大豆疫霉侵染早期機(jī)制的分子解析陳孝仁指導(dǎo)教師嫠壘菠一越攔專(zhuān)業(yè)名稱(chēng)蕉塑瘟壅堂研究方向墓苴速盞盞坌壬壘塑雯答辯日期。三莖蔓土生盎且博士學(xué)位論文大豆疫霉侵染早期機(jī)制的分子解析應(yīng)對(duì)寄主和環(huán)境壓力，并且避免被寄主識(shí)別因此，本研究首先分析了大豆疫霉與寄主大豆、非寄主番茄和中國(guó)不結(jié)球小青菜互作早期雙方的表型。結(jié)果揭示大豆疫霉在與植物互作早期菌絲尖端均發(fā)生變細(xì)變長(zhǎng)，寄主和非寄主則發(fā)生活性氧的迸發(fā)。

2、模擬自然條件下大豆疫霉應(yīng)答氧化壓力，結(jié)果發(fā)現(xiàn)在lmM的過(guò)氧化氫終濃度下，游動(dòng)孢子迅速休止，并且在觀察的10h內(nèi)沒(méi)有萌發(fā)；而在03mM的過(guò)氧化氫終濃度下，游動(dòng)孢子的萌發(fā)率高于對(duì)照，并且芽管的長(zhǎng)度長(zhǎng)于對(duì)照提示過(guò)氧化氫在游動(dòng)孢子識(shí)別寄主、萌發(fā)和侵入中可能起著重要作用游動(dòng)孢子在大豆葉片，下胚軸和根部均產(chǎn)生明顯的附著胞或類(lèi)似附著胞結(jié)構(gòu)大豆與大豆疫霉互作相關(guān)的氧化壓力反應(yīng)重點(diǎn)研究了大豆與大豆疫霉互作早期大豆體內(nèi)活性氧的代謝活動(dòng)。利用分光光度法分析了

3、兩種不同抗性水平的大豆在與大豆疫霉互作中活性氧的迸發(fā)，寄主細(xì)胞死亡、脂質(zhì)過(guò)氧化程度、抗氧化酶(過(guò)氧化氫酶和谷胱甘肽還原酶)和非酶促抗氧化劑(抗壞血酸和谷胱甘膚)的含量變化。而且，利用染色法對(duì)寄主活性氧迸發(fā)和細(xì)胞死亡進(jìn)行了研究；分析了互作中大豆葉片致病防衛(wèi)相關(guān)基因的表達(dá)變化及外源施用還原劑對(duì)互作的影響。結(jié)果表明，在接種后，抗病品種(南農(nóng)4931)和感病品種(合豐35)均發(fā)生了活性氧迸發(fā)受大豆疫霉菌侵染后，大豆各品種都產(chǎn)生了細(xì)胞的死亡；丙二

4、醛含量變化趨勢(shì)與品種抗性呈負(fù)相關(guān)；在接種后3h內(nèi)，不同抗性品種體內(nèi)過(guò)氧化氫酶和谷胱甘肽還原酶比活性均上升大豆疫霉侵染大豆誘導(dǎo)大豆Pgs(pathogenesisrelatedproteingenes，P腳基因的上調(diào)表達(dá)，在南農(nóng)4931中上調(diào)表達(dá)時(shí)間早于合豐35，持續(xù)時(shí)間也長(zhǎng)于后者；外源施用三種還原劑DTT、glutathionc，ascorbate均有助于大豆疫霉菌的侵染結(jié)果表明，活性氧代謝可能在大豆與大豆疫霉菌互作中起著重要作用大豆疫

5、霉侵來(lái)早期謗導(dǎo)表達(dá)基因的篩選為探究大豆疫霉致病性的分子機(jī)制，利用抑制性差減雜交方法篩選大豆疫霉侵染大豆早期誘導(dǎo)表達(dá)基因，建立了一個(gè)大豆疫霉侵染早期誘導(dǎo)表達(dá)cDNA文庫(kù)該文庫(kù)包含73個(gè)單基因，其中66個(gè)在大豆疫霉基因組數(shù)據(jù)庫(kù)具有同源序列，7個(gè)沒(méi)有同源序列這些基因涉及蛋白合成、能量代謝，細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞壁建成和轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)等途徑這些結(jié)果為了解大豆疫霉早期侵染大豆過(guò)程中差異表達(dá)的基因以及卵茵的致病機(jī)理提供了依據(jù)大豆疲霉c2112型鋅指蛋白基因的