29327.青島文昌魚gphr基因的表達、鑒定及定位

1、山東理工大學山東理工大學碩士學位論文青島文昌魚青島文昌魚GpHRGpHR基因的表達、鑒定及定位基因的表達、鑒定及定位ExpressionExpressionExpressionExpressionidentificationidentificationidentificationidentificationlocationlocationlocationlocationofofofofGpHRGpHRGpHRGpHRGeneGeneGe

2、neGenefromfromfromfromAmphioxusAmphioxusAmphioxusAmphioxusBranchiostomaBranchiostomaBranchiostomaBranchiostomabelcheribelcheribelcheribelcheritsingtauensetsingtauensetsingtauensetsingtauense研究生：董娟董娟董娟董娟指導教師：趙博生（教授）趙博生（教授

3、）趙博生（教授）趙博生（教授）協(xié)助指導教師：申請學位門類級別：理理理理學學學學碩碩碩碩士士士士學科專業(yè)名稱：生物化學與分子生物學生物化學與分子生物學生物化學與分子生物學生物化學與分子生物學研究方向：分子細胞生物學分子細胞生物學分子細胞生物學分子細胞生物學論文完成日期：2010201020102010年年年年4444月月月月15151515日日日日分類號：Q75Q75Q75Q75密級：單位代碼：10433104331043310433學號

4、：Y0710164Y0710164Y0710164Y0710164山東理工大學碩士學位論文摘要I摘要糖蛋白激素受體(glycoproteinhmonereceptsGpHRs)屬于G蛋白偶聯(lián)受體家族(GPCRs)的亞家族。在哺乳動物中，GpHRs主要參與兩個主要的內分泌途徑：下丘腦垂體性腺(HPG)和下丘腦垂體甲狀腺(HPT)調控軸，主要調控性腺和甲狀腺的發(fā)育和功能。文昌魚屬于脊索動物門頭索亞門，處在無脊椎動物向脊椎動物進化的關鍵位置，

5、是研究脊索動物演化和胚胎發(fā)育的模式動物。利用分子生物學方法研究文昌魚的GpHR基因，可以在分子層面上闡釋脊椎動物GpHR基因的起源與進化。有助于了解該基因的原始功能以及脊椎動物同源基因的起源與進化。本文對文昌魚GpHR基因的進化、表達及定位方面進行了研究。本實驗室利用RTPCR和RACE技術已得到了文昌魚GpHR基因的cDNA序列。它的最大開放閱讀框為1377bp，編碼一個由459個氨基酸組成的多肽鏈，其分子量大約為50kDa。在所構建

6、的進化樹中，文昌魚的糖蛋白激素受體處于基部，說明文昌魚GpHR還處于比較原始的狀態(tài)，可能是GpHR進化的一個前體；構建原核和真核表達載體，表達文昌魚GpHR蛋白，獲得了分子量約為50kDa的蛋白；分別使用兔抗TSHR、FSHR、LHRCGR的抗體進行Westernblot檢測，結果表明該融合蛋白與三種抗體均有陽性反應，說明該編碼蛋白可能是一類糖蛋白激素受體；免疫組織化學分析，兔抗TSHR抗體的免疫反應主要在內柱，卵巢，精巢組織中。另外，