30863.誘導調控型人工嵌合啟動子的功能研究

1、山東師范大學碩士學位論文誘導調控型人工嵌合啟動子的功能研究姓名：代立新申請學位級別：碩士專業(yè)：發(fā)育生物學指導教師：張慧20090411山東師范大學碩士學位論文AP、、ElmlK】Nj七cORj5A七RD29A；APE)LTl30ERDlⅪN1jrCoRl5ARD29A：AP3、ERDjcoRl5AcoRl5ARD29ARD29A；AP4)ERDlKINiCoRl5ARD29ARD29A：AP5、ERDlERDlcoRi5ARD29ARD

2、29A；AP6)ERDlKINl七CoRl5ALll30RD29A：NP)作為對照的肋2姐全長啟動子。同AP2比，API的5’端少了LTl30片斷，二者對比觀察LTl30關鍵片斷有無和活性的關系。AP2與AP6反映LTl30位置和活性的關系。AP3、AP4、AP5均含二聚體，體現(xiàn)二聚體的特點，它們第二個片斷種類的變化是否能引起活性的改變呢整體對比，找出活性最強的啟動子組合。我們選用含有多拷貝GUS基因的pCAMBIA3301作為植物表達

3、載體。分別用上述六條人工構建的嵌合誘導調控型啟動子和RD29A全長啟動子取代pCAMBIA3301上GUS基因上游的CaMV35S啟動子，調控其下游的GUS基因的表達。將七個重組表達pCAMBIA3301載體分別從大腸桿菌EcoliDH50t導入農桿菌GV3101，用花浸染法轉化擬南芥，得到七個轉化株系。篩選出子代純合體，PCR鑒定，再用高鹽、干旱、低溫等處理，GUS活性分析鑒定各個啟動子的誘導活性并相互比對，以期望得到能對多種脅迫敏感