抗致病性弧菌及希瓦氏菌有效中藥與方劑的篩選、抗菌機理研究.pdf

1、為探討中藥方劑水煎液對致病性弧菌及希瓦氏菌的抗菌活性、抗菌機理，為其在水產養(yǎng)殖中的推廣應用提供研究基礎。本研究采用平皿打孔法測定17種中藥對副溶血性弧菌2株、哈氏弧菌1株、創(chuàng)傷弧菌1株、腐敗希瓦氏菌1株、鮑魚希瓦氏菌1株、海藻希瓦氏菌2株共8株菌的體外抑菌效果；采用平皿打孔法和試管兩倍稀釋法測定11種中藥的相互作用關系及三個方劑的體外抑菌效果；選用0.35 g左右的健康方斑東風螺100個，隨機分為5組，每組20個，第Ⅰ組為對照組，不添加

2、方劑1，Ⅱ～Ⅴ為試驗組，分別添加一定量的方劑1，使方劑1在水體中的濃度達到1/160 g/mL、1/320 g/mL、1/640 g/mL、1/1280 g/mL，分別在給藥前及給藥1，3，5，7d共取樣5次，測定水中和方斑東風螺內臟團內菌落總數(shù)和菌群構成；通過測定方劑1作用一定時間后副溶血性弧菌、哈氏弧菌、創(chuàng)傷弧菌和鮑魚希瓦氏菌胞外堿性磷酸酶含量和電導率的變化探討中藥方劑的作用機理。結果顯示：
　　1.17種中草藥的水煎液對8株

3、菌的抑制作用不同，其中五倍子、烏梅、蘇木、猴耳環(huán)效果最好，抑菌圈直徑介于14.44 mm～29.00 mm；石韋、鴨膽子、益智仁、郁金、板藍根、貫眾除石韋對一株海藻希瓦氏菌有抑菌作用外其余均未見抑菌作用。
　　2.11種中草藥的聯(lián)合藥敏試驗中除對藥黃芩和烏梅、桉葉和五倍子、秦皮與地榆、烏梅與地榆、蘇木與大黃、蘇木與石榴皮、桉葉與黃芩、大黃與黃芩、五倍子與秦皮對供試的8株菌中某些供試菌表現(xiàn)為協(xié)同外，其余對藥對供試的8株菌相互作用都表

4、現(xiàn)為相加。
　　3.三個方劑對副溶血性弧菌、哈氏弧菌、創(chuàng)傷弧菌和鮑魚希瓦氏菌抑菌圈直徑介于12.32 mm～18.54 mm，方劑1的抑菌效果最好，最小抑菌濃度介于1/640～1/160 g/mL，最小殺菌濃度介于1/320～1/160 g/mL。
　　4.水中添加不同劑量的方劑1，對水中菌落總數(shù)和菌群構成有一定的作用，其中添加劑量組為1/320 g/mL對水中菌落總數(shù)和菌群構成的影響較大，水中菌落總數(shù)減少2.80×106個

5、/mL，且弧菌數(shù)量減少40％。
　　5.水中添加不同劑量的方劑1，對生活在水中方斑東風螺內臟團內菌落總數(shù)和菌群構成有一定作用，其中添加劑量組為1/640 g/mL對方斑東風螺內臟團內菌落總數(shù)和菌群構成的影響較大，方斑東風螺內臟團內菌落總數(shù)減少2.85×106個/mL，且弧菌數(shù)量減少50%。
　　6.濃度分別為1/320 g/mL，1/640 g/mL，1/640 g/mL和1/160 g/mL的方劑1對副溶血性弧菌、哈氏弧菌

6、、創(chuàng)傷弧菌和鮑魚希瓦氏菌作用一段時間后，相應菌液的胞外堿性磷酸酶含量隨處理時間的延長升高，而對照組變化很小。
　　7.濃度分別為1/320 g/mL，1/640 g/mL，1/640 g/mL和1/160 g/mL的方劑1對副溶血性弧菌、哈氏弧菌、創(chuàng)傷弧菌和鮑魚希瓦氏菌作用一段時間后，相應菌液電導率增加，而對照組變化很小。
　　可見，17種中草藥對8株菌的抑菌作用能力不一樣，五倍子、烏梅、蘇木、猴耳環(huán)優(yōu)于其他中草藥；11種中