淫羊藿多糖對豬精液冷凍保存的影響.pdf

1、豬冷凍精液有助于原種豬場的跨地區(qū)種質交流和遺傳保護;冷凍精液可增加豬場輸精的時間彈性，并有助于疫病防控。目前，豬精液冷凍方法或程序仍主要應用在需要進行品系轉移或出口的情況，尚未廣泛應用于豬的標準化生產中。豬冷凍精液應用的局限性主要受到冷凍程序成熟度的影響，現(xiàn)有的技術依然不夠完善，效率偏低，窩仔數(shù)下降。近年來，在開發(fā)新型低毒冷凍保護劑（如DMF、DMA、MF等酰胺類物質）及嘗試在稀釋液中添加保護性物質（海藻糖、紅景天多糖等糖類物質;褪黑素

2、、谷胱甘肽、維生素E和超氧化物歧化酶等抗氧化物質）方面的研究報道日益增多，改善豬精液冷凍后的精子質量仍是一項艱巨的任務;探索改善豬凍精質量的新方法具有重要的研究意義和應用價值。本研究在對公豬精液品質進行調查的基礎上，嘗試添加中藥成分淫羊藿多糖以改進冷凍稀釋液和解凍液，比較其在提高凍后豬精液質量上的效果，以期為進一步研究淫羊藿多糖對豬精液冷凍的作用、機理及應用奠定基礎。本試驗的主要研究內容如下。
　　1.公豬新鮮精液品質調查及其與凍

3、后質量的關系
　　長白公豬射精量在250mL以上，活力總體較好，精液品質1-6月份最佳，7-8月份最差。大白公豬射精量為50-200mL，11-12月份精液質量相對穩(wěn)定，4-10月份射精量變化幅度較大。杜洛克公豬射精量在100-400mL之間，變動范圍150-300mL，精子活力7-9月份最差，10月至次年4月精子活力較好并較穩(wěn)定。為了減少運輸過程對精液質量的影響，采集精液后用等體積等溫ZO-PVA液稀釋，用玻璃瓶盛裝并置于保溫瓶

4、中運輸更有利于精液質量的保持。對精液樣品質量及其凍后活力的分析表明，鮮精活力與冷凍解凍后精子活力呈極顯著相關(r=0.5623，P＜0.01);鮮精密度與凍后精子活力相關性也顯著(r=0.4316，P＜0.05)，凍前精液質量與凍后精子活力顯著相關。
　　2.豬精液的細管冷凍保存
　　對冷凍解凍過程中影響豬凍精質量的各因素的研究結果表明，豬精液用等溫等體積ZO-PVA液稀釋后在室溫、17℃或37℃下靜置，對凍后效果無顯著影響

5、。當精子凍存密度達2×109/mL時，凍精解凍后活力最低;以1×109/mL和0.5×109/mL的密度冷凍豬精液，凍后活力差異不顯著。1％甘油+2％DMF組合和1.5％甘油+1.5％DMF組合與3％甘油作為冷凍保護劑的凍后效果差異不顯著，均可嘗試用于豬精液冷凍保存，但仍需進一步的條件優(yōu)化。37℃30s水浴解凍細管凍精后，分別孵育在37℃、30℃和室溫的解凍液中，以及直接將細管置于室溫下處理，凍后精子活力差異不顯著。于2mL解凍液中每次

6、解凍1支細管與解凍3支細管的效果無差異，但兩者均較每次解凍6支細管的效果要好，三組解凍方式的凍后質膜完整性差異不顯著。
　　3.淫羊藿多糖對豬精子冷凍保存的保護作用
　　在冷凍稀釋液中添加4mg/mL淫羊藿多糖可以得到較好的凍后活力、質膜完整率和頂體完整率。在解凍液中添加2mg/mL淫羊藿多糖得到的凍后精子活力可達0.54，質膜完整率62.7％，頂體完整率53.0％。解凍后的不同保存溫度對精子存活時間也有明顯影響，室溫環(huán)境似