三株刺松藻內生真菌次生代謝產物及其生物活性研究.pdf

1、海洋微生物擁有豐富多樣的次生代謝途徑，其中海洋生物內生真菌次生代謝產物研究日益受到天然產物化學界的重視。本論文選擇了三株刺松藻內生真菌分別為玉米赤霉菌(Gibberella zeae)、焦曲霉(Aspergillus ustus)和雜色曲霉(Aspergillus versicolor)進行了規(guī)模發(fā)酵和次生代謝產物研究，并對分離得到的部分化合物進行了初步的生物活性評價。
　　 菌絲體和發(fā)酵液提取物采用常規(guī)的硅膠柱層析、凝膠Sep

2、hadexLH-20柱層析、制備薄層層析、制備高效液相色譜以及重結晶等分離手段，得到單體化合物。利用各種現(xiàn)代波譜技術(IR、UV、EI-MS、HR-EI-MS、1H-NMR、13C-NMR、DEPT、1H-1HCOSY、HSQC、HMBC、NOESY等)從三種菌株發(fā)酵提取物中分離鑒定了35個化合物的結構。其中從菌株玉米赤霉菌中分離鑒定了9個化合物，發(fā)現(xiàn)1個新生物堿類化合物(GZ1)，包括1個生物堿類化合物(GZ1)和8個甾體類化合物(G

3、Z2-GZ9)；從菌株焦曲霉中分離鑒定了9個化合物，發(fā)現(xiàn)1個新甾體類化合物(AU1)，包括9個甾體類化合物(AU1-AU9)：從菌株雜色曲霉中分離鑒定了17個化合物，發(fā)現(xiàn)1個新倍半萜類化合物(AV1)，包括1個倍半萜類化合物(AV1)、5個生物堿類化合物(AV3-AV7)、1個蒽醌類化合物(AV2)、1個神經(jīng)酰胺類化合物(AV8)和9個甾體類化合物(AV9-AV17)。
　　 對分離到的單體化合物進行了抗細菌活性試驗結果表明，生

4、物堿類化合物GZ1(AV3)、AV4、AV5和AV6、倍半萜類化合物AV1、甾體類化合物AU1、AU3、AU4(AV17)、AV9、AV10和AV16以及蒽醌類化合物AV2對金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)具有微弱的的抑制活性，其中化合物AU1、AU3、AU9、AV1、AV9、AV10和AV11對大腸埃希氏桿菌(Escherichia coli)顯示出微弱的抑制活性。
　　 對單體化合物的鹵蟲毒性試驗

5、結果表明，甾體類化合物GZ2-GZ9，AU1-AU9，AV9-AV17對鹵蟲有弱的或中等強度的致死率，其中GZ7(AU5，AV14)顯示出較強的致死率62.5％：化合物AV9、AV1、AV8和AV2對鹵蟲有較強的致死率，其半數(shù)致死濃度為分別為14.85μg/mL、34.99μg/mL、27.71μg/mL，和0.29μgmL。
　　 對部分單體化合物的乙酰膽堿酯酶抑制活性試驗結果表明，所測試的化合物對乙酰膽堿酯酶有弱的或微弱的抑

6、制活性，其中有些化合物還顯示微弱的促進活性。
　　 對化合物GZ1的體外細胞毒(抗腫瘤)活性評價結果顯示，GZ1對人白血病HL-60腫瘤細胞株無顯著活性，對人肺癌A549和人肝癌BEL-7402細胞株顯示細胞毒活性，在10μM濃度下抑制率分別為61.8％和17.6％。
　　 本論文對三株內生真菌的次生代謝產物進行了系統(tǒng)的研究，豐富了海洋天然產物的化合物結構，通過活性測試發(fā)現(xiàn)了部分具有活性的化合物，為海洋微生物資源的有效利