甘藍型油菜波利馬細胞質雄性不育育性恢復基因Rfp的圖譜定位.pdf

1、雜種優(yōu)勢利用是提高油菜產量的一條有效途徑,它可以有效解決產量與品質、產量與抗逆性間的矛盾,增強油菜品種的適應性。波里馬細胞質雄性不育(Pol CMS)是油菜雜種優(yōu)勢利用的一條重要途徑,已被廣泛應用于雜交種的選育,培育優(yōu)良的恢復系已成為應用該CMS進行雜交種選育的一個重要方面。與育性恢復基因連鎖的分子標記有助于在育種的早期鑒定植株是否含有目的基因,可以加速優(yōu)良恢復系的培育過程；另外,大量的與恢復基因緊密連鎖的分子標記是圖位克隆該基因不可缺

2、少的。所以,本研究的目的是對Pol CMS的育性恢復基因(Rfp)進行圖譜定位,以期為恢復系的遺傳改良和雜種純度鑒定提供輔助手段,并為進一步分離、克隆Rfp奠定基礎。主要獲得了以下結果:
　　 1.在已回交多代的近等基因系中,繼續(xù)選擇可育單株(Rfprfp)與輪回親本吳108(rfprfp)雜交,獲得回交育性分離群體,其中可育株125株,不育株為113株,卡平方檢驗符合1:1的理論分離比。
　　 2.采用分離群體集團混合

3、分析法(BSA)法篩選了3072對AFLP引物,找到了與Rfp連鎖的AFLP標記24個,用其中9個連鎖較緊密的標記繪制了區(qū)域遺傳連鎖圖,最近的標記距目標位點為0.4 cM。
　　 3.把2個距目標位點最近的AFLP標記(ZQA和ZQH)轉化成了較穩(wěn)定的易在育種中應用的SCAR標記(SCAP0612ST和SCAP0612EM2),并在更大群體和不同來源的恢復系材料中進行驗證,發(fā)現(xiàn)標記SCAP0612ST與目標位點連鎖最緊密,且適用

4、性更為廣泛,可以利用于雜種純度鑒定和標記輔助選擇。
　　 4.將上述兩個標記片段序列遞交到美國國家生物技術信息中心(National Center forBiotechnology Information,NCBI)網(wǎng)站http://www.ncbi.nlm.nih:gov/BLAST對標記片段與擬南芥進行同源性比對。發(fā)現(xiàn)兩個標記片段均能夠在擬南芥中搜索到同源序列,其同源性分別為87％和91％,這些同源序列都分布在擬南芥第一染色