三種草坪草EST-SSR分子標(biāo)記開發(fā)及利用.pdf

1、針對(duì)草坪草分子標(biāo)記少、限制分子生物學(xué)研究和應(yīng)用的問題，本研究以高羊茅、三葉草和早熟禾三種主要草坪草為對(duì)象，運(yùn)用生物信息學(xué)和通用性分析等手段，分別開發(fā)了高羊茅、三葉草和早熟禾EST-SSR標(biāo)記498、445和499個(gè)，并用所開發(fā)的EST-SSR標(biāo)記用于相應(yīng)的遺傳多樣性分析。主要結(jié)果如下:
　　運(yùn)用源于小麥、大麥、玉米、高粱和水稻五種作物的732對(duì)EST-SSR引物，在高羊茅、三葉草和早熟禾上進(jìn)行通用性分析，406對(duì)引物在高羊茅上能有

2、效的擴(kuò)增，占總數(shù)的55.46％。354對(duì)引物在三葉草上能有效擴(kuò)增，占總數(shù)的48.36％。457對(duì)引物在早熟禾上進(jìn)行有效擴(kuò)增，占總數(shù)的62.43％。
　　根據(jù)EST-SSR信息分析結(jié)果，設(shè)計(jì)合成了基于高羊茅EST的108對(duì)引物，經(jīng)電泳檢測，92對(duì)引物在高羊茅上可擴(kuò)增出穩(wěn)定清晰的條帶。設(shè)計(jì)合成了基于三葉草EST的93對(duì)引物，經(jīng)電泳檢測，91對(duì)引物在三葉草上擴(kuò)增出清晰穩(wěn)定的條帶。
　　從以上開發(fā)的EST-SSR引物中選取81對(duì)高羊

3、茅EST-SSR，在12個(gè)高羊茅品種進(jìn)行遺傳多樣性分析，79對(duì)引物表現(xiàn)多態(tài)性，多態(tài)性比率為97.53％，12個(gè)高羊茅品種在GS值（相似系數(shù)）為0.81水平上聚為5個(gè)大類。選取107對(duì)三葉草EST-SSR，在5個(gè)三葉草品種和紅豆草、苜蓿中進(jìn)行遺傳多樣性分析，104對(duì)引物表現(xiàn)多態(tài)性，多態(tài)性比率為97.20％。七份材料在相似系數(shù)為0.51水平分為兩大類。選取43對(duì)早熟禾EST-SSR引物用于19個(gè)早熟禾品種的遺傳多樣性分析，19個(gè)早熟禾品種在