斑點(diǎn)叉尾鮰消化道益生菌的篩選與應(yīng)用研究.pdf

1、為了了解斑點(diǎn)叉尾鮰消化道內(nèi)正常菌群結(jié)構(gòu)，采用平板涂布法對(duì)斑點(diǎn)叉尾鲴(IctaluruspunctatusRafinsque)腸道中需氧和兼性厭氧菌進(jìn)行了定量分析，并對(duì)分離菌株進(jìn)行了分類(lèi)鑒定。結(jié)果表明：斑點(diǎn)叉尾鮰前腸、中腸和后腸的細(xì)菌數(shù)量分別為3.72×106cfu/g、4.32×106cfu/g和16.25×106cfu/g。前腸的主要菌群為產(chǎn)堿菌屬、氣單胞菌屬、腸桿菌科，中腸的主要菌群為腸桿菌科、氣單胞菌屬，后腸的主要菌群為腸桿菌科和

2、氣單胞菌屬。
　　 用正交試驗(yàn)法，通過(guò)對(duì)培養(yǎng)基基礎(chǔ)成分、主要添加成分和無(wú)機(jī)離子對(duì)從養(yǎng)殖斑點(diǎn)叉尾鲴消化道中分離的芽孢桿菌BHI344和BHI346的生長(zhǎng)影響，研究了優(yōu)化培養(yǎng)基。確定菌株BHI344的優(yōu)化配方為：蛋白胨1.0％、牛肉膏0.1％、食鹽0.5％、酵母膏0.5％、葡萄糖1.0％、硫酸銨0.05％、MgSO4·7H2O0.1g/L、CuSO4·5H2O0.15mg/L、MnSO4·H2O1.5mg/L和CoCl2·H2O0.

3、15mg/L；BHI346優(yōu)化培養(yǎng)基配方為：蛋白胨1.0％、牛肉膏0.1％、食鹽1.0％、酵母膏0.5％、硫酸銨0.05％、MgSO4·7H2O0.1g/L、MnSO4·H2O1.5mg/L、CoCl2·H2O0.15mg/L和CaCl20.02g/L。用優(yōu)化培養(yǎng)基與普通營(yíng)養(yǎng)肉湯（蛋白胨1.0％、牛肉膏0.3％和食鹽0.5％）培養(yǎng)對(duì)照試驗(yàn)結(jié)果表明，優(yōu)化培養(yǎng)基有效地提高了細(xì)菌產(chǎn)量。
　　 在餌料中定量添加從斑點(diǎn)叉尾鲴腸道中分離的B

4、HI344菌株后，在連續(xù)投喂斑點(diǎn)叉尾鲴21d的過(guò)程中，于第7d、14d和21d分別定時(shí)采集飼養(yǎng)池中的水樣，測(cè)定水體中氨態(tài)氮、BOD和COD等主要理化因子的指標(biāo)，探討了在斑點(diǎn)叉尾鮰飼料中添加BHI344菌株對(duì)養(yǎng)魚(yú)池水水質(zhì)的凈化效果，并且與對(duì)照池進(jìn)行了比較。結(jié)果表明，將按BHI344菌株添加斑點(diǎn)叉尾鲴餌料中的試驗(yàn)組能有效地降低飼養(yǎng)水體中氨態(tài)氮、BOD和COD值；連續(xù)投喂14d后，分別測(cè)定試驗(yàn)和對(duì)照斑點(diǎn)叉尾鲴苗種的成活率，生長(zhǎng)速度以及對(duì)環(huán)境因

5、子耐受力的結(jié)果表明，在餌料中添加BHI344菌株具有提高斑點(diǎn)叉尾鮰苗種的成活率、促進(jìn)生長(zhǎng)和增加對(duì)環(huán)境因子的耐受力的效果。
　　 為了提供將BHI344菌株作為微生態(tài)制劑的開(kāi)發(fā)菌株的實(shí)驗(yàn)依據(jù)，將BHI344菌株定量添加在飼料中投喂斑點(diǎn)叉尾鲴后，通過(guò)檢測(cè)白細(xì)胞的吞噬活性、溶菌酶的活性、淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)化率以及腸上皮內(nèi)淋巴細(xì)胞的觀察與計(jì)數(shù)等，探討了BHI344菌株對(duì)斑點(diǎn)叉尾鲴免疫機(jī)能的影響。結(jié)果表明：與對(duì)照組相比試驗(yàn)組魚(yú)體內(nèi)血液中白細(xì)胞的