鹽芥(Thellungiella halophila)ThGPX2和ThGPX6基因的克隆和功能的初步研究.pdf

1、鹽脅迫是影響農作物生長和產量的最主要的非生物脅迫之一。隨著人口增加、社會經濟發(fā)展及自然氣候條件變化，水資源短缺、土壤鹽堿化的形勢日益加劇，世界上約有20％可耕地及40％的灌溉地受到不同程度的鹽漬化影響，我國有3億多畝鹽漬化土地，約占全國可耕地面積的25％。鹽漬化嚴重影響農業(yè)生產，成為最主要的嚴重影響到社會經濟發(fā)展的環(huán)境因素之一。長期以來，國內外對鹽漬化土地的改良和利用開展了廣泛的研究。由于鹽生植物可能具有進化上與非鹽生植物截然不同的信號

2、轉導途徑和調節(jié)控制機制，因此人們利用基因工程手段，從鹽生植物中分離和克隆與耐鹽有關的關鍵基因，培育轉基因耐鹽植物和農作物，開發(fā)利用鹽漬地，利用生物技術改善目前的環(huán)境現(xiàn)狀。開展鹽生植物耐鹽相關基因的研究不僅可以了解鹽生植物的耐鹽機制，而且可以為開發(fā)利用鹽生植物耐鹽基因資源、培育耐鹽作物品種奠定基礎。目前開展鹽生植物耐鹽相關基因的研究已逐漸成為國際上植物耐鹽研究領域的一個熱點。 本文利用與擬南芥高度同源性設計簡并引物和RACE-PC

3、R技術從鹽芥cDNA中克隆出ThGPX2基因全長，命名為ThGPX2：基于EST策略的RACE-PCR技術，從鹽芥cDNA中克隆得到一個編碼谷胱甘肽過氧化物酶蛋白的基因，命名為ThGPX6。對這兩個基因序列進行分析，采用SQ RT-PCR對兩個基因在鹽脅迫下的表達模式進行了研究。結果表明，從鹽芥的cDNA中克隆得到ThGPX2 cDNA的長度為740bp，注冊號FJ357243。通過對開放閱讀框及同源性比對分析，該序列的編碼區(qū)(ORF)

4、共510bp，編碼170個氨基酸，分子量約為19020.62 Da，等電點為5.48，具有GPX家族的保守結構域，證實ThGPX2屬于谷胱甘肽過氧化物酶家族成員。從鹽芥的cDNA中克隆得到ThGPX6 cDNA的長度是892bp，注冊號FJ357244。通過對開放閱讀框及同源性比對分析，該序列的編碼區(qū)(ORF)共702bp，編碼234個氨基酸，分子量約為25937.68 Da，等電點為9.35，具有GPX家族的保守結構域和PHGPX的特