阿特拉津對黑斑側褶蛙免疫毒效應及機理研究.pdf

1、農藥等環(huán)境有機物的污染與兩棲類動物種群數(shù)量減少的相互關系是生態(tài)毒理學研究的熱點問題之一。本文以黑斑側褶蛙（Pelophylax nigromaculata）為供式動物，研究了阿特拉津對黑斑側褶蛙的急性毒性，確定了其96h LCso;并在此基礎上，采用半靜態(tài)亞慢性毒理實驗法，研究了阿特拉津對黑斑側褶蛙血液免疫因子（血清堿性磷酸酶、血清總蛋白、血清19M球蛋白）、總淋巴細胞數(shù)和淋巴細胞活性的影響，探討了阿特拉津對兩棲類動物的免疫細胞毒性效應

2、；從阿特拉津對淋巴細胞DNA損傷、淋巴細胞凋亡形態(tài)特征以及凋亡基因mRNA和凋亡蛋白表達量的影響等方面，闡明了阿特拉津誘導黑斑側褶蛙淋巴細胞凋亡的分子機理。
　　 主要研究結果概括如下：
　　 1.阿特拉津急性毒性實驗表明，一定濃度的阿特拉津對黑斑側褶蛙能產生毒性，對黑斑側褶蛙96hLCso為49.25mg/L。
　　 2.0.32-2.56mg/L阿特拉津暴露可引起黑斑側褶蛙體內血清ALP（堿性磷酸酶）活性、T

3、P（總蛋白）和IgM（免疫球蛋白）含量升高。0.32mg/L、0.64mg/L和1.28mg/L濃度組ALP活性升高，與對照組相比差異顯著（P＜0.05）；而在2.56mg/L濃度組，ALP活性稍降低，但與對照組相比仍有顯著升高（P＜0.05）；ALP與阿特拉津濃度間存在劑量效應關系（r=0.9602，P＜0.05）血清中TP含量在各濃度組均有顯著增加（P＜0.05），分別增加了22.40％，43.27％，55.16％和67.56％，且

4、TP含量與阿特拉津濃度之間呈明顯的劑量效應關系（相關系數(shù)r=0.9899，P＜0.05）；IgM的含量隨阿特拉津濃度的增大而增加，在1.28和2.56mg/L濃度組，IgM含量與對照組相比分別增加了39.46％和41.34％（P＜0.05），且IgM含量與阿特拉津濃度間存在劑量效應關系，相關性顯著（r=0.9630，P＜0.05）。
　　 3.不同濃度阿特拉津暴露下，黑斑側褶蛙淋巴細胞數(shù)量呈先增后減趨勢。低濃度組（0.32mg/

5、L）淋巴細胞數(shù)量與對照組相比增加，但差異不顯著；而中濃度組(0.64mg/L)淋巴細胞數(shù)量與對照組相比顯著增加（P＜0.05）；高濃度組(1.28mg/L，2.56mg/L)淋巴細胞數(shù)量與對照組相比下降，且差異不顯著。同時，阿特拉津可引起淋巴細胞活性降低，各濃度組與對照組相比差異均顯著（P＜O.01），其中高濃度組（2.56mg/L）淋巴細胞活性最低。
　　 4.在不同濃度阿特拉津暴露下，黑斑側褶蛙淋巴細胞DNA損傷率、尾長、尾

6、相均隨染毒劑量的增加而呈上升趨勢，并存在劑量.效應關系，相關系數(shù)r分別為：0.9304、0.9841、0.9157。說明阿特拉津可導致黑斑側褶蛙淋巴細胞DNA損傷。不同濃度阿特拉津暴露導致黑斑側褶蛙淋巴細胞形態(tài)發(fā)生改變，0.64mg/L濃度組出現(xiàn)細胞核邊緣染色質固縮的凋亡形態(tài)，1.28mg/L濃度組細胞核邊緣固縮嚴重，核邊緣出現(xiàn)致密顆粒，并且細胞質空泡化；2.56mg/L濃度組細胞核膜消失，染色質固縮，細胞質溶解。
　　 5.對