骨標志物檢測在臨床的應用和意義

1、骨標志物檢測及在臨床的應用和意義,,,,內容,骨質疏松的概況骨質疏松的診斷和治療羅氏骨標志物骨標志物概況骨標志物檢測的臨床應用,內容,骨質疏松的概況骨質疏松的診斷和治療羅氏骨標志物骨標志物概況骨標志物檢測的臨床應用骨標志物的競爭產品,,,骨的代謝過程兩個階段: 吸收和合成,總 I型膠原氨基端前肽,β-膠原降解產物,N 端骨鈣素,,,,,骨的化學組成,無機基質 70% 磷酸鈣 羥基磷灰石有機基質

2、30% 1型膠原（90%） 骨鈣素（10%）,單位體積內無機質和有機質總量被稱為骨量 。,骨質疏松癥的定義,骨組織顯微結構受損，骨礦成分和骨基質等比例減少，骨質變薄，骨小梁減少骨脆性增加，骨折危險度升高全身骨代謝障礙疾病主要發(fā)病人群：45歲以上的絕經婦女，60歲以上的老年人臨床表現(xiàn)：疼痛 、駝背 、呼吸功能下降 、骨折我國老年人口1.34億，每年以3.2%的速度增加，60歲以上人口占總人口10%以上【特點】靜態(tài)，隱匿性

3、疾病非特異性癥狀易被忽視病程較長,骨質疏松的危害,脊椎骨折? 身高降低? 駝背? 疼痛（慢性或急性）,股骨頸骨折脛骨骨折? 急診外科治療? 30 % 無效? 20 % 死亡,橈骨和肱骨骨折? 保守治療? 比下肢和髂骨骨折病情輕,內容,骨質疏松的概況骨質疏松的診斷和治療羅氏骨標志物骨標志物概況骨標志物檢測的臨床應用骨標志物的競爭產品,骨質疏松癥的診斷方法,X線檢查 骨密度（BMD）測定

4、鈣、鎂、磷檢測 骨標志物（吸收、合成、轉換）檢測 β-Crosslaps （β-膠原降解產物） total P1NP （總I型膠原氨基端前肽） N-MID Osteocalcin （ N 端骨鈣素 ）其它指標檢測 甲狀旁腺素、睪酮、雌二醇、性激素結合球蛋白 尿吡啶啉、骨堿性磷酸酶、 1,25(OH)2D3 ……,骨質疏松癥的治療方法,抗再吸收治療二膦酸

5、鹽激素代替療法（HRT）選擇性雌激素受體調節(jié)劑（SERMs）降鈣素合成代謝治療PTH鍶鹽,內容,骨質疏松的概況骨質疏松的診斷和治療羅氏骨標志物骨標志物概況骨標志物檢測的臨床應用骨標志物的競爭產品,原發(fā)和繼發(fā)性骨質疏松的骨標志物,,,PTH,維生素 D,,,,tP1NP,ß-CrossLaps,骨鈣素,,,原發(fā)性骨質疏松這三種標志物可直接反應骨代謝的狀態(tài),繼發(fā)性骨質疏松這兩種標志物有助于評估繼發(fā)性骨質疏

6、松的病因,total P1NP （總骨1型前膠原氨基端延長肽）－骨合成標志物 90%的骨基質是由I型膠原質組成的 ，I型原骨膠原有N-（氨基）和C-（羧基）延長端，在前膠原轉變?yōu)槟z原纖維質期間，它們被特異的蛋白酶去除，繼而形成骨基質。每合成一個膠原分子，就會有一個分子的PINP產生，因而PINP成了I型膠原質沉積的特異性標志物，也因此可定義為一個具有真正意義的骨形成標志物。在I型纖維原細胞構造期間，PINP被釋放入細胞內部

7、，最終進入血液。,,ß-CrossLaps：骨吸收標志物,膠原交聯(lián)的C端肽1型膠原的降解產物膠原降解時釋放入血 是骨重建過程中I型膠原被降解后釋放入血的片斷從腎臟排出。,C-末端,N-末端,骨鈣素：骨轉化標志物,骨鈣素是一種分子量約為5800D的骨特異性蛋白，是骨骼中除膠原蛋白外最常見的蛋白（3%），其作用是將鈣結合到骨上。 血液中可出現(xiàn)完整的骨鈣素（氨基酸1-49）與N-MID片段（氨基酸1-43）。但是

8、完整的骨鈣素不穩(wěn)定，原因在于蛋白酶可在第43和44個氨基酸中間切斷，切斷后生成更為穩(wěn)定的N-MID片段。 N-MID 骨鈣素Elecsys測定使用兩種特異性的單克隆抗體，這兩種單克隆抗體趨向N-MID片段和N端片段的表位。通過該測定可檢測穩(wěn)定的N-MID片段與完整的骨鈣素分子。,甲狀旁腺素由甲狀旁腺合成并分泌入血流中。完整的PTH由一條肽鏈組成，含84個氨基酸，分子量為9.5KD。體內PTH的功能: 刺激破骨細胞的活性

9、和促進骨的再吸收 將鈣從骨轉移到血液中 減少維生素D受體的數(shù)量，降低細胞對維生素D的敏感性 在腎臟內調節(jié)25（OH）維生素D代謝為1,25-（ OH ）維生素D,PTH 甲狀旁腺激素,維生素D的功能與合成,功能維持體內鈣的平衡（血液中鈣和磷的濃度）增加小腸對鈣的吸收骨的礦化作用免疫系統(tǒng)的調節(jié)作用抑制細胞分裂促進細胞分化,合成,骨標志物檢測的臨床應用,骨標志物檢測的臨床應用,骨質疏松癥的輔助診

10、斷骨質疏松癥的治療監(jiān)測骨折風險的風險評估骨標志物使用方法,骨質疏松診斷X-ray,BMD,生物學檢測,,,原發(fā)性骨質疏松,繼發(fā)性骨質疏松PTHVit-D3,,,骨合成P1NP,骨吸收Β-CrossN-MID,骨標志物 vs BMD,骨標志物 vs BMD骨標志物在治療開始后3個月就可以提供治療成功的信息用BMD評估治療的效果需要在大約在治療開始后兩年,骨標志物診斷參考標準,,輔助診斷：維生素D的檢測指征與測量值,懷

11、疑維生素D缺乏日光照射不足因脂肪吸收障礙，腸道吸收維生素D減少維生素D代謝增強（巴比妥類、抗驚厥藥物）維生素D喪失增多（腎病綜合征、腹膜透析）低鈣血癥、低磷血癥、堿性磷酸酶增多骨的礦物質含量減少懷疑維生素D過量,維生素D的數(shù)值判讀：缺乏：20ng/ml (50 nmol/L)維生素D中毒： > 200ng/ml (500 nmol/L)(中國骨質疏松雜志2014年9月第20卷第9期),,骨

12、標志物檢測的臨床應用,骨質疏松癥的輔助診斷骨質疏松癥的治療監(jiān)測骨折風險的風險評估骨標志物使用方法,治療監(jiān)測：合成代謝治療三個月后P1NP即可判斷治療效果,合成治療：用Teriparatide 治療的病人在開始治療后3個月總P1NP即顯示150％的增加?？侾1NP增加超過40％就 表明合成治療是成功的?？乖傥罩委煟河秒p膦酸鹽Alendronate治療的病人總P1NP下降，骨形成標志物下降，表明骨轉換正常，這個治療是成功的。

13、對于抗再吸收治療骨形成標志物和骨再吸收標志物均下降。總P1NP下降超過40％就 表明抗再吸收治療是成功的。,,用P1NP監(jiān)測治療,治療監(jiān)測：抗再吸收治療三個月后ß-CrossLaps即可判斷治療效果,期望值：3個月后從基礎值至少降低35-55%,抗再吸收治療：用二膦酸鹽治療的患者在開始治療后的前3周β-CrossLaps明顯下降。突然停止治療后依從性差的患者情況（…..），會導致β-CrossLaps即刻升高，表明骨標志物

14、敏感性高。 對治療有反應的患者（—）骨標志物維持在低水平上。 而對治療無反應的患者（---）或從未接受治療的患者則停留在基線水平上。β-CrossLaps從基線水平下降＞35-55%，表示治療成功（IOF推薦5）,骨質疏松患者的治療監(jiān)測流程,診斷骨質疏松,開始治療,，檢測標志物的基礎值β-CrossLaps-抗再吸收治療total P1NP-合成代謝治療,3個月后監(jiān)測骨標志物total P1NP或β-CrossLaps,抗

15、再吸收治療后β-CrossLaps明顯下降（大于35-55%）,合成代謝治療后total P1NP明顯上升（大于40%）,抗再吸收治療后β-CrossLaps無明顯降低,合成代謝治療后total P1NP無明顯升高,,維持目前治療，繼續(xù)監(jiān)控，每隔6-12個月一次,詢問依從性、胃腸道副作用，必要時調整治療方案,,骨標志物檢測的臨床應用,骨質疏松癥的輔助診斷骨質疏松癥的治療監(jiān)測骨折風險的風險評估骨標志物使用方法,風險評估—骨

16、折風險高還是低？,ß-CrossLaps是鑒定骨折風險有用的輔助指標。65~80歲女性臀部骨折的10年期風險率明顯增加,骨標志物檢測的臨床應用,骨質疏松癥的輔助診斷骨質疏松癥的治療監(jiān)測骨折風險的風險評估骨標志物使用方法,Elecsys Bone Marker,羅氏擁有最完善的骨標志物檢測菜單, P1NP, β-crosslaps, Osteocalin（MID), 25-OH Vit D3和PTH采血時間：空腹清晨

17、8點，長期觀察建議在相同條件下采血。使用常規(guī)方法采血，抗凝（EDTA－K3或肝素鋰）處理，置于標準管或內有分離膠的試管收集 18分鐘檢測，快速準確，即時可得檢測結果配套質控品PreciControl Bone（復合質控）ECL全自動分析系統(tǒng)Elecsys 2010, cobas e 411, cobas e 601和Modular E170,Source; Roche,2005,,,骨標志物和疾病的相關性表格,,,,骨標志物