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文檔簡介
1、番茄生長素響應因子SlARF6在果實形成和發(fā)育過程中的功能研究重慶大學碩士學位論文(學術學位)學生姓名:唐雨微指導教師:鄧偉教授專業(yè):生物學學科門類:理學重慶大學生命科學學院二〇一六年四月重慶大學碩士學位論文中文摘要I摘要番茄(SolanumlycopersicumL.)是茄科的代表作物,也是研究果實發(fā)育的模式植物。ARFs(AuxinResponseFacts)是一類重要的生長素響應因子,由特異性調控依賴生長素的發(fā)育過程的一個轉錄因子
2、家族基因編碼。近年來已有研究報道一些AFRs家族成員參與了番茄果實形成和發(fā)育過程。本論文分析了SlARF6序列,結果顯示其編碼868個氨基酸,具有典型的ARFs家族的保守結構域:B3DNA結合結構域、ARF結構域和AUXIAA結構域,是番茄ARFs家族成員,并且與擬南芥ARF6基因同源,具有很近的親緣關系。我們采用番茄表達數(shù)據(jù)庫進行分析,發(fā)現(xiàn)SlARF6在所有器官或組織中都有表達,在莖和盛花期表達水平很高。通過定量PCR技術進一步驗證分
3、析結果,證實SlARF6在莖和花器官的表達水平最高,在果實里面也有表達。同時我們又采用RNAi干擾技術來研究SlARF6在番茄發(fā)育過程中的作用,結果發(fā)現(xiàn)SlARF6下調表達的番茄果實出現(xiàn)種子減少,可育性降低的表型,通過花粉管熒光染色和雜交實驗,發(fā)現(xiàn)下調表達SlARF6會降低花粉管進入子房與胚珠結合的能力,從而產(chǎn)生無籽表型。采用RNAsequence技術對轉基因番茄進行了表達譜分析,發(fā)現(xiàn)有72個差異表達基因參與生長素、乙烯和赤霉素等植物激
4、素的生物合成和信號轉導過程;有61個差異表達基因編碼了分別屬于24個家族的61個轉錄因子,這些差異表達基因可能參與或影響了番茄花粉管與胚珠的結合過程。我們采用超表達技術提高了SlARF6在番茄植株中的表達水平,發(fā)現(xiàn)轉基因番茄在幼果期到破色期間果實顏色深綠,葉綠素含量明顯提高,表明SlARF6與果實發(fā)育過程中的葉綠色形成相關。我們的研究證實了SlARF6基因參與了果實形成和發(fā)育過程,表明了ARF家族基因在番茄發(fā)育過程中的基因功能的多樣性。
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