酵母菌的計數_第1頁
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文檔簡介

1、完成實驗,酵母菌種群的數量是怎樣隨時間變化的?,提出問題,,作出假設,,設計實驗,分析結果,得出結論,,,變量如何控制?,探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數量的動態(tài)變化,該探究活動中涉及4個科學方法:(1)數學模型法;(2)抽樣檢測法;(3)顯微觀察法;(4)微生物培養(yǎng)法。,酵母菌的計數(1)計數工具——血球計數板,,實物圖,,正面圖,,側面圖,,計數室,,,滴液處,酵母菌的計數(1)計數工具——血球計數板,,,放大后的計數池,每塊計

2、數板由H形凹槽分為2個同樣的計數池。每個計數池分為9個大方格,其中中央的即為計數室,每個計數室的體積為0.1mm3 。,,,,,16個小格,25個小格,,25X16 = 400小格,,16X25 = 400小格,每個計數室(大方格)共有400小格,總容積為0.1mm3,,,,,,抽樣檢測:5×16=80個小格,抽樣檢測:4×25=100個小格,酵母菌的計數(2)計算: 每毫升培養(yǎng)液中的酵母

3、菌細胞數是多少?,例1:酵母菌的計數通常用血球計數板進行,血球計數板每個大方格容積為0.1mm3 ,由400個小方格組成?,F對某一樣液進行檢測,如果一個小方格內酵母菌過多,難以計數,應先        后再計數。若多次重復計數后,算得每個小方格中平均有5個酵母菌,則10mL該培養(yǎng)液中酵母菌總數有      

4、    個。,例2 :在用血球計數板(2mm×2mm方格)對某一稀釋50倍樣品進行計數時,發(fā)現在一個計數室內(蓋玻片下的培養(yǎng)液厚度為0.1mm)酵母菌平均數為16,據此估算10mL培養(yǎng)液中有酵母菌       個。,2x107,2×108,稀釋,例3  檢測員將1 mL水樣稀釋10倍后,用抽樣檢測的方法檢測每毫升

5、藍藻的數量;將蓋玻片放在計數室上,用吸管吸取少許培養(yǎng)液使其自行滲入計數室,并用濾紙吸去多余液體。已知每個計數室由25×16=400個小格組成,容納液體的總體積為0.1 mm3?,F觀察到圖中該計數室所示a、b、c、d、e 5個中格80個小格內共有藍藻n個,則上述水樣中約有藍藻   個/mL。,5n×105,酵母菌的計數(3)計數的操作稀釋:將酵母菌

6、培養(yǎng)液進行適當的稀釋;若菌液不濃,可不必稀釋。鏡檢計數室:在加樣前,先對計數板的計數室進行鏡檢, 若有污物,則需清洗后才能進行計數。加樣品:在清潔干燥的血球計數板蓋上蓋玻片,再用無菌細口滴管將稀釋的酵母菌液由蓋玻片邊緣滴入一小滴(將計數室充滿即可),讓菌液沿縫隙自行滲入計數室。注意不可有氣泡產生。,酵母菌的計數(3)計數的操作顯微計數:靜止5分鐘后,先用低倍鏡(16×10)找 到計數室

7、所在的位置。然后根據血球計數 板規(guī)格,每個計數室選取5個(或4個)中 方格中的菌體進行計數。每個小方格內約 有5-10個菌體為宜。對于壓在小方格界線 上的酵母菌應取相鄰兩邊及頂角計數。如 要從兩個計數室中計得的值來計算樣品的 含菌量。,酵母菌的計數(4)血球計數板的清洗:

8、使用完畢后,將血球計數板在水龍頭上用水柱沖洗,切勿用硬刷洗刷,洗完后自行晾干或用吹風機吹干。鏡檢,觀察每個小格內是否有殘留菌體或其他沉淀物。若不干凈,則必須重復洗滌至干凈為止。,酵母菌的計數(5)注意事項:進行計數前,應先將試管搖勻,目的是使酵母菌在培養(yǎng)液中混合均勻,以減少計數誤差。顯微鏡計數時,對于壓在小方格界線上的酵母菌,應取相鄰兩邊及頂角計數。若一個小方格內酵母菌數量過多,難以數清時,則可將培養(yǎng)液稀釋一定倍數后再計數。

9、本實驗無對照實驗,酵母菌每天的數量變化可形成前后對照。血球計數板使用后,切勿用硬物洗刷,可采用浸泡和沖洗的方法清洗。,探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數量的動態(tài)變化,酵母菌的計數(6)討論:計數前還應有哪些步驟?需注意些什么?,探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數量的動態(tài)變化,酵母菌培養(yǎng):培養(yǎng)液配制滅菌接種培養(yǎng),配制質量分數為5%的葡萄糖溶液(葡萄糖20g,1000 mL水),分裝到5個燒杯中(200mL/燒杯),用高壓蒸汽滅菌鍋將培養(yǎng)液和

10、取樣、計數時所用的滴管分別滅菌。貼標簽。,接種時要在酒精燈附近,用滅菌干凈的1mL刻度吸管每次吸取0.1mL酵母菌母液,往每個燒杯中加入。(注意:滴加量不要太多,避免初始菌數過多。),將燒杯置于28℃的恒溫箱中培養(yǎng),無菌操作,結果分析(1)數據記錄 以湯麥式血球計數板的數據記錄為例。下表為某一次的數據記錄表,其中,A表示五個中方格的總菌數;B表示菌液稀釋倍數:,探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數量的動態(tài)變化,結果分析(1)數據記

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