竹伐樁促腐微生物的篩選及培養(yǎng)條件的研究.pdf

1、近來竹資源的大力開發(fā)造成林地留下大量伐樁、同時竹木質纖維素原料利用率不高造成資源浪費、以及環(huán)境污染問題，高效竹木質纖維素降解菌的篩選及其降解能力的研究必將是竹伐樁促腐工作、竹木質纖維素原料高效利用的關鍵。本論文主要分為以下幾個部分：
　　 1.竹伐樁促腐微生物的分離篩選
　　 采用直接稀釋法和富集分離法對竹腐伐樁的樣品中的微生物進行分離純化，利用纖維素底物或木質素底物類似物的平板法對菌株進行初篩，采用菌株纖維素酶活、水溶

2、性木質素降解率和漆酶酶活測定的方法進行復篩。共分離篩選15株微生物菌株，包括真菌菌株F2、F3、F4、F9、F10、F13、F14，放線菌菌株A1～A3和細菌菌株B1～B5。
　　 2.菌株降解性能研究及菌種鑒定
　　 采用固態(tài)竹屑培養(yǎng)基，測定了復篩菌株培養(yǎng)15 d時對竹纖維素和竹木質素的降解率，其中真菌菌株F2和F10對竹纖維的降解率分別為23.96％和24.31％，均高于參照菌株綠色木霉YJ-3的19.59％；對竹木

3、質素的降解率分別為16.92％和19.15％，均高于參照菌株黃孢原毛平革菌ME-446的16.53％。生長情況較好的細菌菌株均有一定降解能力。
　　 為挑選有效菌株，對4株產芽孢細菌進行了16S rDNA序列測定和部分生理生化實驗，根據結果初步鑒定B2～B5分別為Bacillus. sp、B. simplex、B.sphaericus、B.subtilis。對真菌菌株F2和F10進行了形態(tài)學觀察，初步將F2鑒定為Trichode

4、rma.sp，將F10鑒定為Fusarium oxysporum。結合F2的rDNA ITS序列分析將F2初步鑒定為Trichoderma harzianum。除F.oxysporum為常見植物病原菌外。其余菌株均為對植物生長有益或有抗植病能力的微生物。
　　 為獲得有效的混合菌種，首先對菌株B2～B5進行了拮抗實驗，發(fā)現B5對B2～B4均有拮抗作用，B2對B3有拮抗作用。據此設計了F2+B2、F2+B4、F2+B5、F2+B3

5、+B4和F2+B2+B4五種菌種組合，測定了混合菌株培養(yǎng)15 d時對竹纖維素和竹木質素的降解率，組合F2+B4和F2+B2+B4對竹纖維素降解率分別為26.64％，28.85％，對竹木質素降解率分別為21.13％，20.64％，均比F2單獨培養(yǎng)效果好。
　　 3.木霉F2產孢條件研究
　　 木霉制劑一般以孢子形式應用。實驗發(fā)現木霉F2在固態(tài)竹屑培養(yǎng)基中的最高孢子生物量遠遠高于PDA液態(tài)培養(yǎng)基。利用瓊脂平板法進行的碳氮源選