生物表面活性劑的菌株篩選及其降解石油烴的作用研究.pdf

1、生物表面活性劑主要是由微生物產(chǎn)生的表面活性化合物，具有化學(xué)合成表面活性劑所無(wú)法比擬的環(huán)境兼容性及廣闊的發(fā)展前景，日益受到國(guó)內(nèi)外科學(xué)界的關(guān)注。豐富生物表面活性劑產(chǎn)生菌資源，提高其產(chǎn)量及對(duì)微生物降解石油烴的研究具有廣泛的生物學(xué)和經(jīng)濟(jì)意義。因此，本文開展了生物表面活性劑方面的研究。其主要研究?jī)?nèi)容及結(jié)果如下：
　　 生物表面活性劑產(chǎn)生菌的選育是生產(chǎn)生物表面活性劑的前提和基礎(chǔ)。本研究中用油平板法初篩，排油圈法復(fù)篩，從油泥漿中篩選出一株高產(chǎn)

2、生物表面活性劑菌株BS-15。并通過(guò)形態(tài)觀察、革蘭氏染色、生理生化反應(yīng)和16SrDNA序列分析，鑒定該菌株為銅綠假單胞菌(pseudomonas aeruginosa)。
　　 本文對(duì)菌株發(fā)酵液表面張力和乳化力進(jìn)行測(cè)定，其表面張力為36.82mN/m，5d后對(duì)柴油的乳化率達(dá)到了92％。并通過(guò)柱層析實(shí)驗(yàn)、薄層層析顯色和紅外光譜分析鑒定出該提取的生物表面活性劑為鼠李糖脂。
　　 采用響應(yīng)面法對(duì)鼠李糖脂生物表面活性劑發(fā)酵培養(yǎng)基

3、成分進(jìn)行優(yōu)化。首先用部分因子實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)篩選出兩個(gè)有顯著影響的因素，分別為硝酸鈉和硫酸鎂結(jié)晶。然后進(jìn)行最陡爬坡實(shí)驗(yàn)逼近最佳響應(yīng)面區(qū)域，利用響應(yīng)面中心組合設(shè)計(jì)確定了硝酸鈉和硫酸鎂結(jié)晶的最佳濃度分別為5.0g/L和4.0g/L。用優(yōu)化后的培養(yǎng)基進(jìn)行發(fā)酵，鼠李糖脂的產(chǎn)量達(dá)到25.5g/L，是優(yōu)化前產(chǎn)量的2.45倍。本研究得到了最優(yōu)的發(fā)酵培養(yǎng)基，為鼠李糖脂的發(fā)酵生產(chǎn)奠定了基礎(chǔ)。
　　 研究鼠李糖脂對(duì)微生物降解石油烴廢水的影響。菌株在32℃搖

4、床培養(yǎng)120h后對(duì)石油烴的降解率達(dá)53％，在相同條件下，添加生物表面活性劑鼠李糖脂后石油烴的降解率提高了11％～20％。添加鼠李糖脂后菌株的生物量明顯增多，表明鼠李糖脂能促進(jìn)菌株的生長(zhǎng)。通過(guò)設(shè)計(jì)正交實(shí)驗(yàn)，對(duì)影響石油烴降解的因素進(jìn)行了研究。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，影響石油烴降解的主導(dǎo)因子是培養(yǎng)時(shí)間，其次是培養(yǎng)溫度和鼠李糖脂的添加量。同時(shí)研究了H2O2與鼠李糖脂協(xié)同作用對(duì)石油烴降解的影響，結(jié)果表明加入200 mg/L的H2O2時(shí)，石油烴的降解率從82