產胞外多糖乳酸菌的篩選及其多糖的結構研究.pdf

1、乳酸菌胞外多糖(exopolysaccharide, EPS）是乳酸菌在菌體生長、代謝過程中產生并分泌到細胞外、常常滲透到培養(yǎng)基中的莢膜多糖或粘液多糖。乳酸菌EPS不僅具有良好的流變學特性，還具有重要的生理活性，如抗氧化、抗腫瘤、免疫調節(jié)、益生作用等。我國擁有豐富的乳酸菌發(fā)酵食品，包括產胞外多糖在內的乳酸菌資源尚未得到有效開發(fā)。本文對酸菜中產胞外多糖的乳酸菌進行高效快速地篩選，純化胞外多糖，對其結構和理化特性進行研究。
　　以家庭

2、自制東北酸菜為樣品，采用產粘菌落法與多糖產量相結合的方法，篩選到兩株產EPS較高的菌株NM105和2-19，經過形態(tài)學觀察、生理生化和16S rDNA手段對這兩株菌進行了系統(tǒng)鑒定，判定這兩株菌均屬于明串珠菌屬，分別命名為Leuconosto citreum NM105和L.mesenteroides subsp.dextranicum2-19。
　　將兩株菌分別接種至含5％蔗糖的MRS培養(yǎng)基中，25℃培養(yǎng)48 h，得到產EPS的發(fā)

3、酵液，經離心、除蛋白、醇沉、透析得到粗多糖的水溶液。粗多糖再經凝膠過濾層析純化得到均一的多糖組分，冷凍干燥得到純多糖，產量分別為23.5 g/L和11.4 g/L。結合紫外分析、高效體積排阻色譜分析，兩株菌所產多糖均不含核酸和蛋白，重均分子量Mw分別為1.01×108 Da和8.79×107 Da。采用氣相色譜和薄層色譜分析單糖組成，結果表明兩株菌所產EPS均只含葡萄糖。
　　結合單糖組成分析、紅外光譜分析、核磁共振光譜分析，L.

4、citreum NM105所產EPS含有三種糖單元，分別為[→6)-α-D-Glcp-(1→]、[α-D-Glcp-(1→]和[→2,6)-α-D-Glcp-(1→]，摩爾比接近1:1:1，是一種帶有高含量的α-(1→2)糖苷鍵的支鏈多糖。而L.mesenteroides subsp.dextranicum2-19所產EPS是一種由α-(1→6)糖苷鍵連接的高度線性葡聚糖。
　　L.citreum NM105所產EPS的理化性質分