色米酚類物質調節(jié)脂質生成與積累的機理研究.pdf

1、色米即有顏色的糙米，是特種水稻的一種。色米以其獨具特色的口味、五彩繽紛的顏色以及豐富的營養(yǎng)日益受到人們的青睞。營養(yǎng)成分中富含多種對人體有益的維生素及微量元素。另外，色米中含有的酚類物質賦予了色米較強的抗氧化性。同時，有關色米減肥的研究也有相關報道，但其抑制脂肪生成和積累的機理還沒有得出定論。
　　該課題的目的是研究七種不同品種的色米提取物中酚類物質的抗氧化性物質基礎以及抑制脂質生成與積累的作用機理。以間充質干細胞為模型進行成脂分化

2、，闡述其潛在的調節(jié)脂質生成和積累的機理，利用實時熒光定量聚合酶鏈式反應(Realtime-PCR)研究脂肪細胞與脂代謝相關基因轉錄的影響，用來確定色米是否具有治療或預防肥胖的功效。
　　本實驗主要包括三大部分。第一部分對原料色米進行提取，測定提取物中總酚含量和黃酮含量以及其抗氧化活性，采用多種自由基體系如DPPH·自由基、ABTS+自由基及超氧自由基O2-·的清除能力。結果表明總酚含量和黃酮含量越高的品種，具有越強的抗氧化能力，具

3、體表現(xiàn)在其清除自由基的能力。色米中總黃酮對總酚有一定的貢獻，二者均對其抗氧化活性有很大的貢獻，三種自由基間也存在較高的相關性。
　　第二部分利用紫外分光光度法對提取物酚類物質進行全波長掃描以及高效液相色譜法進行成分分析。結果顯示酚類物質是其抗氧化的物質基礎，主要有沒食子酸、兒茶素、阿魏酸，香草酸以及咖啡酸等。
　　第三部分利用C3H10T1/2-Clone8間充質干細胞進行體外研究，以確定色米提取物抑制脂肪形成過程的作用，對

4、誘導分化后的細胞形成的內脂滴進行油紅O染色和量化法，Realtime-PCR測定與脂代謝相關基因(PPARγ，C/EBPα，F(xiàn)abp4，AdipoQ，Plin1)mRNA的表達量，分析脂肪的分化程度。結果表明:添加色米提取物處理后的實驗組，其細胞脂代謝相關基因表達與陽性對照組相比均出現(xiàn)不同程度的下調，樣品處理組各基因表達水平與酚類含量趨勢一致;利用蛋白質印記法(Western Blot)對成脂分化所必需的過氧化物酶體增殖劑激活受體PPA