硅基質(zhì)膜吸附能力的再生研究以及一種蛋白質(zhì)預(yù)染marker新工藝的開(kāi)發(fā).pdf

1、21世紀(jì)是生物科學(xué)的世紀(jì)，進(jìn)入21世紀(jì)以來(lái)生物科學(xué)的新進(jìn)展，新成就如雨后春筍，層出不窮。達(dá)爾文進(jìn)化論的建立，對(duì)生物學(xué)及其他有關(guān)學(xué)科的發(fā)展產(chǎn)生了重大影響；孟德?tīng)栠z傳定律的提出，對(duì)生物遺傳學(xué)的發(fā)展指明了方向；近現(xiàn)代，DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的提出以及人類(lèi)基因組計(jì)劃標(biāo)志著生物學(xué)的發(fā)展越來(lái)越趨于國(guó)家化。
　　生物學(xué)發(fā)展到今天，微觀和宏觀兩個(gè)方向是生物學(xué)發(fā)展的主要方向：在宏觀方面，生物學(xué)的發(fā)展在為解決區(qū)域性和全球性的資源利用和環(huán)境保護(hù)等問(wèn)題提供了許

2、多中解決的方法；在微觀方面，主要是指分子生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)的研究發(fā)展，從而更好的解決人類(lèi)疾病等病因問(wèn)題。
　　眾所周知，大到國(guó)家級(jí)甚至世界級(jí)的生物科學(xué)合作研究，小到一些基礎(chǔ)生物學(xué)的實(shí)驗(yàn)研究，生物學(xué)的研究發(fā)展都離不開(kāi)強(qiáng)大的經(jīng)濟(jì)實(shí)力做后盾。為了降低實(shí)驗(yàn)室的實(shí)驗(yàn)成本，本實(shí)驗(yàn)將從核酸提取和蛋白染色兩個(gè)方面探究如何降低基礎(chǔ)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究成本。
　　核酸提取：對(duì)市場(chǎng)上質(zhì)粒提取試劑盒中吸附柱可重復(fù)性利用性進(jìn)行了初步的研究。探討了不同溶液

3、、不同保存時(shí)間、不同 pH值、不同離子濃度以及不同溫度浸泡吸附柱對(duì)恢復(fù)吸附柱再吸附能力的影響。結(jié)果表明：吸附柱使用后經(jīng)過(guò)一定的處理可以有效地恢復(fù)其對(duì)質(zhì)粒 DNA的再吸附能力。最佳處理?xiàng)l件是：pH=2.04、濃度為0.01M的PBS緩沖液、4℃保存6天時(shí)間。經(jīng)過(guò)處理，吸附柱的再吸附能力相對(duì)于吸附柱第一次吸附能力有些增強(qiáng)。
　　蛋白染色：利用工業(yè)化的活性染料對(duì)商品化的蛋白樣品進(jìn)行染色處理，通過(guò)SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳分析染色效果，結(jié)

4、果表明：活性染料中的活性艷藍(lán)對(duì)蛋白有較好的染色效果，而其它酸性染料則對(duì)蛋白質(zhì)沒(méi)有明顯的染色效果；活性艷藍(lán)對(duì)蛋白最佳的染色條件為:50℃水浴，染色10min效果最好，并且染色時(shí)間對(duì)染色效果影響不大，染色效果主要取決于染色的溫度；活性艷藍(lán)并不是對(duì)所有蛋白質(zhì)都有一個(gè)很好的染色效果，例如，對(duì)胰蛋白酶活性艷藍(lán)染料無(wú)法對(duì)其進(jìn)行染色；透析處理蛋白染色溶液可以得到較為純凈的單一條帶預(yù)染蛋白條帶，通過(guò)幾種不同蛋白的混合可以粗略的得到商品化預(yù)染marker