乏氧響應(yīng)型抗腫瘤診療前藥的設(shè)計、合成及評價.pdf

1、化療是治療癌癥的重要手段之一，但現(xiàn)有抗癌藥物一般具有較大的毒副作用，為了減小其副作用，大量新穎的前藥被開發(fā)出來。診斷治療型前藥，兼?zhèn)淞嗽\斷與治療的功能，實現(xiàn)了藥物的可控釋放，并對活性藥物的釋放進行檢測，及時反饋了治療效果。有機小分子診療前藥具有結(jié)構(gòu)簡單、便于修飾、生物相容性好等特點，成為研究的熱點。大多數(shù)腫瘤是實體瘤，乏氧是實體瘤的重要特征之一，導(dǎo)致腫瘤對化療藥物的不敏感并產(chǎn)生耐藥性。然而，乏氧也為腫瘤的治療提供了思路，即用乏氧響應(yīng)基團

2、修飾活性藥物，使其只在腫瘤的乏氧區(qū)域被激活，釋放活性藥物，達到選擇性治療的效果。
　　本研究以硝基芐基為乏氧響應(yīng)基團，以2-羧基-2’-羥基聯(lián)苯（BCM）為熒光染料前體，通過共價鍵與活性藥物 FDU進行偶聯(lián)，設(shè)計合成了乏氧響應(yīng)型診療前藥FDU-BCM-NO2。采用NMR、MS和IR等手段對前藥和中間體進行表征；采用HPLC法對前藥的還原組分進行測定，探討其釋藥機制；采用熒光光譜法測定前藥與 Na2S2O4孵育不同時間后的熒光強度，

3、探討 FDU釋放量隨時間的變化；采用MTT法測試了FDU和FDU-BCM-NO2對MCF-7、MGC-803腫瘤細胞和BRL-3A正常肝細胞的細胞毒性，采用流式細胞分析法測試FDU-BCM-NO2誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡的情況，評價了FDU-BCM-NO2的體外抗腫瘤效果；采用熒光成像法對FDU-BCM-NO2孵育的乏氧腫瘤細胞及腫瘤球成像，評價了FDU-BCM-NO2對乏氧的診斷和對 FDU的示蹤效果。結(jié)果表明：乏氧條件下，F(xiàn)DU-BCM-N

4、O2在被還原的同時釋放出活性藥物FDU和熒光分子BCM，BCM釋放量隨乏氧孵育時間的延長而增加，可利用BCM的熒光信號監(jiān)測FDU的釋放。在常氧條件下，F(xiàn)DU分別孵育MCF-7乳腺癌細胞、MGC-803胃癌細胞和BRL-3A肝細胞48 h后，細胞存活率分別為41.43％、41.70％和48.09％，而FDU-BCM-NO2孵育的三種細胞存活率則分別為91.09％、91.22％和99.08％；在乏氧條件下，F(xiàn)DU孵育的MCF-7和 MGC-

5、803的細胞存活率則分別為22.57％和41.70％，而采用FDU-BCM-NO2孵育后，細胞存活率則分別44.76％和51.27％，表明FDU對正常細胞和腫瘤細胞均有抑制作用，而FDU-BCM-NO2具有乏氧選擇性，只對乏氧腫瘤細胞具有抑制作用，對正常細胞則不產(chǎn)生毒性。在乏氧條件下，F(xiàn)DU-BCM-NO2孵育的MGC-803細胞，52.21％的細胞發(fā)生凋亡，表明FDU-BCM-NO2以凋亡的方式抑制腫瘤細胞增殖。FDU-BCM-NO2