毛細管電泳檢測多種靶DNA及小分子化合物.pdf

1、本工作將毛細管電泳—電化學檢測技術引入靶DNA分析中，將辣根過氧化物酶(HRP)催化過氧化氫(H2O2)氧化鄰氨基酚的酶促反應與其氧化產物的電極還原相偶合，利用毛細管電泳電化學檢測技術間接檢測鄰氨基酚—H2O2-辣根過氧化物酶(HRP)體系中的HRP含量。在此基礎上引入生物素．親合素系統(tǒng)，通過毛細管電泳安培法進行分離檢測21個、39個、80個堿基的靶DNA。 第一章為緒論，介紹了毛細管電泳技術的發(fā)展和研究現(xiàn)狀以及本課題的意義；第

2、二章介紹了毛細管電泳電化學間接檢測HRP的情況；第三章用毛細管電泳電化學檢測21個、39個、80個堿基的靶DNA；第四章用毛細管電泳電化學檢測小分子化合物腺苷；第五章用毛細管電泳電化學發(fā)光檢測腺苷。 在最佳反應條件下，測定游離HRP檢測限為1.09×10-12mol·L-1(S/N=3)，線性范圍為2-3×10-12～3.5×10-10mol·L-1。 利用此方法成功應用于檢測21個堿基的靶DNA，測定線性范圍為4.0×

3、10-11-2.0×10-9mol·L-1，檢測限為1.2×10-11mol·L-1(S/N=3)。對1.0×10-10mol·L-1的21個堿基ssDNA進行7次平行測定，相對偏差為7.2％。在實驗條件最優(yōu)化的情況下，可以達到通過毛細管電泳安培法對21個堿基的單鏈DNA進行分離檢測。 利用此方法成功應用于檢測39個堿基的靶DNA，測定線性范圍為5.0×10-11-1.2×10-9mol·L-1，檢測限為2.4×10-11mol

4、·L-1(S/N=3)。對1.0×10-10mol·L-1的39個堿基ssDNA進行7次平行測定，相對偏差為6.4％。在實驗條件最優(yōu)化的情況下，可以達到通過毛細管電泳安培法對39個堿基的單鏈DNA進行分離檢測。 利用此方法成功應用于榆測80個堿基的靶DNA，測定線性范圍為5.0×10-11-1.0×10-9mol·L-1，檢測限為3.0×10-11mol·L-1(S/N=3)。對1.0×10-10mol·L-1的80個堿基ssD

5、NA進行7次平行測定，相對偏差為6.9％。在實驗條件最優(yōu)化的情況下，可以達到通過毛細管電泳安培法對80個堿基的單鏈DNA進行分離檢測。 利用此方法應用于同時檢測21個、39個、80個堿基的單鏈DNA，成功實現(xiàn)了同時進行多個單鏈DNA的分離檢測。 利用毛細管電泳電化學方法成功應用于檢測小分子化合物腺苷，通過實驗，本文得出運用2.5×10-2mol·L-1 pH8.6的Tris緩沖液，10kV作為分離電壓，12kV和5s作為