尿中苯巰基尿酸和反-反式粘糠酸液相色譜聯(lián)用技術(shù)方法的建立與初步應(yīng)用.pdf

1、中山大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文尿中苯巰基尿酸和反反式粘糠酸液相色譜聯(lián)用技術(shù)方法的建立與初步應(yīng)用碩士研究生：陳浩導(dǎo)師：劉移民主任醫(yī)師專(zhuān)業(yè)：勞動(dòng)衛(wèi)生與環(huán)境衛(wèi)生學(xué)答辯委員會(huì)主席：答辯委員會(huì)委員：卻前勝中山大學(xué)廣州2007年5月蠡建立反相液相色譜(ReversePhaseHighPerformanceLiquidChromatography，RPHPLC)紫外檢測(cè)器測(cè)定tt—MA的方法時(shí)，我們一方面選擇了成本較低和操作簡(jiǎn)便的紫外檢測(cè)器，另一方面采用

2、了高離子強(qiáng)度的流動(dòng)相和化學(xué)穩(wěn)定性好的反相C。固定相。SPMA的測(cè)定方法，采用高選擇性的液相色譜并搭配離子阱質(zhì)譜檢測(cè)器，具有良好的敏感性并且避免了復(fù)雜的樣品處理過(guò)程和被分析物的衍生化過(guò)程。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明采用高效液相色譜聯(lián)用技術(shù)檢測(cè)尿中的SPMA和ttMA，實(shí)驗(yàn)方法的靈敏度和特異性高，而且能避免復(fù)雜的樣品處理過(guò)程，為復(fù)雜樣品的分析提供了強(qiáng)有力的手段。本研究通過(guò)職業(yè)衛(wèi)生檢測(cè)中心的現(xiàn)有的設(shè)備，建立起實(shí)用的檢測(cè)方法，并初步應(yīng)用于苯及同系物職業(yè)暴露人

3、群及苯暴露大鼠尿樣的檢測(cè)，為今后國(guó)家制定tt—MA和SPMA標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法提供依據(jù)。材料和方法1尿中ttMA反相液相色譜紫外檢測(cè)法的建立根據(jù)ttMA的理化性質(zhì)建立反相液相色譜紫外檢測(cè)法，通過(guò)液一液萃取方式對(duì)樣品進(jìn)行前處理。色譜柱的固定相采用ZorbaxSBC8柱代替?zhèn)鹘y(tǒng)的Cs柱，避免了由于污染而造成柱效率逐漸降低的現(xiàn)象發(fā)生；流動(dòng)相為甲醇、乙晴、磷酸混合溶液，采用梯度洗脫的方式實(shí)現(xiàn)樣品的分離。ttMA色譜峰通過(guò)紫外檢測(cè)器定性和定量。2尿中S

4、PMA高效液相色譜一離子阱質(zhì)譜聯(lián)用法建立根據(jù)S—PMA的理化性質(zhì)建立高效液相色譜離子阱質(zhì)譜聯(lián)用法，樣品通過(guò)液液萃取技術(shù)提取后進(jìn)入色譜柱。色譜柱的固定相采用鍵合在硅膠上的Cis烷基非極性固定相，流動(dòng)相為乙酸銨和甲醇的混合物，采用梯度洗脫的方式實(shí)現(xiàn)樣品的分離。以ESI模式進(jìn)行質(zhì)譜數(shù)據(jù)采集，結(jié)果可以得到樣品的色譜圖和質(zhì)譜圖，并對(duì)譜圖進(jìn)行分析和歸屬。3苯及同系物職業(yè)暴露人群尿中ttMA和SPMA測(cè)定的應(yīng)用選擇某船廠油漆崗位的職工為暴露組，并分成