簡介：目的探討慢性乙型肝炎患者B基因型和C基因型之間IL18及其他細胞因子水平及相關(guān)臨床關(guān)系。方法采用乙型肝炎病毒HBVB、C基因分型熒光檢測法對103位慢性乙型肝炎患者進行B、C基因型檢測；用雙抗體夾心ELISA檢測慢性乙型肝炎患者及健康對照組血清IL18、IL4、IL12、IFNΓ水平；比較慢性乙型肝炎患者與正常對照組之間及不同基因型之間IL18及其他細胞因子表達的差異。結(jié)果①103例慢性乙型肝炎患者中B型75例，占72％75103，C型17例，占17％17103，BC混合型4例，占4％4103，未分型7例，占7％7103；②在慢性乙肝輕度、慢性乙肝中度、慢性乙肝重度、乙肝肝硬化以及慢性乙肝重型患者組中，B基因型比例均高于C基因型，除慢性乙肝重型組C基因型高于慢性輕度組P005；③C基因型組中HBEAG陽性病例所占比例稍高于B基因型組，但無顯著性差異P005，HBEAG陽性病例在B、C基因型組間分布無顯著性差異；C基因型組中血清HBVDNA水平顯著低于B基因型組P④慢性乙型肝炎HB_VDNA中病毒載量組C基因型分布高于高病毒載量組P⑤慢性乙型肝炎C基因型患者IL18、IL12、IFNΓ分泌水平顯著高于B基因型P⑥慢性乙型肝炎各組IL18、IL12、IFNΓ水平顯著高于正常對照組P⑦慢性乙型肝炎患者IL18、IL12、IFNΓ水平與患者ALT、AST、TBL呈正相關(guān)P結(jié)論103例慢性乙型肝炎患者主要以B基因型為主，C基因型可能更傾向分布于較為嚴重的肝病患者；IL18、IL12、IFNΓ與病情輕重、肝臟炎癥活動有關(guān)，IL4在肝臟炎癥活動加劇時分泌受到抑制；慢性乙型肝炎炎性活動時C基因型患者TH1細胞免疫水平強于B基因型，而TH2細胞免疫受抑制程度可能更高。

簡介：分類號巒級Y9029G3單位代碼學Q10142003285ATLRSHRNA重組腺病毒載體在C6細胞中的功能表達及對SHR的ATLR分布的影響研究生堂瑾指導教師肖佳塞熬捶合作指導教師，。一L艮監(jiān)熬援叁堂亟主，盤些筐囟墊冠心病基礎與臨床所在學院出西匡盟盤堂笠L直座醫(yī)生瞳別稱向級類名疔L吐學業(yè)究￡H申專研山西醫(yī)科大學預士學位論文ABSTRACTAIMPURPOSETODETECTTHEEXPRESSIONOFATLRGENEOFRATGLIOMACELLSINVITROANDTHEDISTRIBUTIONOFATLRPROTEINOFSPONTANEOUSHYPERTENSIVERATSHRINVIVOTHROUGHTRANSFECTIONWITHCONSTRUCTEDADENOVIRUSBASEDSHRNAEXPRESSIONSYSTEMSWHICHTARGETAGAINSTTHERATANGIOTENSINIIRECEPTORGENE，F(xiàn)URTHERMORETOINVESTIGATETHEEFFICACYOFPREFORMEDSIRNASBOTHINVITROANDINVIVOTOMODULATETHEEXPRESSIONOFTARGETGENEINMAMMALIANCELLSFORANTIHYPERTENSIVETHERAPYINSHRATPOSTTRANSCRIPTIONALLEVELEXPERIMENTALDESIGNANDMETHODSUSEHUMANEMBRYOKIDNEY293CELLTOCULTUREADENOVIMSBASEDSHRNAEXPRESSIONSYSTEMSTARGETINGAGAINSTTHERATANGIOTENSINIIRECEPTORGENETHEINFECTIVITYOFRECOMBINANTADENOVIRALVECTORSWASDETERMINEDBYATCID50ASSAYANDTHENRECOMBINANTADENOVIRALVECTORSWERETRANSFECTEDINTORATGLIOMACELLSTHECULTUREDCELLSWERECOLLECTEDATDIFFERENTPHASESRTPCRANDWESTERNBLOTWEREPERFORMEDSHRWERETRANSFECTEDWITHRECOMBINANTADENOVIRALVECTORSBYCAUDALVEININJECTIONMETHODATLREXPRESSIONOFMAJORORGANINCLUDEHEART，LIVERKIDNEYADRENALGLANDANDAORTAWASDETECTEDBYIMMUNOHISTOCHEMICALMETHODRESULTSTADENOVIMSBASEDSHRNAEXPRESSIONSYSTEMSTARGETINGAGAINSTTHERATANGIOTENSINIIRECEPTORGENEWERETRANSFECTEDINTOC6SUCCESSFULLYC6ATLRMRNAANDPROTEINLEVELSBEHAVEDULTIMATELYSAMECOMPAREDTOTHECONTROL，C6ATLRMRNAANDPROTEINEXPRESSIONCOULDBEINHIBITEDSIGNIFICANTLY2ADENOVIMSBASEDSHRNAEXPRESSIONSYSTEMSTARGETINGAGAINSTTHERATANGIOTENSINIIRECEPTORGENEWERETRANSFECTEDINTOSHRINVIVOIMMUNOHISTOCHEMICALMETHODSHOWEDTHATATIREXPRESSIONOFMAJORORGANDECREASEDCONSIDERABLYCONCLUSIONADENOVIRUSBASEDSHRNAEXPRESSIONSYSTEMSTARGETINGAGAINSTTHERATANGIOTENSINLIRECEPTORGENEWERETRANSFECTEDSUCCESSFULLYTHESHRNASWITHA22NTSTEMANDASHORTLOOPWERECLEAVEDINTOSMMLINTERFERINGDSRNASIRNABYTHEDICERBOTHINVITROANDINVIVO，THETRANSCRIBEDSIRNAENABLESTHEEFFECTIVESILENCINGOFGENEEXPRESSIONTOTHETARGETMRNAANDLEADSTOEFFECTIVEINHIBITIONOFTRANSLATIONOFPROTEINSANDWILLLAYTHEFOUNDATIONOFAPPLICATIONOFGENESILENCINGTECHNOLOGYTOHYPERTENSIVERATFORTHEACTION，CURATIVEEFFECTANDAPPLICATIONVALUEANDBEHELPFULTOGENETICTHERAPYOFTHEHYPERTENSIONKEYWORDSRNAI，HYPERTENSION，ANGIOTENSINIIRECEPTOR，VECTOR，SHORTHAIRPINRNALI

簡介：點擊查看更多應用兩步氯化鈣轉(zhuǎn)化法高效制備雙自殺基因重組腺病毒及其應用.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：分類號密級UDC保密期限博士學位論文博士學位論文題目氯和二氧化氯對人輪狀病毒的消毒規(guī)律及基因組損傷作用研究作者姓名薛斌指導教師李君文研究員培養(yǎng)單位中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院衛(wèi)生學環(huán)境醫(yī)學研究所專業(yè)名稱勞動衛(wèi)生與環(huán)境衛(wèi)生學論文提交日期2013年6月6日學位授予單位中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院答辯委員會主席朱琳教授中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院制中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院制目錄I目錄縮略詞表A摘要1ABSTRACT1第一章前言11水環(huán)境中的輪狀病毒及其危害111輪狀病毒簡介112輪狀病毒的危害113輪狀病毒的傳播方式214水環(huán)境中的輪狀病毒32常見飲水消毒技術(shù)簡介321氯消毒法322二氧化氯消毒法423臭氧消毒法424紫外線消毒法525氯胺消毒法526聯(lián)合消毒法63消毒劑滅活病毒效果評價方法的研究進展731細胞培養(yǎng)法732免疫學方法733分子生物學方法834細胞培養(yǎng)聯(lián)合PCR法1135蛋白酶、核酸酶PCR前處理法1136免疫捕獲、細胞受體聯(lián)合PCR法124課題的提出125本研究的目的和意義13第二章氯和二氧化氯對水中人輪狀病毒消毒效果研究141引言142實驗材料與方法1521實驗材料15211研究對象15212儀器設備15

簡介：分類號R741密級單位代碼10422學號2011120131∥▲東歲，吞博士學位論文DISSERTATIONFORDOCTORALDEGREE專業(yè)學位論文題目腦電信號復雜度及全局域同步化在評價阿爾茨海默病認知障礙中的作用研究EFFECTOFEEGCOMPLEXITYANDGLOBALFIELDSYNCHRONIZATIONINTHEEVALUATIONOFCOGNITIVEDECLINEINALZHEIMER’SDISEASE作者姓名培養(yǎng)單位專業(yè)名稱指導教師合作導師馬馳騁山東大學醫(yī)學院神經(jīng)病學周盛年教授2013年10月10日目錄中文摘要1英文摘要6符號說明～13正文部分材料方法24實驗結(jié)果一34討J侖’39結(jié)論55附表56附圖～61綜述‘66參考文獻一83致謝一104攻讀學位期問發(fā)表的學術(shù)論文～105學位論文評閱及答辯情況表’106外文論文107

簡介：目的探討信息支持對冠心病患者出院后人格特征、行為模式認知及服藥依從性的影響。方法選取2010年3月2011年10月在我院住院的冠心病患者320例，入院后簡單隨機分為觀察組與對照組，每組160例，其中觀察組出院后采用定期組織講座活動、電話咨詢、來院復診等方式繼續(xù)提供信息支持，對照組采用常規(guī)門診隨訪。在信息支持前后，通過問卷調(diào)查的方式比較信息支持前和支持后6個月病人的人格特征、行為模式認知情況差異以及兩組患者出院后1個月、3個月、6個月、1年服藥依從性的差異。所有數(shù)據(jù)采用SPSS160軟件進行統(tǒng)計分析。結(jié)果冠心病患者艾森克人格問卷簡式量表中國版的神經(jīng)質(zhì)和掩飾性兩個維度評分顯著高于全國常模P＜005。A型行為類型問卷冠心病患者的TH、CH、THCH評分顯著高于南方人常模P＜005。人格特征與行為類型相關(guān)分析顯示內(nèi)外向與神經(jīng)質(zhì)維度都與時間緊迫感TH、競爭敵意感CH呈正相關(guān)掩飾性與競爭敵意感呈負相關(guān)而人格特征四個維度除內(nèi)外向和神經(jīng)質(zhì)與THCH總分呈正相關(guān)外，其余因子均與THCH總分無直接相關(guān)。冠心病患者人格特征四個維度信息支持前后測定結(jié)果無統(tǒng)計學意義P＞005。A型行為類型問卷冠心病患者信息支持前后TH、CH、THCH評分有統(tǒng)計學意義P＜0001。冠心病患者出院后觀察組通過繼續(xù)信息支持后1個月、3個月、6個月、1年服藥依從性方面與對照組差異有統(tǒng)計學意義P＜0001，有顯著性差異。結(jié)論1冠心病患者在人格特質(zhì)上更加的敏感和更傾向于掩飾自己的問題。2冠心病患者在行為類型上更傾向于A型行為模式，時間匆忙感和競爭敵意感很強。3冠心病患者人格特征的內(nèi)外向與神經(jīng)質(zhì)維度與A型行為模式呈正相關(guān)。4冠心病患者人格特征四個相關(guān)維度通過信息支持后沒有明顯改變，這可能與人格的氣質(zhì)因素有關(guān)，通常不易改變。5冠心病患者A型行為，時間緊迫感和競爭敵意感通過信息支持能明顯改善。6冠心病患者出院后觀察組通過繼續(xù)信息支持能提高患者的服藥依從性。

簡介：研究背景當今，全球人類的健康面臨的Ⅱ型糖尿病以下簡稱糖尿病威脅正日益增加，糖尿病患病率和糖尿病患者數(shù)正在快速增長，糖尿病已越來越成為威脅人類生活和生存的慢性疾病。肝臟是葡萄糖代謝的主要器官，對于機體內(nèi)糖的貯存、分解和血糖調(diào)節(jié)等方面起著關(guān)鍵作用，而肝臟功能受損往往影響正常的糖代謝，甚至可出現(xiàn)糖耐量減退或糖尿病。資料顯示，約有80％的慢性肝病患者存在糖耐量異常，糖尿病比率可達30％，而正常人群糖尿病發(fā)生率僅為06％。在各型肝炎病毒感染中，乙肝、丙肝、丁肝均可引起不同程度的慢性肝功能損害。而乙肝為最常見的肝炎病毒感染類型。目前我國乙肝感染率為5917％，HBSAG陽性率為10％，每年約有25萬人死于與乙肝有關(guān)的肝硬化或肝癌，在青少年和成人期感染HBV者中，約5％10％發(fā)展成慢性，表現(xiàn)為活動性慢性乙型肝炎，慢性乙型肝炎患者發(fā)展為肝硬化的估計年發(fā)生率為21％。關(guān)于肝源性糖尿病的發(fā)病機制有胰島素抵抗學說、胰島素代謝障礙學說、門腔靜脈分流“逃逸”學說、肝酶缺陷學說、病毒學說等。病毒學說認為，肝臟和胰腺有著相似的組織結(jié)構(gòu)和胚胎起源。肝炎病毒除損害肝臟外，對胰腺也有直接損害和親和力，免疫復合物的沉積，破壞胰島Β細胞的分泌功能，致血糖升高。國內(nèi)外對肝炎病毒感染與糖尿病的關(guān)系研究中發(fā)現(xiàn)，丙型肝炎病毒與糖尿病的關(guān)系最為密切。而乙肝與糖尿病的關(guān)系報道結(jié)果不一。本文采用巢式病例對照研究方法，以乙肝感染血清標志物HBSAG為研究指標，探討乙肝病毒感染與糖尿病的關(guān)系，為該病制定預防控制策略，篩查重點人群，開展三級預防，減少糖尿病和乙肝的雙重威脅，保障人類健康和減少經(jīng)濟損失具有重大意義。研究目的1、以HBSAG為乙肝病毒感染的標記，探討乙肝病毒感染與糖尿病的關(guān)系。2、探討HBSAG與HBCAB交互作用在糖尿病發(fā)病中的效應。研究方法采用巢式病例對照研究，病例、對照以個體為單位進行12配比，對20062009年在章丘市人民醫(yī)院固定查體的51個單位的全體職工共5107人進行連續(xù)4年的追蹤觀察，從中篩查出符合糖尿病確診標準的221人作為病例。對照選擇與病例相同查體時間、同單位、同性別、年齡≤5歲的非糖尿病人群作為對照，如果同單位沒有可選擇的對照，則從相近查體時間、相近工作單位選擇，每個病例選擇2個對照。運用單因素及多因素LOGISTIC分析方法，探討HBSAG與糖尿病的關(guān)系；運用相加模型研究HBSAG與HBCAB交互作用在糖尿病發(fā)病中的效應。研究結(jié)果1、乙肝病毒感染與糖尿病關(guān)系將HBSAG作為乙肝感染的重要標記，以“健康”體檢人群作為研究對象，單因素條件LOGISTIC分析發(fā)現(xiàn)，HBSAG與2型糖尿病的關(guān)系有統(tǒng)計學意義，HBSAG陽性人群中發(fā)生糖尿病的危險性為HBSAG陰性人群的3526倍，95％CI13209608。在調(diào)整有關(guān)潛在混雜因素后，多因素條件LOGISTIC分析發(fā)現(xiàn)，HBSAG與糖尿病之間仍有明顯相關(guān)性，HBSAG陽性人群中發(fā)生糖尿病的危險性為HBSAG陰性人群的5153倍，95％CI179614782。2、HBSAG與HBCAB對糖尿病發(fā)病的交互作用在未調(diào)整混在因素前與用多因素LOGISTIC調(diào)整有關(guān)混在因素后，HBSAG與HBCAB共同存在時的效應皆大于各因素單獨存在時效應之和，表明兩因素之間在糖尿病的發(fā)病中存在正相加模型交互作用。未調(diào)整混在因素時協(xié)同效應指數(shù)為163695％CI03627389，交互效應超額相對危險性為346195％CI888015801，歸因交互效應百分比為3495895％CI51822121739；調(diào)整混在因素后協(xié)同效應指數(shù)為170195％CI03179135，交互效應超額相對危險性為484895％CI1238722083，歸因交互效應百分比為3797395％CI56226132173。結(jié)論1、乙肝病毒感染可能是2型糖尿病發(fā)病的重要危險因素。2、HBSAG與HBCAB兩因素之間在糖尿病的發(fā)病中存在正相加模型交互作用。

簡介：目的通過分子生物學的方法從苦瓜中克隆和表達了MAP30，并對其在哺乳細胞內(nèi)的轉(zhuǎn)運途徑和抗病毒機制進行了初步的研究，旨在揭示其抗病毒和抗腫瘤作用的機制。方法從成熟苦瓜種子中提取其基因組DNA，通過PCR的方法擴增出MAP30基因的全長，并將其連入原核表達載體PET30A，轉(zhuǎn)入ECOLIBL21DE3，IPTG誘導表達35H，離心收集菌液，超聲破碎分析上清和沉淀，并選用NINTA進行親和純化。于浙江大學動物房購買健康的新西蘭雄兔2只，用免疫學方法制備MAP30的多克隆抗體，初次免疫用1MGMAP30和等量的弗氏完全佐劑，再次免疫用05MGMAP30和等量的弗氏不完全佐劑每隔兩周免疫一次，一共四次。免疫前，兔子耳緣靜脈采血，分離血清為對照，免疫后血清ELISA法測抗體的效價，WESTERNBLOT測抗體的特異性。采用MTT方法檢測MAP30對腫瘤細胞和正常細胞的殺傷作用，并用此方法比較MAP30對轉(zhuǎn)入HBV的H印G2細胞和其原型H印G2細胞的細胞毒性。分析MAP30、天花粉蛋白TRICHOSANTHIN，TCS、拉米夫定對HEPG2215的細胞毒性，選取其對細胞毒性最小的濃度范圍進行HBV抑制的體外實驗。ELISA方法檢測MAP30、TCS、拉米夫定對HEPG2215細胞上清液中HBSAG、HBEAG的抑制作用，REALTIMEPCR方法檢測其對HBVDNA的抑制作用。并在不同離子作用下，檢測MAP30對DNA的切割作用。免疫電鏡的方法觀察MAP30在哺乳動物細胞內(nèi)轉(zhuǎn)運途徑。結(jié)果通過PCR方法克隆出MAP30的基因，測序結(jié)果與文獻報導的相符。通過IPTG誘導表達，得到了一條分子量約為34KD的目的條帶，以可溶性和包涵體兩種形式表達，可溶性含量較多。上清經(jīng)過鎳柱親和純化，用不同濃度梯度的咪唑進行洗脫，在100MM咪唑中洗脫下較純的MAP30，透析除去咪唑，BRADFD法測濃度后，過濾除菌，20℃保存。ELISA法測抗體的效價為128000，WESTERNBLOT測抗體的特異性發(fā)現(xiàn)除了34KD的目的條帶外，還有一條分子量約為MAP30兩倍的條帶，經(jīng)檢測，其為MAP30的二聚體。MAP30對腫瘤細胞HELA、HEPG2的毒性遠大于對正常細胞LO2的細胞毒性，SPSS軟件計算MAP30對癌細胞HEPG2和HELA細胞的IC50分別為828ΜGML和692ΜGML；對LO2細胞，MAP30的IC50大于400ΜGML。MAP30對轉(zhuǎn)入HBV的HEPG2215細胞毒性要小于原型HEPG2細胞。在濃度為01100ΜGML下，MAP30、TCS、拉米夫定對HEPG2215的細胞毒性均低于15％。在此濃度下，MAP30、TCS、拉米夫定對HEPG2215上清液中HBSAG、HBEAG和HBVDNA均有抑制，其抑制作用具有劑量依賴性。MAP30能將超螺旋DNA切割成缺口環(huán)狀或線性DNA，并具有劑量依賴性。在不同離子作用下，MAP30對DNA的切割作用不同。免疫電鏡的方法直接觀察到了MAP30在細胞內(nèi)主要集中于細胞核。MAP30作用細胞后，電鏡觀察到細胞自噬體形成。結(jié)論MAP30對腫瘤細胞的毒性大于對正常細胞的細胞毒性。MAP30對轉(zhuǎn)染HBV的HEPG2215細胞的毒性要小于原型HEPG2細胞的細胞毒性。在低毒性劑量下，MAP30具有抑制HBV的作用，其抑制作用具有劑量依賴性。MAP30進入細胞后，可以運輸進入細胞核，從而干擾病毒的復制，其可能的作用機制為MAP30對細胞核內(nèi)的DNA的切割作用。MAP30作用細胞后，有可能誘導細胞自噬。

簡介：目的了解安徽省預防艾滋病母嬰傳播工作的效果及自實施預防艾滋病母嬰傳播工作以來艾滋病病毒陽性孕產(chǎn)婦所生嬰幼兒感染情況為今后更好的開展預防艾滋病母嬰傳播工作提供參考依據(jù)。同時評價HIV陽性孕產(chǎn)婦所生嬰幼兒的生長發(fā)育情況為今后提高嬰幼兒的健康水平提供參考依據(jù)。方法采用回顧性隊列研究方法利用現(xiàn)有資料從安徽省信息系統(tǒng)中提取相關(guān)數(shù)據(jù)建立回顧性隊列數(shù)據(jù)庫。分別對孕產(chǎn)婦HIV抗體檢測情況HIV陽性孕產(chǎn)婦及所生嬰幼兒抗病毒藥物應用情況HIV陽性孕產(chǎn)婦所生嬰幼兒喂養(yǎng)和HIV陽性孕產(chǎn)婦所生嬰幼兒的感染情況進行分析。同時以2005年的全國九市標準及2006年的WHO標準為參照采用T檢驗比較HIV陽性孕產(chǎn)婦所生嬰幼兒的生長發(fā)育指標。對HIV陽性孕產(chǎn)婦所生嬰幼兒的生長發(fā)育進行評價。應用SPSS115軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析。結(jié)果檢出HIV陽性孕產(chǎn)婦302例總的檢測陽性率為016‰3021862810。孕產(chǎn)婦HIV抗體檢測陽性率逐年下降。最高年份的2004年為150‰32005。最低年份的2012年為010‰67678701。HIV陽性孕產(chǎn)婦孕期開始服用抗病毒藥物的有86例孕期服藥率851％86101在孕期接受母嬰阻斷服務的新生兒服用抗病毒藥物的89例抗病毒藥物服藥率為9278996。HIV陽性孕產(chǎn)婦所生嬰幼兒全部采用人工喂養(yǎng)。共隨訪187名嬰幼兒其中接受檢測108名檢測出HIV陽性2例HIV陽性抗體檢出率為1852108。隨訪到的187例HIV陽性孕產(chǎn)婦所生新生兒中男嬰102例女嬰85例。新生兒的平均出生身長為4924±287CM平均出生體重為315±049KG。新生兒中小于胎齡兒20人106大于胎齡兒20人106出生體重Z分小于2者低體重的有8人43出生身長小于2者生長遲緩的有12人64。與WHO男嬰標準比較除1月齡外其他月齡男嬰體重均高于WHO標準P結(jié)論安徽省對HIV陽性孕產(chǎn)婦及其所生的嬰幼兒所實施的綜合干預措施對降低艾滋病母嬰傳播起到了良好作用干預工作效果顯著。HIV陽性孕產(chǎn)婦所生嬰幼兒生長發(fā)育較好出生后身長體重增長較快。生長軌跡與我國一般兒童趨于一致。

簡介：目的通過新構(gòu)建的假型逆轉(zhuǎn)錄病毒載體VSVGMULV介導組織型纖溶酶原激活劑TISSUETYPEPLAMINOGENACTIVATTPA基因轉(zhuǎn)導乳鼠心肌成纖維細胞探索心肌成纖維細胞成為TPA基因治療靶細胞的可能性方法1、疹型口炎病毒殼G糖蛋白VSVG替代MULV的ENV蛋白從而產(chǎn)生一種有轉(zhuǎn)染能力的以MULV為基礎的病毒載體稱為VSVG假型MULV載體VSVGMULV通過293T17細胞共轉(zhuǎn)染質(zhì)粒PCNBGSN、PHIT60FGALPOL和PCVGFVSVG采用磷酸鈣共沉淀法產(chǎn)生VSVGMULV病毒生產(chǎn)細胞293GPG的產(chǎn)生VSVGMULV病毒上清的收集及滴度測定2、采用兩次差速貼壁法每次持續(xù)60分鐘分離、培養(yǎng)乳鼠心肌成纖維纖胞通過倒置顯微鏡觀察心肌成纖維細胞的形態(tài)學特征用免疫細胞化學染色法SP法鑒定心肌成纖維細胞3、制備含TPA基因假型病毒載體VSVGTPA通過質(zhì)粒PHIT60FGALPOL、PCVGFVSVG和PLTSNFTPA同時瞬時轉(zhuǎn)染293T細胞產(chǎn)生含TPA基因的VSVGTPA病毒轉(zhuǎn)染293GPG細胞收集病毒上清并測滴度含TPA基因的VSVGTPA病毒上清液轉(zhuǎn)染乳鼠心肌成纖維細胞用G418藥物篩選觀察轉(zhuǎn)染后心肌成纖維細胞克隆形成情況發(fā)色底物法測定轉(zhuǎn)基因心肌成纖維細胞培養(yǎng)上清液中TPA蛋白活性在基因轉(zhuǎn)導后的動態(tài)變化免疫細胞化學染色法SP法檢測心肌成纖維細胞TPA蛋白的表達

簡介：點擊查看更多新型雙啟動子DNA疫苗載體的研制及在人乳頭瘤病毒疫苗研究中的應用.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：乙型肝炎病毒HEPATITISBVIRUS，HBV屬嗜肝DNA病毒科HEPADNAVIRIDAE，基因組長約32KB，為部分雙鏈環(huán)狀DNA，可引起人的急、慢性肝炎。長期慢性乙肝病毒感染是肝纖維化，肝硬化及肝癌的高危因素。慢性乙型病毒性肝炎發(fā)病機制復雜，宿主的免疫調(diào)節(jié)紊亂是導致病毒不能有效清除，引起慢性炎癥，病情遷延不愈的重要原因。眾多的細胞因子不僅參與了機體的免疫調(diào)節(jié)，并且具有直接抑制病毒復制的作用。例如在細胞實驗和動物模型中已經(jīng)證實，白細胞介素INTERLEUKIN，IL6、IL12和IL18等均具有非細胞毒性的抑制乙肝病毒復制的作用。IL12和IL2也已有應用于慢性乙型病毒性肝炎患者的臨床病例的報道。IL17和IL22是輔助性T細胞17THELPCELL17，TH17主要效應細胞因子。目前很多研究證實TH17參與到急性或慢性肝損害的炎癥反應中。有研究表明，在慢性乙肝患者中，血清中IL17的濃度和TH17的數(shù)量與血清中HBVDNA水平呈負相關(guān)血清中HBVDNA水平與肝臟炎癥水平呈正相關(guān)，而IL22水平與肝臟炎癥水平呈負相關(guān)。TH17細胞的細胞因子IL17和IL22可能具有抑制HBV復制的作用。實驗選取了在可持續(xù)復制HBV的肝癌細胞系HEPG2215中進行驗證?？拐巢《镜鞍譇MXA和2，5寡腺苷酸合成酶OAS是兩個重要的抗病毒蛋白，其具有抗多種病毒復制的作用，包括HBV。MXA在胞漿內(nèi)與病毒的核糖核蛋白復合物直接結(jié)合，在病毒侵入細胞的早期抑制病毒復制。OAS可使ATP聚合成2，5寡腺苷酸，以激活細胞內(nèi)核酸酶，降解病毒MRNA，從而抑制病毒蛋白合成。在本實驗中，進一步研究了IL17導致的HBV抑制作用與MXA和OAS的關(guān)系。第一部分IL17在肝癌細胞系HEPG2215中抑制HBV復制的研究目的觀察IL17在可持續(xù)分泌HBV的肝癌細胞系HEPG2215中抑制HBV復制的作用。方法分別用不同濃度（4NGML、1NGML和250PGML）的IL17和ANTIIL17RABANTIIL17RANTIBODY，ANTIIL17RAB干預HEPG2215細胞，CCK8比色法檢測細胞的增殖情況。分別用含有1NGMLIL17，1NGML抗IL17抗體和1ΜGML阿德福韋酯的細胞培養(yǎng)液作用于HEPG2215細胞，加藥后3D收集培養(yǎng)上清液，5D收集上清液和細胞，用REALTIMEPCR方法檢測上清和細胞內(nèi)HBVDNA、電化學發(fā)光方法檢測細胞上清的HBSAG和HBEAG。應用單因素方差分析ONEWAYANALYSISOFVARIANCE，ANVOA和DUNTSTEST用來比較各組間的差別。結(jié)果1不同濃度水平的IL17組和ANTIIL17RAB組間及與空白對照組比較HEPG2215細胞CCK8值均無明顯差別（表12，P＞005）。IL17對細胞的增殖無抑制和促進作用。2IL17組細胞內(nèi)HBVDNA水平明顯低于正常對照組679±015，714±013，P＜005ANTIIL17RAB組細胞內(nèi)HBVDNA水平明顯高于正常對照組747±016，714±013，P＜005阿德福韋酯組細胞內(nèi)HBVDNA水平明顯低于正常對照組、IL17組和ANTIIL17RAB組（611±036，P＜005）。33D和5D時IL17組細胞上清液中HBVDNA水平與正常對照組間無明顯差異467±031447±034P＞005470±034457±038P＞0053D和5D時ANTIIL17RAB組細胞上清液中HBVDNA水平明顯高于正常對照組500±021447±034P＜005510±021457±038P＜0053D和5D時阿德福韋酯組細胞上清液HBVDNA水平明顯低于正常對照組、IL17組和ANTIIL17RAB組359±049P＜005335±044P＜005。4IL17組3D時細胞上清液中HBSAG水平與正常對照組比較無明顯差異971±155，1072±095，P＞005，5D時細胞上清液中HBSAG水平低于正常對照組756±060，919±120，P＜005ANTIIL17RAB組3D時細胞上清液HBSAG水平高于正常對照組1278±096，1072±095，P＜005，5天時細胞上清液HBSAG水平與正常對照組間無明顯差異1072±116，919±120，P＞0053D和5D阿德福韋酯組細胞上清液HBSAG水平與正常對照組比較無明顯差異941±1651072±095P＞005978±123919±120，P＞005。53D和5DIL17組細胞細胞上清液中HBEAG水平低于正常對照組3490±3684310±546，P＜0052492±6184395±664P＜0053D和5DANTIIL17RAB組細胞上清液HBEAG水平與正常對照組比較無明顯差異4507±4334310±546P＞0054831±9494395±664P＞0053D和5D阿德福韋酯組細胞上清液HBEAG水平與正常對照組比較無明顯差異4056±6124310±546P＞0054151±4884395±664P＞005。64NGML，1NGML，250PGMLIL17組間比較，細胞上清液中HBVDNA，HBSAG，HBEAG，細胞內(nèi)HBVDNA水平均無明顯差異（表16，P＞005）。第5天IL17可降低細胞上清液HBSAG水平，第3天IL17無法降低HBSAG水平第5天IL17對細胞上清液HBEAG的抑制率4331％，第3天對細胞上清液HBEAG的抑制率為1904％。結(jié)論IL17對HEPG2215細胞增殖無抑制和促進作用。IL17可在不產(chǎn)生細胞毒性作用的情況下，對HEPG2215細胞系內(nèi)的HBV復制產(chǎn)生抑制作用。IL17的抑制作用在250PGML至4NGML濃度范圍內(nèi)無濃度依賴性，有時間依賴性。IL17與阿德福韋酯間抗病毒作用機制不同。第二部分IL22在肝癌細胞系HEPG2215中抑制HBV復制的研究目的探究IL22在可持續(xù)分泌HBV的肝癌細胞系HEPG2215中抑制HBV復制的作用。方法分別用含有不同濃度（4NGML、1NGML和250PGML）的IL22和抗IL22抗體ANTIIL22RANTIBODY，ANTIIL22RAB干預HEPG2215細胞，CCK8比色法檢測細胞的增殖情況。分別用含有1NGMLIL22，1NGMLANTIIL22RAB和1ΜGML阿德福韋酯的細胞培養(yǎng)液作用于HEPG2215細胞，加藥后3D收集培養(yǎng)上清液，5D收集上清液和細胞，用REALTIMEPCR方法檢測上清和細胞內(nèi)HBVDNA、電化學發(fā)光方法檢測細胞上清的HBSAG和HBEAG。應用ANVOA和DUNTSTEST用來比較各組間的差別。結(jié)果1不同濃度水平的IL22組和ANTIIL22RAB組間及與空白對照組比較HEPG2215細胞CCK8值均無明顯差別（表21，P＞005）。IL22對細胞的增殖無抑制和促進作用。2IL22組細胞內(nèi)HBVDNA水與正常對照組比較無明顯差異728±026，714±013，P＞005ANTIIL22RAB組細胞內(nèi)HBVDNA水平與正常對照組比較無明顯差異724±017，714±013，P＞005。33D和5D時IL22組細胞上清液中HBVDNA水平與正常對照組間無明顯差異487±063447±034，P＞005468±070457±038，P＞0053D和5D時ANTIIL22RAB組細胞上清液HBVDNA水平與正常對照組比較無明顯差異470±050447±034P＞005477±033457±038P＞00543D和5D時IL22組細胞上清液中HBSAG水平與正常對照組比較無明顯差異1107±1151072±095P＞005899±042919±120P＞0053D和5D時ANTIIL22RAB組細胞上清液HBSAG水平與正常對照組間無明顯差異980±1501072±095，P＞0051027±124919±120P＞005。53D和5D時IL22組細胞細胞上清液中HBEAG與正常對照組水平無明顯異常4542±6804310±546P＞0053780±7554395±664，P＞0053D和5D時ANTIIL22RAB細胞上清液HBEAG水平與正常對照組比較無明顯差異4006±4294310±546P＞0053945±6994395±664，P＞005。結(jié)論IL22對HEPG2215細胞增殖無明顯抑制和促進作用，對HEPG2215細胞系內(nèi)的HBV復制無明顯抑制作用。第三部分IL17對HEPG2215細胞內(nèi)部分抗病毒蛋白基因轉(zhuǎn)錄水平的影響目的探究ILL7對HEPG2215細胞內(nèi)部分抗病毒蛋白基因轉(zhuǎn)錄水平的影響。探究其與IL17抗HBV作用之間的關(guān)系。方法1NGMLLL17干預HEPG2215細胞。選取部分抗病毒蛋白如抗粘病毒蛋白AMXA、25寡腺苷酸合成酶OAS、干擾素刺激基因因子3ISGF3、信號轉(zhuǎn)導與轉(zhuǎn)錄活化因子1STAT1和信號轉(zhuǎn)導與轉(zhuǎn)錄活化因子2STAT2，REALTIMERTPCR方法檢測IL17作用72H后HEPG2215細胞內(nèi)OAS、STAT1、STAT2、ISGF3和MXA基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物MRNA水平變化，以ΒACTIN基因MRNA作為檢測內(nèi)參照。用MXASIRNA和OASSIRNA誘導沉默HEPG2215細胞內(nèi)MXA和OAS基因轉(zhuǎn)錄，REALTIMERTPCR方法檢測IL17作用下MXA和OAS基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物MRNA水平變化，REALTIMEPCR方法檢HEPG2215細胞內(nèi)HBVDNA水平變化。應用ANVOA和DUNTSTEST用來比較各組間的差別。結(jié)果1IL17作用后HEPG2215細胞內(nèi)MXA和OAS轉(zhuǎn)錄水平與對照組比值為1656P＜005和1988P＜005STAT1，STAT2，ISGF3轉(zhuǎn)錄水平與對照組比值為167P＞005、198P＞005和193P＞005。2MXASIRNA可有效沉默IL17誘導的MXA轉(zhuǎn)錄（沉默效率為8263％），同步檢測MXASIRNA組細胞內(nèi)HBVDNA水平較對照組明顯升高709±021，676±028，P＜005。3OASSIRNA可有效沉默IL17誘導的OAS轉(zhuǎn)錄（沉默效率為8107％），同步檢測OASSIRNA組細胞內(nèi)HBVDNA水平較對照組明顯升高719±013，676±028P＜005結(jié)論IL17作用可以誘導HEPG2215細胞內(nèi)MXA和OAS基因活躍轉(zhuǎn)錄，并產(chǎn)生抑制HBV復制的作用。

簡介：河北醫(yī)科大學碩士學位論文種乙型肝炎病毒突變株可調(diào)控性表達細胞系的構(gòu)建姓名關(guān)衛(wèi)衛(wèi)申請學位級別碩士專業(yè)內(nèi)科學指導教師孫殿興20100301中文摘要中文摘要2關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞顱內(nèi)動脈瘤；蛛網(wǎng)膜下腔出血；保守治療；手術(shù)治療；HUNTHESS分級

簡介：NK4慢病毒載體的構(gòu)建及對人肝癌細胞的生物學特性的影響THECONSTRUCTIONOFNK4RECOMBINANTLENTIVIRALVECTORANDTHEEFFECTONTHEBIOLOGICALCHARACTERISTICSOFHUMANHEDATOCARCMOMACELL●●1導師亓5，一級學科論文課題起止時間2QQ生三月二2Q12生圣旦中國醫(yī)科大學遼寧2012年5月目錄一、摘要中文論著摘要”1英文論著摘要”4二、英文縮略語。7三、論文畝FR言8刖舌‘實驗材料與方法9實驗結(jié)果20討念29結(jié)論3L四、本研究創(chuàng)新性的自我評價32五、參考文獻‘33六、附錄綜述“35在學期間科研成績43致謝44個人簡介45

簡介：點擊查看更多抗病毒膠囊治療氣虛外感的臨床療效觀察及感冒的中醫(yī)證候規(guī)律研究.pdf精彩內(nèi)容。