簡介：點擊查看更多推拿運脾化濕清腸治療嬰幼兒輪狀病毒腸炎（濕熱證）的研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：自上世紀60年代出現(xiàn)基于骨髓瘤的單克隆抗體制備技術(shù)以來，單克隆抗體在生物醫(yī)學領域已獲得廣泛應用，既可以作為研究工具，也可以應用于疾病的診斷與治療。最常見的單克隆抗體制備技術(shù)是基于小鼠小鼠雜交瘤的小鼠單抗制備技術(shù)。近年來，隨著生物醫(yī)學的快速發(fā)展，小鼠單抗制備技術(shù)逐漸暴露出自身的局限性，如對小鼠源抗原的反應性較弱、對部分人源抗原的抗體親和力較低等，因此，開發(fā)非小鼠種屬來源的新型單抗制備技術(shù)成為一個新的研究方向，包括基于大鼠大鼠雜交瘤的大鼠單抗制備技術(shù)、基于家兔雜交瘤技術(shù)的兔單抗制備技術(shù)等。本研究以大鼠單抗制備技術(shù)為研究對象，首先，通過優(yōu)化本實驗室前期建立的大鼠單抗制備方法，解決了影響大鼠單抗制備穩(wěn)定性的關鍵影響因素，建立起穩(wěn)定的大鼠單抗制備技術(shù)然后，應用大鼠單抗技術(shù)研制針對HIV病毒衣殼蛋白P24的大鼠單抗最后，探索抗P24大鼠單抗在HIV診斷試劑開發(fā)中的應用潛能。具體研究結(jié)果如下首先，優(yōu)化大鼠單抗制備技術(shù)。通過分析本實驗室前期建立的大鼠大鼠雜交瘤單抗制備技術(shù)存在的技術(shù)瓶頸問題，確定融合率、融合檢測方式、克隆化方式以及腹水誘導成功率等影響大鼠單抗技術(shù)推廣應用的關鍵問題作為首選的優(yōu)化對象。結(jié)果顯示1膽固醇是影響大鼠大鼠雜交瘤融合成功率的關鍵因素，通過在培養(yǎng)基中添加游離膽固醇，融合率可由原來的4476％左右穩(wěn)定提高到9325％左右，建立起穩(wěn)定的大鼠雜交瘤融合方法2未融合B細胞的凋亡時間是影響融合檢測特異性的影響因素，通過兩次換液延長融合檢測間隔時間，顯著降低了融合檢測本底，建立了優(yōu)化的融合檢測方法3大鼠骨髓瘤細胞的成集落特性是影響雜交瘤單克隆化的關鍵影響因素，通過比較多種克隆化方法，最終確定改良的有限稀釋法作為最佳的大鼠雜交瘤克隆化方法，提高了獲得大鼠單克隆雜交瘤的成功率。4大鼠雜交瘤細胞在LOUCN大鼠腹腔內(nèi)的腹水誘導成功率與大鼠融合伴侶細胞YB20是否適應LOUCN大鼠腹腔有關，通過將YB20細胞導入LOUCN大鼠腹腔反復馴化，顯著提高了YB20細胞在LOUCN大鼠腹腔內(nèi)的適應性，使大鼠雜交瘤細胞的單抗腹水誘導成功率從原來的4925％提高到9325％。其次，利用優(yōu)化后的大鼠大鼠雜交瘤技術(shù)制備出53個抗HIV病毒衣殼蛋白大鼠單抗ANTIP24RATMAB，通過單抗的配對篩選，發(fā)現(xiàn)兩株大鼠單抗13F8和15A2作為捕獲單抗能夠與商品化試劑盒中的標記單抗形成最佳配對，不僅靈敏度高且降低了假陽性血清的反應性。上述單抗為進一步改良第四代HIV診斷試劑盒提供了重要的候選原料?？傊狙芯堪l(fā)現(xiàn)實驗室前期建立的大鼠大鼠雜交瘤單抗制備技術(shù)存在的不穩(wěn)定影響因素，通過條件優(yōu)化，建立起一套穩(wěn)定而高效的大鼠單抗制備技術(shù)，并利用該技術(shù)制備出P24抗原特異性的大鼠單抗ANTIP24RATMAB，評估了ANTIP24大鼠單抗應用于診斷試劑研發(fā)的潛能，表明大鼠單抗在生物醫(yī)學領域中具有不錯的應用前景。本研究工作為大鼠大鼠雜交瘤單抗制備技術(shù)的推廣和應用奠定了堅實基礎。

簡介：目的觀察芪珠方治療慢性乙型病毒性肝炎的療效，包括改善癥狀、陽性體征及肝功能和肝纖維化為指針，尋找中醫(yī)有效治療慢性乙型病毒性肝炎的方藥。方法自2009年1月至2011年12月，確診為慢性乙型肝炎的住院及部分門診病例列為觀察對象，來源于江蘇省中醫(yī)院肝炎門診、常州市第三人民醫(yī)院、南京江北人民醫(yī)院、南通市第三人民醫(yī)院等。隨機分成治療組和對照組，各120例。治療組芪珠方，處方組成黃芪15G、葉下珠30G、土茯苓30G、虎杖15G、蛇舌草30G、赤芍10G、丹參10G，水煎100ML劑，口服，1日2次。對照組拉米夫定，口服，每次1粒，1日1次。1個療程為連續(xù)30天服藥，每30天復診1次。觀察時間為6個療程，其中部分病例，可延長療程至1年。治療結(jié)束后隨訪6個月。臨床試驗結(jié)束后，按臨床常規(guī)方法治療。觀察指標包括1臨床癥狀，觀察脅痛、食欲、無力采用積分法記錄。每4周觀察記錄1次。2實驗室檢查，肝功能指針ALT、AST、ALP、RGT、TB、A1、G，每四周檢查1次；病原學指標HBSAG、抗HBS、HBEAG、抗HBE、抗HBC、HBVDNA，每12周各檢查1次。血液與尿液常規(guī)、糞便常規(guī)、心電圖、腎功能BUN、SCR，治療前后各檢查1次。采描述性統(tǒng)計分析，定性指標以頻數(shù)表，構(gòu)成比或百分率描述；定量指標以均數(shù)±標準差表示。兩組對比分析，定性數(shù)據(jù)采用卡方檢驗。定量數(shù)據(jù)符合正態(tài)分布用T檢驗（組間進行方差齊性檢驗，以005作為檢驗水平，方差不齊時選用SATTERTHWAITE方法進行校正的T檢驗），假設檢驗統(tǒng)一使用雙側(cè)檢驗，給出檢驗統(tǒng)計量及其對應的P值。結(jié)果治療組男性70例，女性50例，平均年齡為3844±906歲；對照組男性76例，女性44例，平均年齡為3928±870歲兩組患者在性別和年齡方面無顯著性差異P＞005。治療組120例病人中，65人屬輕度慢性乙型肝炎者，中度55人；對照組120例病人中，62人屬輕度慢性乙型肝炎者，中度58人。兩組患者在病情輕重方面無顯著差異P＞005。兩組患者治療前后積分經(jīng)T檢驗，治療組各組癥狀均有不同程度的改善無力、脅痛、納差、腹脹、黃疸的P值分別為0000，0003，0002，0002，0004；對照組乏力、黃疸也有一定改善（P值分別為0014，0027）；與對照組相比，芪珠方能明顯改善患者的脅痛、納差癥狀（P值分別為0025，0014）。兩組治療前后肝功能ALT、AST、GGT、ALP均有明顯改善。兩組患者治療前后，肝纖維化指標（透明質(zhì)酸HA、層粘蛋白LN、IV型膠原IVC均有不同程度的改善。本研究兩組患者HBEAG、HBVDNA變化相似，經(jīng)卡方檢驗，差異無統(tǒng)計學意義。治療組120例中，完全應答22例183％，部分應答44例367，無應答54例450，總有效率為550；對照組120例，完全應答26例217，部分應答42例350，無應答52例433，總有效率567，兩組總體療效比較，差異無統(tǒng)計學意義。兩組總體療效比較，經(jīng)檢驗，X20015，P0352。治療前后觀察血常規(guī)、腎功能、心電圖等安全性指標均無明顯異常。結(jié)論芪珠方能改善慢性乙型病毒性肝炎病患之癥狀、體征及肝功能，且有一定的抗病毒作用，其機制可能是通過扶助身體正氣，清化濕熱瘀毒來發(fā)揮作用，值得進一步深入研究。

簡介：目的了解艾滋病病毒感染者病人自殺未遂的發(fā)生情況，揭示自殺未遂的時間分布和行為特征，探討艾滋病病毒感染與自殺未遂的關系及自殺未遂相關的影響因素，為預防艾滋病病毒感染者病人自殺提供科學依據(jù)。方法采用現(xiàn)況調(diào)查方法，由經(jīng)統(tǒng)一培訓的調(diào)查員在陽江市和中山市對195例艾滋病病毒感染者病人進行面對面詢問式的問卷調(diào)查，獲取一般人口學資料、艾滋病病毒感染、吸毒、自殺意念和自殺未遂等信息。以得知艾滋病病毒感染時間、得知感染后6月和得知艾滋病診斷時間為界將自殺未遂劃分為四個階段，即得知艾滋病病毒感染以前、得知感染后6月內(nèi)、得知感染后6月到得知艾滋病診斷前、得知艾滋病診斷后，比較各個時間段的自殺未遂發(fā)生情況。采用壽命表方法分析艾滋病病毒感染后自殺未遂發(fā)生的時間分布，COX比例風險回歸模型探討自殺未遂與艾滋病病毒感染的關系及自殺未遂的影響因素。結(jié)果研究對象自殺未遂率和自殺意念率分別為1949％（38195）和4051％（79195），近一年自殺未遂率為667％（13195）。38例自殺未遂者中，6316％（2438）首次自殺未遂發(fā)生是在得知艾滋病病毒感染后，感染后自殺未遂率比感染前高（C2401，P005），感染后自殺未遂生存曲線下降的速度比得知感染前快（C24575，P0001），隨著疾病進展，自殺未遂發(fā)生呈上升趨勢（Z2352，P00001）。得知艾滋病病毒感染后自殺的主要原因為艾滋病，占5581％，自殺的主要目的以解脫痛苦主，占50％以上。得知艾滋病病毒感染后首次自殺未遂發(fā)生的時間風險曲線呈雙峰分布，自殺風險分別在感染后第2年和第6、7年最高。COX回歸分析顯示，艾滋病病毒感染與自殺未遂相關，感染后自殺未遂的風險是感染前的834倍（95％CI為4051709），調(diào)整吸毒因素后，艾滋病病毒感染與自殺未遂關聯(lián)仍然有統(tǒng)計學意義，調(diào)整后RR95％CI為7203521475；多因素分析顯示遭受歧視是自殺未遂的危險因素。結(jié)論艾滋病病毒感染者病人具有較高的自殺危險，是自殺的高危人群，應關注艾滋病病毒感染者病人的自殺問題，在艾滋病自愿咨詢檢測門診中開展心理危機評估與干預。艾滋病病毒感染和遭受歧視作為的自殺未遂影響因素，提示我國艾滋病病毒感染者病人可能遭受較為嚴重的不良情感應激。需進一步探索艾滋病病毒感染者病人產(chǎn)生自殺行為的原因，采取有效措施預防自殺。

簡介：ATHESISSUBMITTEDTOZHENGZHOUUNIVERSITYFORTHEDEGREEOFMASTERTHECONSTRUCTIONOFBACHSV1STRAINHFWITHGFPREPORTERGENEANDTHERESEARCHOFITSINFECTIOUSPROGENYVIRUSBYXINJINGLIUSUPERVISORPROFYUMINGXUPROFZHIQIANGHANNEUROLOGYTHEFIRSTAFFILIATEDHOSPITALOFZHENGZHOUUNIVERSITYAPR2011原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所呈交的學位論文，是本人在導師的指導下，獨立進行研究所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的科研成果。對本文的研究作出重要貢獻的個人和集體，均已在文中以明確方式標明。本聲明的法律責任由本人承擔。學位論文作者刻躺嗍秒F／年G月／7日學位論文使用授權(quán)聲明本人在導師指導下完成的論文及相關的職務作品，知識產(chǎn)權(quán)歸屬鄭州大學。根據(jù)鄭州大學有關保留、使用學位論文的規(guī)定，同意學校保留或向國家有關部門或機構(gòu)送交論文的復印件和電子版，允許論文被查閱和借閱；本人授權(quán)鄭州大學可以將本學位論文的全部或部分編入有關數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或者其他復制手段保存論文和匯編本學位論文。本人離校后發(fā)表、使用學位論文或與該學位論文直接相關的學術(shù)論文或成果時，第一署名單位仍然為鄭州大學。保密論文在解密后應遵守此規(guī)定。學位論文作者烏、J新葡111日期砂薩婦F7日

簡介：跨期決策是指個體對發(fā)生在不同時間點的成本和收益進行權(quán)衡，繼而做出各種判斷和選擇的過程。具有不同認知水平的人往往在許多方面存在差異。但是認知對跨期決策究竟會產(chǎn)生怎樣的影響，目前并沒有進行較為系統(tǒng)的研究。一方面關于認知和跨期決策的研究結(jié)果多數(shù)僅局限于金錢獎賞領域，而對在金錢損失領域認知對跨期選擇的影響鮮有涉獵。另一方面，研究者多采用選擇的誘發(fā)模式，較少有人采用匹配模式對這一領域的問題進行研究。此外，已有研究表明，不同的時間描述方式（日期／延遲）也會對跨期決策產(chǎn)生影響，因此，在研究認知對跨期決策的影響時，這一點也不能忽視。而且，多數(shù)研究者僅采用虛擬的金錢獎勵和損失來進行研究。很少有人試圖探索對于具有不同認知水平的個體在真實情境下是否也會出現(xiàn)類似于虛擬情境下的判斷和決定。因此，考慮到收益損失的不同情景，以及不同誘發(fā)模式和時間描述方式可能對研究結(jié)果的影響，系統(tǒng)地探討不同認知水平對跨期決策的影響。在進行虛擬實驗的同時，引入真實情境綜合來探討以認知反應測試為基礎的認知能力對跨期決策的影響。本研究共分為三個部分。研究一采用問卷調(diào)查的方法，驗證了以認知反應測試為基礎的認知能力是否和高考成績、認知需求量表等其他測量認知能力或認知風格的方法之間的關聯(lián)。研究二考慮到不同誘發(fā)模式、時間描述方式跨期決策的影響，通過問卷、實驗室實驗等方法，通過三個實驗綜合探討了在虛擬跨期決策情境下，認知反應能力對跨期決策的影響。研究三在研究二的基礎上，引入真實情境來探討以認知反應測試為基礎的認知能力對跨期決策的影響。研究得出以下結(jié)論1以認知反應測試為基礎的認知能力和個體學業(yè)績效、認知需求之間存在顯著正相關。2男性的認知反應得分顯著高于女性。3無論是日期還是延遲的時間描述方式，收益條件下，低認知者可能比高認知者未來收益的折扣率更高，更沒有耐心而損失條件下，無論是在日期還是延遲的時間描述方式，高、低認知者之間延遲折扣率的差異都不顯著。4不同誘發(fā)模式會對高、低認知者的跨期決策偏好產(chǎn)生影響。在匹配模式的收益條件下，不同認知反應水平對個體跨期決策的影響達到顯著水平，表現(xiàn)出低認知者可能比高認知者延遲折扣率更高，更沒有耐心。在選擇模式的收益條件下，高、低認知者間的跨期選擇并沒有差異。匹配和選擇誘發(fā)模式下，不同認知水平的個體在損失條件下的延遲折扣率沒有顯著差異。5真實的決策情境下，表現(xiàn)出低認知者更傾向于選擇即時的收益選項，而高認知者更傾向于選擇延遲的收益選項。

簡介：乙型肝炎病毒HBV的慢性感染是導致肝細胞癌HCC發(fā)生的主要原因之一而HBV相關的HCC排名十大癌癥之一。在目前全世界HBV慢性感染患者有兩億人因此HBV對人類的健康仍然是嚴重的威脅。盡管HBV相關肝癌的致病機理仍然不清楚但有證據(jù)表明HBX蛋白在HCC的發(fā)生和發(fā)展過程中有重要的作用。HBX蛋白是一種多功能的調(diào)節(jié)因子它直接或間接地通過與宿主蛋白的相互作用參與調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄、信號傳導、細胞周期、蛋白降解、細胞凋亡和遺傳穩(wěn)定。HBV的HBX基因編碼154個氨基酸大小為17KD。這些氨基酸殘基中的九個半胱氨酸殘基對HBX蛋白的結(jié)構(gòu)具有十分重要的作用前八個半胱氨酸殘基形成四對二硫鍵分別是CYS7和CYS78CYS17和CYS115CYS61和CYS137CYS69和CYS143而CYS148是游離的。每個半胱氨酸殘基與其后面的第四個半胱氨酸殘基形成二硫鍵而最后一個半胱氨酸殘基又是游離的這樣的特殊結(jié)構(gòu)可能是導致復性后HBX蛋白在溶液中存在多態(tài)性的原因。在用大腸桿菌表達完整的HBX蛋白或截斷的HBX蛋白時得到的目的蛋白總是以包涵體的形式存在后期純化還需要變性和復性這對HBX蛋白的天然結(jié)構(gòu)產(chǎn)生了一定的影響。但是在使用大腸桿菌表達出來的經(jīng)過變性復性的HBX蛋白做功能試驗時它仍然具有與RNA和人的P53蛋白結(jié)合的活性。這說明了大腸桿菌表達出來的HBX蛋白在一級結(jié)構(gòu)上是完全正確的并具有HBX蛋白在細胞中的一些功能。在用昆蟲桿狀病毒表達系統(tǒng)表達HBX蛋白時它在昆蟲細胞中有兩種存在狀態(tài)一種是微量的可溶性狀態(tài)一種是大量的聚集狀態(tài)。在后期的表達純化時也涉及到了變性和復性而在使用核磁共振驗證HBX蛋白的二硫鍵是否正確折疊時發(fā)現(xiàn)復性的HBX蛋白只有三對二硫鍵。因此不論是用大腸桿菌表達系統(tǒng)還是用昆蟲桿狀病毒表達系統(tǒng)存在的主要問題就是要能大規(guī)模表達出正確折疊的可溶性的HBX蛋白。為了能表達出可溶性的HBX蛋白選擇合適的表達質(zhì)粒和宿主菌是成功的關鍵。在大腸桿菌和桿狀病毒系統(tǒng)中使用GST和HIS標簽融合到HBX的N端表達出來的融合蛋白均是包涵體。我們選擇了PET32A、PQE30和PMALC2X質(zhì)粒作為表達質(zhì)粒其中在PMALC2X質(zhì)粒上攜帶了麥芽糖結(jié)合蛋白MBP標簽PQE30質(zhì)粒上攜帶了HIS標簽和PET32A質(zhì)粒攜帶了TRX、S和HIS標簽。我們把這些構(gòu)建了HBX基因的表達質(zhì)粒分別在BL21DE3、TB1和JM109菌株中表達預實驗結(jié)果顯示只有攜帶HBX基因的PMALC2X質(zhì)粒在JM109菌株表達的融合蛋白才是可溶的而在BL21DE3菌株中部分融合蛋白是可溶的在TB1菌株中不表達。這說明了MBP標簽對HBX蛋白在細菌中表達的可溶性有一定的幫助。我們培養(yǎng)了15L的細菌收集菌體后超聲破碎然后通過離心上親和樹脂柱和離子交換柱純化出了60MG的融合蛋白。通過FACTXA蛋白酶酶切48小時后發(fā)現(xiàn)溶液中有類似膠體的沉淀。通過分析發(fā)現(xiàn)HBX蛋白的PI為86MBP的PI為49MBPHBX蛋白的PI為61而溶液的PH為80因此我們通過PH值調(diào)節(jié)發(fā)現(xiàn)當溶液PH值為100時白色膠狀體消失溶液變澄清。為了能增加蛋白的可溶性我們在透析酶切產(chǎn)物時加入了1MUREA和005％SDS然后再通過凝膠柱來分離這三個蛋白。通過凝膠柱分離后目的蛋白HBX的濃度為05MGML。這為研究HBX蛋白的結(jié)構(gòu)奠定了堅實的基礎。HBV感染在全世界是肝臟癌癥發(fā)生的最普通的原因它主要通過體液傳播、性傳播和母嬰傳播。HBV是一種雙鏈DNA病毒屬于肝DNA病毒屬能引起急性和慢性肝炎。HBV基因組由全長為32KB的正鏈與一條不完全的負鏈組成不完全閉合的雙鏈環(huán)狀DNA編碼四條重疊的MRNA分子大小分別為35KB、24KB、21KB和07KB然后在細胞質(zhì)中編碼七種病毒蛋白分別是多聚酶P、S抗原、PRES1、PRES2、C抗原、PREC、E抗原。其中35KB的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物翻譯形成多聚酶、核心蛋白C和前核心蛋白PREC并作為前基因組的RNA模板反轉(zhuǎn)錄后作為病毒基因組復制的第一步。24KB和21KB轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物產(chǎn)生大、中、小三個包裝蛋白分別為PRES1、PRES2、S抗原。這三種蛋白具有一個共同的C端只是在N端的氨基酸序列延長的長短不同。07KB的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物產(chǎn)生X蛋白它具有轉(zhuǎn)錄激活的功能。HBV在感染、復制和增殖期間通過病毒蛋白與宿主蛋白相互作用不斷的適應和調(diào)節(jié)宿主的環(huán)境達到在宿主細胞生存的目的。通過研究病毒蛋白與宿主蛋白相互作用的數(shù)據(jù)我們可以全面分析病毒的生命周期同時有可能發(fā)現(xiàn)一些重要的相互作用為將來的藥物治療提供一個新的靶標?；谶@個目的我們利用TAP標簽技術(shù)來研究HBV基因組蛋白與肝細胞HEPG2蛋白的相互作用。首先我們構(gòu)建了HBV基因組質(zhì)粒PCRXLTOPOHBV然后以此為模板分別擴增了P、S、PRES1、PRES2、C、PREC和E基因。其次我們構(gòu)建了在C端攜帶TAP標簽和N端攜帶生物素標簽的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體PBTTAPIRESBIRA并以此載體作為對照載體。最后我們把擴增的七個基因分別插入到PBTTAPIRESBIRA質(zhì)粒的SNABI位點構(gòu)建了PBTIBP、PBTIBS、PBTIBC、PBTIBX、PBTIBPREC、PBTIBPRES1、PBTIBPRES2。為了減少標簽蛋白對靶蛋白結(jié)構(gòu)和功能的影響我們在SNABI位點兩邊加上了柔性氨基酸序列GSGGSG。我們通過把PBTTAPIRESBIRA、PBTIBX、PBTIBP、PBTIBS、PBTIBC、PBTIBPREC、PBTIBPRES1、PBTIBPRES2轉(zhuǎn)入PT67細胞包裝病毒來感染HEPG2用35ΜGML嘌呤霉素篩選獲得穩(wěn)定的細胞株然后通過PT67細胞包裝病毒感染HEPG2細胞用50ΜGML的勻霉素和1ΜGML的嘌呤霉素篩選并獲得穩(wěn)定細胞株。然后我們用TAP標簽的抗體通過WESTERNBLOTTING來鑒定目的蛋白的表達。最后我們獲得了分別穩(wěn)定表達P、S、PRES1、PRES2、C、PREC和E蛋白的HEPG2細胞株。這為我們進一步研究HBV病毒蛋白與宿主蛋白的相互作用組打下了堅實的基礎。

簡介：點擊查看更多鉀離子通道基因KCNJ15在重型病毒性肝炎中的作用及免疫學機制研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：嚴重急性呼吸道綜合癥SARS亦稱傳染性非典型肺炎是于2002年1月中旬在中國華南地區(qū)首先出現(xiàn)的一種新型的呼吸系統(tǒng)綜合癥隨后SARS在中國內(nèi)地和香港、加拿大、新加坡、越南等地呈現(xiàn)暴發(fā)行流行的趨勢SARS的病源已被確認為一種新型冠狀病毒或冠狀病毒變異株即SARS冠狀病毒SRASCOV在短短一個月間十余株不同SRASCOV的全基因序列已登錄美國國家生物技術(shù)信息中心NCBI的GENEBANK在已知類似冠狀病毒開放閱讀框分析的基礎上對SARSCOV初步的基因組注釋已經(jīng)完成根據(jù)其基因編碼預測得到的主要蛋白質(zhì)有RNA聚合酶蛋白、刺突蛋白S、包膜蛋白E、核衣殼蛋白簡稱核蛋白N、膜蛋白M等以往對動物冠狀病毒結(jié)構(gòu)蛋白的研究發(fā)現(xiàn)冠狀病毒的N蛋白在病毒復制和產(chǎn)生的病理反應中起重要作用該研究擬用重組SARS冠狀病毒N蛋白建立間接ELISA檢測SARS患者血清標本中抗SARS冠狀病毒N蛋白的抗體IGM、IGG了解SARS冠狀病毒N蛋白在人體內(nèi)的免疫原性旨在闡明SARS冠狀病毒感染機體免疫應答的機制為研究SARS冠狀病毒感染的機制和有效的診斷試劑及亞單位疫苗提供依據(jù)在研究中首先通過RTPCR特異性擴增編碼N蛋白基因然后克隆至原核表達載體PET32A構(gòu)建重組表達質(zhì)粒并轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21經(jīng)IPTG誘導獲得了高效表達的分子量約為66KD的重組蛋白包涵體且能與SARS病人血清發(fā)生特異性反應利用切膠純化的重組蛋白該研究又對其應用進行了初步探索用純化后的重組N蛋白免疫長耳白兔制備多克隆抗體結(jié)果表明表達的融合蛋白可刺激機體產(chǎn)生相應抗體建立間接ELISA法對不同來源的SARS病人中抗核蛋白抗體IGM、IGG進行檢測證實重組蛋白可作為一種可靠、高效的ELISA檢測試劑加以開發(fā)同時也為找尋抗體產(chǎn)生的規(guī)律提供一些線索進而又成功制備了鼠源性抗核蛋白單克隆抗體這為進一步對核蛋白及其抗體的性質(zhì)、功能等研究奠定了良好的基礎

簡介：957392博士學位論文2006屆腺病毒介導的PTEN基因治療肺癌的實驗研究‘EXPERIMENTALSTUDIESONTHERAPYFORLUNGCARCMOMABYPTENGENEME敞EDBYADENOVIRUSVECTOR研究生姓名徐中華指導教師姓名錢海鑫教授專業(yè)名稱外科學研究方向肺癌的基因治療論文提交日期2006年4月腺病毒介導的PTEN基因治療肺癌的實驗研究中文提要結(jié)論成功構(gòu)建了含PTEN基因的重組腺病毒載體AD．PTEN，酶切鑒定與預期結(jié)果相符，TCID50法測定病毒滴度為1．0X1010PFU／ML，為下一步體內(nèi)外實驗證實PTEN對肺癌的抑制作用研究打下基礎。第二部分目的探討ADPTEN對肺癌細胞株A549的體外殺傷作用及機制方法體外感染AD．PTEN于肺腺癌A549細胞，48H后應用倒置顯微鏡觀察腺病毒AD．PTEN感染細胞后形態(tài)的變化；應用RTPCR、WESTERNBLOT檢測AD．PTEN在A549細胞中的轉(zhuǎn)錄及表達；通過細胞計數(shù)、MTT實驗，觀察AD．PTEN對A549細胞生長抑制作用；應用流式細胞分析儀FCM檢測AD．PTEN對A549細胞凋亡率的變化；應用透射電鏡觀察外源性PTEN對A549細胞超微結(jié)構(gòu)的影響。結(jié)果經(jīng)AD．PTEN感染A549細胞后48H，可見部分細胞由貼壁脫落而呈懸浮生長，貼壁能力減弱，細胞形態(tài)變圓，體積縮小，折光性增強，而AD．LACZ組及PBS組細胞正常生長；ADPTEN轉(zhuǎn)染A549細胞后應用RTPCR檢測到PTENMRNA的表達，A549細胞經(jīng)ADPTEN轉(zhuǎn)染后能夠表達特異性PTEN蛋白，大小約55KDA；經(jīng)ADPTEN轉(zhuǎn)染后不同時間，其細胞生長速度明顯低于ADLACZ轉(zhuǎn)染組及PBS組的細胞；MTT實驗證實，外源性PTEN基因轉(zhuǎn)染顯著抑制了A549細胞的增殖，并隨著時間的延長其抑制率增強，而ADLACZ轉(zhuǎn)染組則無明顯的抑制作用；轉(zhuǎn)染ADPTEN后的A549細胞經(jīng)FCM檢測，細胞凋亡率明顯升高；透射電鏡下可見轉(zhuǎn)染PTEN基因組細胞則呈典型凋亡征象，細胞膜完整，核染色質(zhì)邊集。結(jié)論AD．PTEN對肺癌細胞株A549具有明顯的細胞形態(tài)學改變，能抑制A549細胞的生長增殖。誘導A549細胞凋亡，是PTEN基因抑制肺癌細胞增殖的主要作用機制之一。第三部分目的探討ADPTEN對裸鼠肺癌種植瘤體內(nèi)殺傷作用及機制方法A549肺腺癌細胞以2X106／100PL皮下接種于BALB／C裸鼠皮下，待成瘤后按腫瘤體積大小相等的原則分為3組N5AD一”EN治療組、AD．LAEZ對照組及PBS空白對照組，AD．PTEN、AD．LACZ組分別以5X108PFU／50UL直接注射至腫瘤內(nèi)，PBS組以50P1直接注射至腫瘤內(nèi)，隔日1次5次，觀察腫瘤體積的變化，最后LII

簡介：研究背景目前，艾滋病已經(jīng)在全球范圍內(nèi)成為嚴重危害人類生存與發(fā)展的公共衛(wèi)生問題。我國人群感染水平雖然還處于較低水平，但HIV感染者已經(jīng)從吸毒人員等高危人群擴散到社會各個階層，在一定程度上已經(jīng)影響到我國居民的身心健康和生命安全以及我國的社會經(jīng)濟發(fā)展。研究目的本研究通過抽樣調(diào)查研究，了解居民對艾滋病的認知和態(tài)度，分析城鄉(xiāng)居民對艾滋病知識的知曉情況、認知途徑和對艾滋病的態(tài)度等，為有效防制艾滋病提供對策與建議，提高人群的生命安全和生活質(zhì)量。研究方法本次調(diào)查涉及威海市的4個市區(qū)。首先把每個市區(qū)的所有鎮(zhèn)街道辦事處按社會經(jīng)濟發(fā)展水平分為好、中、差三類，采用分層整群隨機抽樣方法，在每個市區(qū)的每類鎮(zhèn)街道辦事處中各隨機抽取一個鎮(zhèn)街道辦事處，然后再在每個樣本鎮(zhèn)街道辦事處中按照經(jīng)濟發(fā)展水平好、中、差各隨機抽取2個中等大小的行政村居委會，最后按照機械抽樣方法在每個樣本村抽取120戶居民家庭進行問卷調(diào)查。與本研究有關的調(diào)查內(nèi)容主要包括1家庭一般情況；2一般人口學特征，如年齡等；3居民對艾滋病的認知及態(tài)度等。首先對威海市社會經(jīng)濟發(fā)展情況和樣本基本情況進行描述，然后對居民對艾滋病的認知情況以及態(tài)度進行描述性分析，最后通過多因素分析模型找出影響居民對艾滋病知曉率的影響因素。主要研究結(jié)果115歲及以上居民艾滋病知曉率達到720％，其中城市居民為775％，農(nóng)村居民為703％；其中男性為731％，女性為710％。2威海市居民艾滋病知曉途徑主要為電視收音機，比例達961％，其中676％的居民僅僅通過一條途徑知曉艾滋病。3影響艾滋病知曉率的單因素分析結(jié)果顯示城市地區(qū)艾滋病知曉率高于農(nóng)村；男性高于女性；年齡越高，艾滋病知曉率越低；離婚喪偶者低于未婚、已婚者；受教育程度越高，艾滋病知曉率越高；農(nóng)民和農(nóng)民工相對于其他職業(yè)艾滋病知曉率低；收入高的人群艾滋病知曉率高于收入低的人群。4多因素分析結(jié)果表明性別、年齡、婚姻狀況、受教育程度、收入水平是影響艾滋病知曉率的顯著因素。5僅有3553％的居民知道艾滋病的傳播途徑。6多項式LOGISTIC回歸模型顯示，年齡、受教育程度顯著影響居民對艾滋病的認知情況。7874％的居民認為孩子應當接受有關艾滋病知識的宣傳教育。8僅有08％居民認為會同以前一樣對待艾滋病病人，認為應當避免接觸和歧視艾滋病患者的高達307％和127％。9僅有94％的居民知道有艾滋病熱線電話。政策建議根據(jù)研究結(jié)果，提出如下政策建議1加強健康教育，充分認識艾滋病的危害，提高公眾安全意識；2加強艾滋病知識在農(nóng)村、特殊脆弱人群中的宣傳；3加強艾滋病宣傳網(wǎng)絡建設，為城鄉(xiāng)居民及時提供有關艾滋病方面的信息；4增大科研投入，實施艾滋病干預工程；5充分保護艾滋病人的權(quán)利。

簡介：分類號學校代碼10542學號201302090739劃分啟動與認知需要對承諾升級的影響THEIMPACTOFPARTITIONPRIMINGANDCOGNITIONNEEDSONESCAIATIONOFCOMMITMENT指導教師姓名、職稱塞逵疊塾撞湖南師范大學學位評定委員會辦公室二。一六年五月4認知需要在不同選項下的劃分啟動的影響效果是不一致的，在替代選項劃分啟動條件下，相對于低認知需要被試來說，高認知需要被試的承諾升級更顯著。而在升級選項劃分啟動條件下，相對于高認知需要被試來說，低認知需要被試的承諾升級傾向更顯著。關鍵字劃分啟動，認知需要，承諾升級

簡介：背景近年來，隨著社會發(fā)展和競爭的日趨激烈，失眠的發(fā)病率也逐年增高。目前，西方國家應用心理治療與藥物治療相結(jié)合的方案取得了很好的臨床療效，但國內(nèi)醫(yī)療界對此還重視不夠，且應用中醫(yī)認知行為療法配合常規(guī)治療肝氣郁結(jié)型失眠的相關研究未見文獻報道，故有必要制定一套以中醫(yī)認知行為療法為指導的適用于肝氣郁結(jié)型失眠患者的非藥物治療方案。目的制定一套適用于肝氣郁結(jié)型失眠患者的中醫(yī)認知行為治療方案，并在臨床實踐中對其操作性、實用性及療效作檢驗。方法1、文獻研究方法主要通過古今中外文獻研究，系統(tǒng)了解失眠的病因病機，目前治療最新進展以及中醫(yī)心理認知行為治療方法特點。2、方案編制方法以中醫(yī)認知行為療法中的說理開導、導引氣功（八段錦）等療法為基礎，結(jié)合現(xiàn)代認知行為療法編制出一套完整的中醫(yī)認知行為干預方案并根據(jù)相關文獻編制中醫(yī)證候量表和睡眠各指標分級量化表。3、臨床研究方法采用隨機數(shù)字表法將68例符合失眠診斷標準的患者分為二組，治療組以中醫(yī)認知行為干預方案配合解郁安神顆粒治療對照組僅用解郁安神顆粒治療。以匹茲堡睡眠質(zhì)量指數(shù)量表、睡眠指標分級量化表、中醫(yī)證候量表、阿森斯失眠量表為測評工具，分別對二組患者治療前后及隨訪1個月時為觀察點進行評分，所得資料采用X2檢驗、秩和檢驗，從睡眠各指標、失眠癥狀等方面比較患者的改善程度。結(jié)果1、兩組患者治療前后失眠癥狀、睡眠情況各指標明顯改善，差異具有統(tǒng)計學意義P＜0052、治療結(jié)束后治療組在失眠癥狀、睡眠情況各指標較對照組改善明顯，差異具有統(tǒng)計學意義P＜0053、一個月隨訪時治療組與對照組的阿森斯失眠量表總分比較，差異具有統(tǒng)計學意義P＜005結(jié)論本研究制定的中醫(yī)認知行為治療方案治療肝氣郁結(jié)型失眠有明顯的臨床療效，并能預防失眠的復發(fā)，且臨床操作方便，安全無副作用，患者容易接受。臨床上可根據(jù)實際情況介入此治療方案。

簡介：ATHESISSUBMITTEDTOZHENGZHOUUNIVERSITYFORTHEDEGREEOFMASTERANALYSISOFCLINICALCHARACTERISTICSONCOGNITIVEFUNCTIONAFTERPOSTERIORCIRCULATIONSPOKEBYPINGXIASONGSUPERVISORPROFHEYUNLIUDEPARTMENTOFREHABILITATIONMEDICINEPHYSICALTHERAPYTHESECONDCLINICALCOLLEGEOFZHENGZHOUUNIVERSITYAPRIL，2014摘要后循環(huán)卒中后認知功能I臨床特點分析研究生宋平霞導師劉合玉教授鄭州大學第二臨床學院康復醫(yī)學與理療學河南鄭州450014摘要背景和目的隨著腦卒中患病率的增高，腦卒中引起的認知功能障礙也日漸受到重視。它不僅會影響到患者的日常生活能力及其功能獨立性，也會對患者的社會適應能力產(chǎn)生一定的影響。傳統(tǒng)意義上認為前循環(huán)卒中較易引起認知功能障礙，而近期的報道顯示腦干、小腦等后循環(huán)供血區(qū)域卒中也會引起不同程度的認知功能下降，本研究通過對后循環(huán)卒中POSTERIORCIRCULATIONSTROKEPCS組和對照組進行認知功能的評估，旨在探討后循環(huán)卒中后認知功能的臨床特點，為后循環(huán)卒中后認知功能障礙的早期篩查、預防及治療提供臨床依據(jù)。方法采用蒙特利爾認知評估量表MONTREALCOGNITIVEASSESSMENTSCALE，MOCA分別對34例后循環(huán)卒中患者和32例對照者進行認知功能評定。參士甲耋口禾1與對照組相比，PCS組認知功能障礙的發(fā)生率較高，有顯著性差異P0052PCS組MOCA得分顯著低于對照組P005；3PCS組與對照組相比，視空間與執(zhí)行能力、語言、記憶及定向力差異有統(tǒng)計學意義P005；

簡介：首都師范大學碩士學位論文強迫癥的團體認知行為治療姓名周芳申請學位級別碩士專業(yè)發(fā)展與教育心理學指導教師崔麗霞20080526一塑墊塞塑里笪墜墊查壟塑壁一一一一ABSTRACT0B∞黯IVC啪MPNLSIVEDISORDEROCTISCHARACTERIZCDBYRECUNENTANDUNWANTEDTHOUGHTS，IM叫∞鳥O『IMAGESOBSESSIONSANDREP。ETITIVEBEHAVIORSORMENTALACTSCOMPULSIONSTHATTHEPERSONFEELSDRIVEN的PC喲哪INRESPONSETOOBSESSIONSAMEDCANPSYCHIATRICASSOCIATION1994ONCECO璐IDE億DA均鵬姐DLAR鰣Y皿掃瞎ATA曲ECONDITION，OBSESSIVECOMPULSIVEDISORDEROCDISNOWKNOWNROBE凼EFOLLNHMOST劃姍商PSYCHIATRICDISORDER，WHICHCAUSESAGREATDEALOFIMPAIRMENTTOTHELIFEOFTHECLIENTSIN鼢DEINJC’OCCUPATIONAL，ANDSOCIALFUNCTIONINGPREVIOUSRESEARCHATHOMEANDABROADHASDEMONSTRATEDTHATINDIVIDUAJ協(xié)DCOGNITIVEBEHAVIORALTHERAPYISANEFFECTIVETREATMENTFOROBSESSIVECOMPULSIVEDISORDER’BUTTHC他ISLITNETE∞缸CHONTHEGROUPCOGNITIVEBEHAVIORALTHERAPYGCBTFOROCD，WHICHISCONSIDEREDTOBECOS№FFECFIVEINTHISRESEARCH，WEAPPLYGROUPCOGNITIVEBEHAVIORALTHERAPYCONTAININGEXPOSURE柚DRITLIALP代VEQTIONEX／RPTOTHETREATMENTOFOCDTOMODIFYTHEDISTORTEDBELIEFSANDEXPOSETHE碰ENTS的THC剎ETYPROVPKINGSITUATIONWITHOUTANYRITUALIZATIONORCOMPULSIONSOASTO舢叭THESRINPTO瑚0FOCDHTHERE∞ARCH’12CFIENTSARERANDOMLYASSIGNEDTOTHEEXPERIMENTALGROUPORWAITLISTGROUPEACH鯽僦T蛐G6D觚THECLIENTSINTHEEXPERIMENTAL醐撇IVE8淵；IO籃OL∞鰣細E拋撕硎恤RAPYWHILETHECLIENTSINTHEWAITLISTGROUPRECEIVENOPSYCHOTHERAPYNC幽OFSCL90姐DYBOCSAREUSEDTOMEASURETHECHANGESOFTHECLIENTS“AFTERTHERAPYRESULTS。1ACCORDIILGTOTHESCALESOFSCL90ANDYBOCS，ALMOSTALLTHECLIENTSINTHE啡RI撇ⅡTALGROUPBENEFITFROMGROUPCOGNITIVEBEHAVIORTHERAPYTHEYMAKEGREATIMPROVEMENTSONTHESYMPTOMSOFOCD、枷IKTLLEC№NTSIBTHEWAIRLISTGROUPMADENOIMPROVEMENTATALLTHESCORESOFSCL，90ANDYBOCSOF出EDICNTSAFTCFNLERAPYINTHEEXPERIMENTALGROUPAXESIGNIFICANTLYDIFFERENTFROMTHOSEBEFORETHERAPYN吡CM0豫，THEIMPROVEMENTISMAINTAINEDAT2MONTHFOLLOWUPWHICHINDICATESTHESIG啦鋤TE黝OFTHEGROUPCOGNITIVEBEHAVIORALTHERAPY2THESCORCSOFYBOCSOFTHREECFIENTSINTHEEXPERIMENTALGROUPFALLDOWNTO15，WITHONLYSLIGHT跚叩TO心OFOCD，WHILETHEOTHERTHREEDECLINETO25，INDICATINGMILDSEVERESYMPTOMSAOCORD咄TOTHED蛐RATCDECLININGRATE20％ITPROVEDTOBEEFFECTIVEONTREATINGOCDUS咄則P∞鯽V爭呲AVIO試岍獬TWOOFTHEMIMPROVEGREATLYANDARRIVEAT也E砸CACMDC妒鯽≤橛LININGRATC35％KEYWORDSOCDGROUPC0鰣TIREBEHAVIORALTHERAPYEX／RPM