簡介：福建醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文分類號(hào)分類號(hào)R73962R73962學(xué)校代碼學(xué)校代碼1039210392學(xué)科專業(yè)代碼學(xué)科專業(yè)代碼105112105112學(xué)號(hào)21210030102121003010密級(jí)級(jí)公開公開碩士學(xué)位學(xué)位論文論文病毒感染及相關(guān)免疫因子與鼻內(nèi)翻性乳頭狀瘤發(fā)病關(guān)病毒感染及相關(guān)免疫因子與鼻內(nèi)翻性乳頭狀瘤發(fā)病關(guān)系的研究系的研究RRESEARCHOFVIRUSINFECTIONRELATEDIMMUNITYRRESEARCHOFVIRUSINFECTIONRELATEDIMMUNITYFACTFACTSS’SINFLUENCEONNASALINVERTEDPAPILLOMASINFLUENCEONNASALINVERTEDPAPILLOMA二○一五○一五年六月學(xué)位類型型臨床型醫(yī)學(xué)碩士臨床型醫(yī)學(xué)碩士所在學(xué)院院第一臨床第一臨床醫(yī)學(xué)院學(xué)院申請(qǐng)人姓名申請(qǐng)人姓名楊云華楊云華學(xué)科學(xué)科、專業(yè)專業(yè)耳鼻咽喉科學(xué)耳鼻咽喉科學(xué)導(dǎo)師師林昶教授教授研究起止日期研究起止日期20142014年6月至月至20142014年1212月答辯委員會(huì)主席答辯委員會(huì)主席李瑞玉李瑞玉教授教授答辯日期期20152015年6月2日福建醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文目錄英文縮寫英文縮寫1

簡介：探討慢加急性重型乙型病毒性肝炎ACUTEONCHRONICHEPATITISBLIVERFAILURE，ACHBLF患者血清干擾素Γ（IFNΓ）水平及其與病情嚴(yán)重指標(biāo)的關(guān)系，并研究IFNΓ基因啟動(dòng)子甲基化狀態(tài)對(duì)IFNΓ分泌水平的影響，以明確二者在慢加急性重型乙型病毒性肝炎發(fā)病機(jī)制中的作用。慢加急性重型乙型病毒性肝炎ACUTEONCHRONICHEPATITISBLIVERFAILURE，ACHBLF患者20例，慢性乙型肝炎CHRONICHEPATITISB，CHB患者15例，為2008年6月至2009年12月在山東大學(xué)齊魯醫(yī)院肝病科住院和門診患者。慢加急性重型乙型病毒性肝炎診斷符合2006年肝衰竭診療指南，慢性乙型病毒性肝炎診斷符合2000年第十次全國病毒性肝炎及肝病學(xué)術(shù)會(huì)議修訂的病毒性肝炎防治方案中的診斷標(biāo)準(zhǔn)。正常對(duì)照10例，來自健康人群志愿者。用酶聯(lián)免疫吸附法ELISA測定研究對(duì)象血清中的IFNΓ的水平，并將IFNΓ的水平與病情嚴(yán)重指標(biāo)TBIL、PTA、ALT、HBVDNA及MELD評(píng)分進(jìn)行相關(guān)分析；用甲基化特異性PCR法METHYLATIONSPECIFICPCR，MSP測定IFNΓ基因啟動(dòng)子的甲基化狀態(tài)，分析甲基化對(duì)IFNΓ水平的影響。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS130軟件包進(jìn)行，結(jié)果用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（X±S）表示，組間差異采用兩組獨(dú)立樣本資料的T檢驗(yàn)或卡方檢驗(yàn)，相關(guān)分析采用PEARSON線性相關(guān)分析。P1ACHBLF患者組與CHB患者組比較，血清IFNΓ水平明顯升高P2在ACHBLF患者組中，血清IFNΓ水平與血清TBIL水平呈明顯正相關(guān)R0804，P3在ACHBLF患者組中，血清IFNΓ水平與MELD評(píng)分呈明顯正相關(guān)R0645，P4ACHBLF患者組與CHB患者組相比，IFN?；騿?dòng)子甲基化程度明顯降低P5在ACHBLF患者組及CHB患者組中，甲基化組與非甲基化組相比，血清IFNΓ水平明顯降低P1在慢加急性重型乙型病毒性肝炎患者中，血清IFNΓ水平明顯高于CHB患者，并且血清IFNΓ水平與血清總膽紅素TBIL呈明顯正相關(guān)，與PTA呈明顯負(fù)相關(guān)，與MELD評(píng)分呈明顯正相關(guān)。提示IFN?？赡軈⑴c慢加急性重型乙型病毒性肝炎的發(fā)病，并且可能是慢加急性重型乙型病毒性肝炎患者病情嚴(yán)重程度的指標(biāo)之一。2慢加急性重型乙型病毒性肝炎患者及慢性乙型肝炎患者的IFN?；騿?dòng)子的甲基化程度明顯高于正常對(duì)照者。提示IFNΓ基因啟動(dòng)子甲基化參與慢性HBV感染的疾病進(jìn)程。在慢加急性重型乙型病毒性肝炎患者組及慢性乙型病毒性肝炎患者中，甲基化組與非甲基化組相比，血清IFNΓ水平明顯降低P3ACHBLF患者組與CHB患者組相比，IFN?；騿?dòng)子甲基化程度明顯降低P005，提示IFNY基因啟動(dòng)子的異常甲基化，可能參與了慢加急性重型乙型病毒性肝炎的發(fā)病。

簡介：乳頭瘤病毒PAPILLOMAVIRUSPV感染宿主皮膚和粘膜上皮能引起多種惡性及良性增生PV主要晚期蛋白L1能誘導(dǎo)宿主產(chǎn)生中和性、針對(duì)衣殼蛋白的特異性抗體是進(jìn)行預(yù)防性免疫的主要靶抗原在該研究中我們探討了優(yōu)化密碼對(duì)BPVL1基因蛋白表達(dá)和免疫原性的影響為PV相關(guān)疫苗乃至其它病原體有效疫苗的研制進(jìn)行初步探索該研究構(gòu)建野生型和優(yōu)化密碼的人源化牛乳頭瘤病毒BPV晚期基因L1GFP融合基因真核表達(dá)質(zhì)粒通過檢測在人角質(zhì)形成細(xì)胞HACAT等不同哺乳動(dòng)物細(xì)胞中的表達(dá)狀況自細(xì)胞水平探討優(yōu)化密碼對(duì)晚期基因L1蛋白表達(dá)的影響綜上所述該研究選用人角質(zhì)形成細(xì)胞為主要研究對(duì)象首次探討了優(yōu)化密碼L1基因在HACAT細(xì)胞中的表達(dá)狀況并在幾種不同的哺乳動(dòng)物細(xì)胞中較為全面地進(jìn)行了研究得到了一致的結(jié)論即優(yōu)化密碼能提高PVL1基因在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中的表達(dá)水平同時(shí)對(duì)優(yōu)化密碼的機(jī)制進(jìn)行了初步探討認(rèn)為在人角質(zhì)形成細(xì)胞中L1蛋白表達(dá)水平的提高可能主要是由于翻譯的增加所致通過此項(xiàng)研究為有效的PVL1預(yù)防性疫苗的研制奠定了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)及有效的PVL1基因DNA免疫途徑的探索提供了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)

簡介：江南卷柏SELAGINELLAMOELLENDFIIHIERON是卷柏科卷柏屬植物江南卷柏的干燥全草，為常用中草藥與民族藥1。具有清熱解毒、抗癌、止血之功效，用于癌癥、肺炎、急性扁桃體炎、眼結(jié)膜炎和乳腺炎等癥2。云南彝族主要用于治療黃疸型肝炎、肺結(jié)核咯血、全身浮腫等癥。鄂西土家族尚用于癌癥、腹瀉、淋病、小兒驚風(fēng)、吐血、便血、崩漏、痔瘡出血，外用則治燒燙傷、外傷出血。并且，以本品為原料制得的江南卷柏片對(duì)原發(fā)性血小板減少性紫癲、過敏性紫癲、繼發(fā)性紫癲及多種出血癥均有良效3。目前，中外植物化學(xué)工作者已從卷柏屬植物中分離出黃酮類、生物堿類、酚類、有機(jī)酸類、氨基酸及多糖類等多種化學(xué)成分4。其研究工作主要集中在植物的乙酸乙酯及正丁醇萃取部位，并從前者中成功分離了幾十個(gè)黃酮類化合物，且除芹菜素外大多為雙黃酮類5。其中，穗花杉雙黃酮AMENTOFLAVONE不僅含量通常為最高，且最早即被1971年OKIGAWA，等人從卷柏中分離得到6。我們課題組從卷柏屬植物分離得到19個(gè)雙黃酮化合物、1個(gè)黃酮類化合物和1個(gè)黃酮苷化合物，其中5個(gè)為新化合物，15個(gè)成分為首次從這些植物中發(fā)現(xiàn)，它們都具有一定程度抑制XOD、LOX或和COX2的活性；發(fā)現(xiàn)穗花衫雙黃酮、羅波斯塔黃酮和羅波斯塔黃酮4ˊ甲醚3種雙黃酮成分為卷柏屬植物共同的特征性成分，它們具有不同程度的抗氧化、抗病毒或抗腫瘤活性，是共同的活性指標(biāo)成分。其中從江南卷柏的活性部位分離得到了6個(gè)雙黃酮類化合物，經(jīng)鑒定為雞毛松雙黃酮A7，4′，7″TRIOMETHYLROBUSTAFLAVONE，Ⅰ、雞毛松雙黃酮B7，7″DIOMETHYLROBUSTAFLAVONE，Ⅱ、羅波斯塔黃酮4′甲醚4OMETHYLROBUSTAFLAVONE，Ⅲ、羅波斯塔黃酮ROBUSTAFLAVONE，Ⅳ，扁柏雙黃酮HINOKIFLAVONE，Ⅴ和穗花杉雙黃酮AMENTOFLAVONE，Ⅵ。其中，化合物ⅠⅤ為首次從江南卷柏中分離得到，化合物Ⅰ和Ⅱ雞毛松雙黃酮A和B屬于羅波斯塔黃酮類，只被報(bào)道發(fā)現(xiàn)于裸子植物羅漢松科羅漢松屬的雞毛松PODOCARPUSIMBRICATUS，這是首次從其它植物和卷柏屬植物中分離得到7。研究中還發(fā)現(xiàn)，卷柏屬植物江南卷柏、細(xì)葉卷柏及薄葉卷柏等均具有良好的體外抗柯薩奇病毒效果8。其中，江南卷柏的乙酸乙酯提取物不僅可直接殺死病毒，還能有效抑制病毒的生物合成9。而乙酸乙酯部位的主要特征成分之一是黃酮類化合物，故我們從江南卷柏藥材中提取出有效部位總黃酮成分，并考察其工藝和質(zhì)量，從而初步制定江南卷柏總黃酮提取物的制備工藝與質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。然后，以此提取物進(jìn)行了多次體外和體內(nèi)抗柯薩奇病毒CVB3和單純皰疹病毒HSVⅠ的研究，取得了肯定且可靠的效果。首先，在江南卷柏提取物制備工藝方面，我們通過單因素試驗(yàn)考察其粗提方法，確定為乙醇回流法；再以總黃酮提取量和浸膏得率為考察指標(biāo)，用正交試驗(yàn)法對(duì)乙醇回流提取工藝進(jìn)行考察，確定其最佳工藝條件為藥材9倍量的85％乙醇回流提取2次，每次1小時(shí)；接著以穗花杉雙黃酮提取量和浸膏得率為考察指標(biāo)，用正交試驗(yàn)法對(duì)醇提物的石油醚脫脂工藝進(jìn)行考察，確定其最佳工藝條件為用原藥材6倍量的石油醚回流提取2次，每次1小時(shí)；脫脂后以低濃度稀醇溶液溶解過濾，再用大孔樹脂進(jìn)行純化分離，得到最終產(chǎn)品總黃酮粉末。具體即以總黃酮的含量和回收率為考察指標(biāo)，通過單因素試驗(yàn)對(duì)樹脂的型號(hào)、藥材上樣量、洗脫劑濃度和體積、洗脫流速及樹脂重復(fù)使用次數(shù)進(jìn)行考察，確定其最佳工藝為用D101型大孔樹脂對(duì)其進(jìn)行吸附純化，樹脂量藥材量為31，以8BV70％乙醇溶液在2BVH的流速進(jìn)行洗脫，樹脂的重復(fù)使用次數(shù)為3次。在江南卷柏提取物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)方面，以紫外分光光度法和高效液相色譜法對(duì)提取物的總黃酮含量及穗花杉雙黃酮含量進(jìn)行測定，并進(jìn)行方法學(xué)考察，規(guī)范以上述制備工藝所制得總黃酮提取物，其總黃酮含量不少于500％，穗花杉雙黃酮含量不少于350％。同時(shí)，我們還制定了江南卷柏藥材的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，確定其名稱、來源、性狀，鑒別、含量測定、炮制、性味歸經(jīng)、功能與主治、用法與用量及貯藏。在含量測定中，是以穗花杉雙黃酮為對(duì)照品，采用高效液相色譜法，測定穗花杉雙黃酮的含量，并進(jìn)行了方法學(xué)考察。最后暫定本品以干燥品計(jì)含穗花杉雙黃酮不得少于030％。接著，對(duì)江南卷柏提取物的體外抗病毒作用進(jìn)行了研究。我們選擇柯薩奇病毒CVB3及單純皰疹病毒HSVⅠ，根據(jù)其復(fù)制周期，設(shè)計(jì)藥物抗病毒作用的三種途徑抗病毒吸附、對(duì)病毒直接滅活、對(duì)病毒增殖的抑制作用，分三個(gè)處理組進(jìn)行試驗(yàn)。細(xì)胞毒性試驗(yàn)表明，江南卷柏提取物的TC50為60ΜGML。故在此范圍內(nèi)確定5，10，20，30，40，50ΜGML作為藥物終濃度進(jìn)行抗病毒試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，抗CVB3效果方面，其直接滅活病毒作用的IC50為36ΜGML，最高病毒抑制率為60％，TI為17；其抑制病毒增殖作用的IC50為16ΜGML，最高病毒抑制率為70％，TI為38。抗HSVⅠ效果方面，其直接滅活病毒作用的IC50為21ΜGML，最高病毒抑制率為80％，TI為29；其抑制病毒增殖作用的IC50為12ΜGML，最高病毒抑制率為90％，TI為51。實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明江南卷柏提取物不僅細(xì)胞毒性較低，且具有較好的直接殺死病毒和抑制病毒生物合成的作用，其生物效價(jià)較高。最后，我們對(duì)江南卷柏提取物在體內(nèi)抗柯薩奇病毒的療效進(jìn)行了重點(diǎn)研究。小鼠的動(dòng)物急性毒性試驗(yàn)表明，當(dāng)以02ML10G一次性灌胃、給藥濃度依次為40，50，63，79，10MGG時(shí)，其死亡率分別為10％，30％，60％，80％，100％，故確定江南卷柏標(biāo)準(zhǔn)提取物的LD50為62MGG。則在此范圍內(nèi)確定09，03，01MGG作為高、中、低三種藥物濃度進(jìn)行抗病毒治療。選取小鼠KMSPF級(jí)雄性，體重10±2G作為試驗(yàn)動(dòng)物，用02MLCVB3原液TCID50為107腹腔注射建立了病毒感染誘發(fā)小鼠病毒性心肌炎致病模型，然后分別設(shè)立高、中、低三種濃度的藥物治療組，正常對(duì)照組，病毒模型對(duì)照組和阿昔洛韋陽性藥物對(duì)照組，于病毒感染后24H開始治療，采取灌胃給藥形式，每日一次，其余各組則采用生理鹽水灌胃，每日一次，連續(xù)治療15天。結(jié)果表明，當(dāng)藥物濃度為01MGG時(shí)，其治愈率為30％，死亡率為50％；當(dāng)藥物濃度為03MGG時(shí)，其治愈率為50％，死亡率為20％；當(dāng)藥物濃度為09MGG時(shí)，其治愈率為70％，死亡率為10％。綜合各項(xiàng)考察指標(biāo)，結(jié)果顯示總黃酮提取物能有效抑制柯薩奇病毒在小鼠體內(nèi)的增殖，保護(hù)其臟器組織，明顯減輕發(fā)病癥狀，推遲死亡時(shí)間，降低死亡率，治療呈現(xiàn)明顯的量效關(guān)系。本文研究發(fā)現(xiàn)，江南卷柏提取物的細(xì)胞毒性TC50為60ΜGML和動(dòng)物毒性LD50為62MGG均較小，在體外有顯著抑制柯薩奇病毒和單純皰疹病毒增殖的作用，體內(nèi)能有效地治療柯薩奇病毒感染誘發(fā)的病毒性心肌炎小鼠，是一種新的潛在性有效的抗柯薩奇病毒和單純皰疹病毒的藥物。江南卷柏在民間已經(jīng)用于多種病毒性疾病，本研究為治療危急性的病毒性心肌炎提供了新的依據(jù)和希望，為抗病毒藥物的研究開發(fā)，提供了新的選擇。

簡介：同型半胱氨酸是體內(nèi)一種含硫氨基酸，同型半胱氨酸被認(rèn)為是與老化相關(guān)的疾病，如心血管疾病的風(fēng)險(xiǎn)因子，因此研究同型半胱氨酸對(duì)預(yù)防和治療這些疾病具有重要的意義。糖尿病和認(rèn)知功能障礙都隨著年齡增大患病率提高，研究表明糖尿病和認(rèn)知功能障礙可能存在共同的發(fā)病機(jī)理，但是糖尿病和認(rèn)知功能障礙的這種相關(guān)性缺少流行病學(xué)研究證據(jù)。已有研究表明高同型半胱氨酸血癥可能提高認(rèn)知功能障礙和糖尿病的發(fā)病率，但研究結(jié)果并不一致。飲食和營養(yǎng)因素對(duì)疾病的預(yù)防起重要作用，合理的膳食可能會(huì)減少疾病的發(fā)生率。鑒于以上幾點(diǎn)，本博士課題以臺(tái)灣老人營養(yǎng)和健康調(diào)查受試者為研究對(duì)象，采用前瞻性隊(duì)列研究，橫斷面研究等人群研究方式，運(yùn)用COX比例風(fēng)險(xiǎn)模型，回歸模型等營養(yǎng)流行病學(xué)研究方法，研究認(rèn)知功能障礙是否提高2型糖尿病的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)研究血漿同型半胱氨酸濃度對(duì)認(rèn)知功能障礙，對(duì)2型糖尿病的發(fā)生及死亡風(fēng)險(xiǎn)的影響并研究飲食及B族維生素等在其中可能起的作用。主要研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)1女性如果患認(rèn)知功能障礙，2型糖尿病發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)明顯提高，校正相關(guān)變量后，女性患認(rèn)知功能障礙受試者糖尿病的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)為正常認(rèn)知功能受試者的243倍（風(fēng)險(xiǎn)比為243，95％的可信區(qū)間為127463）。膳食多樣化，適當(dāng)運(yùn)動(dòng)可以降低女性認(rèn)知功能障礙患糖尿病的風(fēng)險(xiǎn)2血漿同型半胱氨酸濃度和認(rèn)知功能障礙的發(fā)生不存在顯著相關(guān)性。以血漿同型半胱氨酸濃度＜93ΜMOLL為對(duì)照組，血漿同型半胱氨酸濃度＞145ΜMOLL患認(rèn)知功能障礙的比值比為14，95％可信區(qū)間為050393糖尿病患者血漿同型半胱氨酸平均濃度并沒有比非糖尿病患者高3血漿同型半胱氨酸濃度與認(rèn)知功能狀態(tài)對(duì)死亡風(fēng)險(xiǎn)存在顯著性交互作用4血漿同型半胱氨酸與2型糖尿病對(duì)死亡風(fēng)險(xiǎn)存在交互作用。以無糖尿病且血漿同型半胱氨酸濃度＜15ΜMOLL為對(duì)照組，2型糖尿病患者血漿同型半胱氨酸濃度＜15ΜMOLL死亡風(fēng)險(xiǎn)為對(duì)照組的137倍風(fēng)險(xiǎn)比為137，95％的可信區(qū)間為103181，2型糖尿病患者血漿同型半胱氨酸濃度≥15ΜMOLL時(shí)，死亡風(fēng)險(xiǎn)為對(duì)照組的173倍（風(fēng)險(xiǎn)比為173，95％的可信區(qū)間為118246）。5魚類攝取，血漿葉酸、維生素B6水平和血漿同型半胱氨酸濃度顯著負(fù)相關(guān)膳食多樣性，維生素B2和B6的攝取及血漿維生素B1和B2的濃度與認(rèn)知功能顯著相關(guān)。結(jié)論臺(tái)灣老人營養(yǎng)和健康調(diào)查研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)血漿同型半胱氨酸濃度與認(rèn)知功能障礙和2型糖尿病發(fā)生不存在顯著相關(guān)性，但血漿同型半胱氨酸濃度和認(rèn)知功能障礙以及血漿同型半胱氨酸濃度和2型糖尿病對(duì)死亡風(fēng)險(xiǎn)存在顯著交互作用，共同影響死亡風(fēng)險(xiǎn)的大小，膳食多樣化和適量B族維生素可以降低血漿同型半胱氨酸濃度，可以降低認(rèn)知功能障礙的發(fā)生及降低死亡風(fēng)險(xiǎn)。

簡介：點(diǎn)擊查看更多加減甘露消毒丹抗鴨乙型肝炎病毒的實(shí)驗(yàn)研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：杭州師范大學(xué)碩士學(xué)位論文多媒體學(xué)習(xí)條件下信念對(duì)元認(rèn)知監(jiān)控的影響多媒體學(xué)習(xí)條件下信念對(duì)元認(rèn)知監(jiān)控的影響論文評(píng)閱人評(píng)閱人2評(píng)閱人3評(píng)閱人4評(píng)閱人5論文作者簽名指導(dǎo)教師簽名答辯委員會(huì)主席霎暈壘墊煮嵫委員1委員2委員3委員4委員5答辯日期邊魚杭州師范大學(xué)碩士學(xué)位論文多媒體學(xué)習(xí)條件下信念對(duì)元認(rèn)知監(jiān)控的影響致謝從研L哥LJ入校開始，我的導(dǎo)師程素萍老師就一直給予我學(xué)習(xí)上的幫助。猶記得我第一次參加組會(huì)的時(shí)候，師姐們報(bào)告論文，程老師對(duì)她們進(jìn)行指導(dǎo)。當(dāng)時(shí)我對(duì)心理學(xué)研究所知甚少，她們的專業(yè)和嚴(yán)謹(jǐn)給我留下很深的印象，也在我的心中樹立了學(xué)術(shù)研究的榜樣。之后我也開始在組會(huì)上報(bào)告自己的想法和看到的文獻(xiàn)，程老師常啟發(fā)我思考，督促我閱讀更多的文獻(xiàn)，這對(duì)我最終找到自己的畢業(yè)論文選題幫助很大。在我找到選題之后，也曾走過彎路，也曾停滯不前，這時(shí)候程老師總會(huì)把我混亂的思路理清，使我漸漸明確自己想要表達(dá)和解決的問題。除了程老師之外，我的室友李揚(yáng)、郭瑞雪和張曉霞也在我做研究的過程中給我很多幫助。我找選題的時(shí)候，她們是我隨時(shí)可以請(qǐng)教的朋友；我做試驗(yàn)的時(shí)候，她們是我義無反顧的測試員；我寫論文的時(shí)候，她們是我并肩作戰(zhàn)的同志。在她們的幫助下，我在做研究的道路上感到了被陪伴和被溫暖。還有，我的朋友丁云、何濤和宋曉偉也在研究中給了我許多意見和建議。在他們的幫助下，我學(xué)會(huì)了使用眼動(dòng)儀。在實(shí)驗(yàn)和寫論文的過程中跟我遇到了一些問題，他們都熱心的幫我解答，讓我最終克服了困難，順利完成實(shí)驗(yàn)。在這些老師、朋友和同學(xué)的幫助下，我完成了我的論文。更重要的是，因?yàn)橛辛怂麄?，我的三年研究生生涯得以圓滿和完整。

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簡介：浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文宮頸癌人乳頭瘤病毒基因型分布及與臨床病理關(guān)系的研究姓名陳仲波申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)婦產(chǎn)科學(xué)指導(dǎo)教師呂衛(wèi)國20090401浙江大學(xué)碩I學(xué)位論文摘要感染型別。因此，深入研究各地區(qū)HPV基因型流行狀況，有助于確定宮頸癌發(fā)生的高危因素、高危人群，為政府制定預(yù)防政策提供依據(jù)，也為本地區(qū)HPV疫苗的推廣、研發(fā)提供理論依據(jù)。臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、宮旁或陰道浸潤、病理類型、組織分化、脈管累及和深聞質(zhì)浸潤是影響宮頸癌預(yù)后的重要臨床病理指標(biāo)，目前已有部分研究發(fā)現(xiàn)HPV基因型與宮頸癌患者的預(yù)后有關(guān)，但相關(guān)研究尚少，且國內(nèi)未見該方面的研究報(bào)道。本研究以病理證實(shí)的宮頸癌患者為研究對(duì)象，利用導(dǎo)流雜交基因芯片技術(shù)HYBRIMAX對(duì)上述研究對(duì)象的宮頸脫落細(xì)胞進(jìn)行HPV基因型的分型檢測，探討本地區(qū)官頸癌HPV感染的型別分布及各基因型感染與宮頸癌臨床病理特征關(guān)系。二、材料與方法選擇2007年1月～2008年12月在浙江省腫瘤醫(yī)院就診并經(jīng)病理學(xué)確診的1169例浸潤性宮頸癌患者為研究對(duì)象，均為漢族婦女。對(duì)上述研究對(duì)象的宮頸脫落細(xì)胞用導(dǎo)流雜交基因芯片技術(shù)進(jìn)行21種HPV基因型的分型檢測，并分析HPV基因型與宮頸癌患者臨床病理特征之問的關(guān)系。三、結(jié)果1，1169例宮頸癌中共檢測到1072例存在HPV感染，HPV陽性率為91。70％，其中高危HPV陽性率為9153％，低危HPV陽性率為488％。經(jīng)檢測902例被單一HPV基因型感染，占77，16％；170倒樣本存在多重HPV基因型的混合感染，占1454％；其中二重感染143例，占1223％；三重感染15例，占128％；四重感染9例，占O。77％；五重感染3例，占O。26％。在檢測到的19種HPV基因型中，HPVL6是感染最多的基因型，共726例，占6210％，HPVL8是該組病例中位于第二位的基因型，共128例，占1095％，其次是HPV58，占1052％123／1169，JV

簡介：目的感染乙型肝炎病毒（HBV）者可產(chǎn)生不同的結(jié)局如病毒攜帶狀態(tài)、慢性肝炎、肝硬化和肝癌導(dǎo)致這些差異的機(jī)制不僅與遺傳和HBV感染引起的免疫狀態(tài)有關(guān)而且與病毒基因變異關(guān)系密切HBV基因組變異可使機(jī)體產(chǎn)生不同的病理變化而HBV基本核心啟動(dòng)子（BCP）基因區(qū)NT1762A→T和NT1764G→A聯(lián)合變異的發(fā)生率高其臨床和生物學(xué)意義也較重要已成為近年研究熱點(diǎn)有關(guān)BCP區(qū)雙變異的報(bào)道不少而得出的結(jié)論存在爭議已知TNFΑ為一重要肝損因子可介導(dǎo)一系列炎癥反應(yīng)與肝病的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)BCP區(qū)雙變異的致病是否由TNFΑ介導(dǎo)與TNFΑ有無相關(guān)性國內(nèi)外尚無有關(guān)報(bào)道為探討二者的關(guān)系該研究檢測了HBVBCP雙變異情況并分析戎有關(guān)文獻(xiàn)同時(shí)檢測了血清TNFΑ值并作相關(guān)分析結(jié)論（1）該地區(qū)慢乙肝患者HBVBCP雙變異與病變程度有關(guān)BCP區(qū)雙變異并未終止HBEAG的生成卻增加了HBV復(fù)制（2）TNFΑ與肝功損傷及病變程度呈正相關(guān)與HBVBCP區(qū)雙變異有顯著相關(guān)性（3）檢測HBVBCP區(qū)雙變異和TNFΑ值對(duì)病情估計(jì)、預(yù)后推測、重癥肝炎的防治可能有一定參考價(jià)值

簡介：目的1從2008年7月至2009年3月濟(jì)南市手足口病患者的臨床糞便標(biāo)本中分離得到病原體并對(duì)其進(jìn)行鑒定。2對(duì)所分離到的EV71分離株的5’UTR區(qū)基因序列VP4蛋白基因編碼序列和VP1蛋白基因編碼序列進(jìn)行序列測定對(duì)所獲得的核酸序列所進(jìn)行比對(duì)分析其基因特征并進(jìn)行基因分型。3為了提供疫苗研究和免疫學(xué)檢測試劑的研發(fā)基礎(chǔ)對(duì)EV71的VP1進(jìn)行原核表達(dá)并對(duì)其進(jìn)行初步鑒定。方法1EY71的分離和鑒定標(biāo)本的采集和處理均按照中國疾控中心的手足口病標(biāo)本采集及檢測技術(shù)方案進(jìn)行操作使用三種細(xì)胞系MA104、VERO和RD對(duì)標(biāo)本中的病毒進(jìn)行分離。分離獲得的病毒毒株使用RTPCR法進(jìn)行分子生物學(xué)鑒定鑒定時(shí)使用腸道病毒通用引物、腸道病毒71型特異性引物和柯薩奇病毒A16型特異性引物進(jìn)行鑒定。2EVT1的基因分型和基因特征分析使用引物EVP1S和EVP1A對(duì)VP1編碼基因進(jìn)行RTPCR擴(kuò)增使用引物EVG1S和EVG1A對(duì)5’UTR區(qū)和VP4編碼基因進(jìn)行RTPCR擴(kuò)增將擴(kuò)增后獲得的DNA克隆至PMD18T載體上后進(jìn)行測序。所獲得的基因序列使用BIOEDIT和MEGA4軟件進(jìn)行分析并構(gòu)建進(jìn)化樹。3重組EV71VP1蛋白的原核表達(dá)使用引物EVPLA和EVPLS對(duì)VP1編碼基因進(jìn)行擴(kuò)增并構(gòu)建重組載體PET30AVP1將其轉(zhuǎn)化大腸桿菌TRANSETTA后獲得工程菌。使用IPTG對(duì)工程菌進(jìn)行誘導(dǎo)獲取基因工程蛋白使用WESTERNBLOT法和抗HIS標(biāo)簽單克隆對(duì)工程蛋白進(jìn)行初步鑒定。結(jié)果1EV71的分離與鑒定共從13例糞便標(biāo)本中使用細(xì)胞分離共獲得了7株病毒經(jīng)RTPER鑒定后其中6株為腸道病毒71型1株為柯薩奇病毒A16型。2EV71的基因分型和核酸序列分析獲得了6株EV71分離株的VP1編碼基因序列和2株EV71分離株的5’UTR及VP4編碼基因序列序列分析結(jié)果表明所分離得到的6株病毒與中國大陸流行的大部分EV71病毒相對(duì)應(yīng)的核酸序列具有極高的同源性在進(jìn)化樹上與大部分中國大陸地區(qū)的EV71分離株均位于同一大的分支上屬于C4亞型但與早期的EV71C4亞型分離株位于不同的小進(jìn)化分支上。3重組EV71VP1蛋白的原核表達(dá)經(jīng)IPTG誘導(dǎo)后在含有重組載體的大腸桿菌中表達(dá)了工程蛋白并使用抗6HIS抗體對(duì)該蛋白進(jìn)行了鑒定鑒定結(jié)果呈陽性。結(jié)論1在2008年7月至2009年3月期間流行手足口病流行期間腸道病毒71型為主要病原體但并非唯一病原體在此期間流行的EV71主要為C4亞型但已經(jīng)與早期中國大陸地區(qū)分離的C4亞型分離株有了一定的分化。2重組EV71VP1蛋白在大腸桿菌TRANSETTA獲得了成功表達(dá)。

簡介：點(diǎn)擊查看更多腺病毒介導(dǎo)p21轉(zhuǎn)染治療大鼠靜脈移植內(nèi)膜增生的研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：流感病毒是嚴(yán)重危害人類的呼吸道傳染病原體曾多次引起世界流感大流行。它是單鏈負(fù)鏈RNA病毒其基因由8段RNA組成編碼11種蛋白血凝素HA神經(jīng)氨酸酶NA基質(zhì)蛋白M1離子通道蛋白M2非結(jié)構(gòu)蛋白NS1和NS2核蛋白NUCLEOPROTEINNP凋亡前體蛋白PB1F2和RNA依賴性RNA聚合酶PAPB1和PB2等。核蛋白NP為流感病毒顆粒的重要組成部分由498個(gè)氨基酸組成分子質(zhì)量約56KD的多肽是甲型流感病毒RNA的第5節(jié)段基因編碼的RNA結(jié)合蛋白與多聚酶蛋白及病毒單鏈的RNA相互作用形成螺旋對(duì)稱的RNP復(fù)合體。RNP復(fù)合體與依賴RNA的多聚酶一起成為病毒基因組復(fù)制與轉(zhuǎn)錄必不可少的結(jié)構(gòu)。NP也是細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞識(shí)別的主要抗原。所以甲型流感病毒核蛋白基因可以作為防治流感病毒的一個(gè)主要靶點(diǎn)目的本實(shí)驗(yàn)通過構(gòu)建甲型流感病毒APR834H1N1核蛋白基因的真核表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染HELA細(xì)胞并檢測HELA細(xì)胞內(nèi)NP的表達(dá)情況為進(jìn)一步研究核蛋白的功能和相關(guān)理化作用及對(duì)核蛋白的影響奠定基礎(chǔ)。方法根據(jù)NCBI數(shù)據(jù)庫已發(fā)表的甲型流感病毒APR834H1N1GENBANKNCBGI8486129毒株的核蛋白基因全長序列用PRIMERPRIMIER5軟件設(shè)計(jì)兩條NP的特異引物并加酶切點(diǎn)用特異引物從甲型流感病毒CDNA中采用PCR技術(shù)克隆出NP基因酶切后將其插入到真核表達(dá)質(zhì)粒PCDNA31。構(gòu)建好的重組質(zhì)粒PCDNA31NP經(jīng)酶切、PCR、測序鑒定。將構(gòu)建好的PCDNA31NP用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法轉(zhuǎn)染HELA細(xì)胞用甲型流感病毒檢測試劑盒FLUARAPIDTESTKIT檢測檢測HELA細(xì)胞內(nèi)外NP的表達(dá)情況。結(jié)果經(jīng)PCR克隆出的甲型流感病毒APR834H1N1NP基因經(jīng)酶切連接后構(gòu)建一個(gè)新的重組質(zhì)粒PCDNA31NP該質(zhì)粒經(jīng)酶切、PCR、測序鑒定均表明成功構(gòu)建了PCDNA31NP。構(gòu)建的質(zhì)粒含一個(gè)核苷酸長度為1432BP的基因和APR834H1N1GENBANKNCBGI8486129有98％的同源性。重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染HELA細(xì)胞后用甲型流感病毒檢測試劑盒檢測到24H、48H、72H細(xì)胞內(nèi)外NP的蛋白表達(dá)。結(jié)論成功構(gòu)建甲型流感病毒APR834H1N1核蛋白基因的真核表達(dá)質(zhì)粒PCDNA31NP。并且通過試劑盒檢測能在HELA細(xì)胞中表達(dá)。為進(jìn)一步研究理化因素對(duì)該基因的影響和該基因的結(jié)構(gòu)和功能打下基礎(chǔ)。

簡介：南京醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文逆轉(zhuǎn)錄病毒載體介導(dǎo)的CD自殺基因?qū)SHV腫瘤轉(zhuǎn)化基因K12誘導(dǎo)NIH3T3轉(zhuǎn)化細(xì)胞的殺傷作用姓名唐桂霞申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)微生物學(xué)指導(dǎo)教師盧春20050420南京醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)忙淪史檢測結(jié)果顯示，5FC作用后的N爪12／FF細(xì)胞的凋亡率與作用前相比增加了46％；同時(shí)，經(jīng)5FC作用后的N／K12／FF細(xì)胞的生長周期發(fā)生了明顯變化，表現(xiàn)為GOG1期細(xì)胞比率降低，S和G2一M期細(xì)胞比率增高。5FC使N／K12／FF細(xì)胞的增殖主要阻滯在S期。IHC檢測結(jié)果表明，N／K12／FF細(xì)胞在5FC使用后的FAS和FASL表達(dá)水平均明顯高于5FC使用前的水平。上述研究結(jié)果表明，KSHVK12基因具有體外轉(zhuǎn)化細(xì)胞和體內(nèi)誘導(dǎo)腫瘤形成的能力；CD／5FC在體外對(duì)KSHV腫瘤轉(zhuǎn)化基因K12誘導(dǎo)的NIH3T3轉(zhuǎn)化細(xì)胞具有殺傷作用，凋亡有可能介導(dǎo)了部分殺傷過程。提示，CD／5一FC系統(tǒng)有可能成為治療KS的一種新的有效的方法?！娟P(guān)鍵詞】卡波濟(jì)肉瘤相關(guān)皰疹病毒KSHV，腫瘤轉(zhuǎn)化基因K12，CD／5一FC系統(tǒng)，逆轉(zhuǎn)錄病毒載體，凋亡

簡介：點(diǎn)擊查看更多Geneticin抑制丙型肝炎病毒復(fù)制的初步研究.pdf精彩內(nèi)容。