簡介：分類號R74ICS學校代碼10136學號201200136委￡≈莖一3家名民慶大學首發(fā)腦小血管閉塞性卒中患者早期認知功能評價EVALUATIONOFCOGNITIVEFUNCTIONONPATIENTSWITHFIRSTEPISODEOFSMALLVESSELOCCLUSIVESTROKEINTHEIREARLYSTAGE申請人金花學科專業(yè)臨床醫(yī)學研究方向神經病學學位類別專業(yè)學位指導教師I張東威論文提交日期二。一五年五月ABSTRACTOBJECTIVETHISPAPERISTOEVALUATECOGNITIVEFUNCTIONOFTHEFIRSTEPISODEOFSMALLVESSELOCCLUSIVESTROKEPATIENTSBYMEANSOFMINIMENTALSTATEEXAMINATIONMMSE】ANDMONTREALCONGITIVEASSESSMENTMOCAALSO，THESENSIBILITYANDSPECIFICITYOFMMSEWERECOMPAREDWITHMOCAFORASSESSINGCOGNITIVEDYSFUNCTIONOFTHEFIRSTEPISODEOFSMALL。VESSELOCCLUSIVESTROKEPATIENTSINTHEIREARLYSTAGEINTHISPAPERTHEBESTCUTOFFPOINTFOREVALUATIONOFTHECOGNITIVEDYSFUNCTIONOFTHEFRRSVEPISODEOFSMALLVESSELOCCLUSIVESTROKEPATIENTSINTHEIREARLYSTAGEISDETERMINEDBYMAXIMUMYOUDENINDEXMETHODATOTAL100CASESOFPATIENTGROUPWHICHWASDIAGNOSEDASTHEFIRSTEPISODEOFSMALLVESSELOCCLUSIVESTROKE。ANDMATCHESTHEINCLUSIONANDEXCLUSIONSTANDARDCOLLECTEDFROMTHEINPATIENTANDOUTPATIENTINNEUROLOGYDEPARTMENTOFAFFILIATEDHOSPITALOFINNERMONGOLIAUNIVERSITYFORNATIONALITIES，DURINGNOVEMBER2013TONOVEMBER2014INTHEMEANTIME，WETAKE100HEALTHYSUBJECTSFROMTHEINPATIENTANDOUTPATIENTWHOMATCHTHECONTROLSTANDARDANDPASSTHEPHYSICALEXAMINATIONTHENWECOLLECTEDTHEIRCLINICALDATAANDWEALSODIDNEUROPSYCHOLOGICALEVALUATIONAMONG2GROUPSRESULTS1THEMOCASCORESWERESIGNIFICANTLYLOWERINPATIMTSGROUP衄THENAMALGROUP2099士422VS27154136菡、砌ASLKMMSE儺2587士321VS27294220THEPATIENTGROUPJSSCORESOFEVERYCOGNITIVEMEASUREINMOCASCALEWERESIGNIFICANTLYLOWERTHANTHATTHECONTROLGROUPESPECIALLYINTHESETHREEASPECTSOFVISUOSPATIALEXECUTIVEFUNCTION，ATTENTIONANDDELAYEDMEMORYRECALL005，ALSOTHEPATIENTGROUP’SSCORESOFEVERYCOGNITIVEMEASUREINMMSESCALEWERESIGNIFICANTLYLOWERTHANTHATTHECONTROLGROUPINTHEMEMORYRECALLP0052THEBESTCLINICALCUTOFFPOINTOFTHEMMSETESTFORTHEFIRSTEPISODEOFSMALLVESSELOCCLUSIVESTROKEPATIENTS‘EARLYCOGNITIVEDYSFUNCTIONWAS25／26，WHICHWASPRIMARILYDETERMINEDBYRECEIVEROPERATINGCHARACTERISTICANDTHEMAXIMUMYOUDENINDEXWITH25／26ASTHECUTOFFPOINTTHESENSIBILITYANDSPECIFICITYOFMOCASCALEISSIGNIFICANTLYHIGHERTHANTHEMMSESCALEWITH26／27ASTHECUTOFFPOINT，THESENSIBILITYIS73％，ANDTHESPECIFICITYIS50％TOEVALUATETHEFIRSTEPISODEOFSMALLVESSELOCCLUSIVESTROKEPATIENTS’EARLCOGNITIVEDYSFUNCTION，THESENSIBILITYIS93％FORMOCATEST，ANDTHESPECIFICITYIS87％3THEMMSEANDMOCASCORESWEREDIFFERFROMPATIENTS’EDUCMIONLEVELSFORTHEPATIENTGROUP，THEMOCAANDMMSESCORESOFTHOSEWHOGOTTHEMIDDLESCHOOLANDTHEABOVEEDUCMIONWERESIGNIFICANTLYHIGHERTHANTHOSEWHORECEIVEDUNDERMIDDLESCHOOLEDUCATIONP005；FORTHECONTROLGROUP，THEMOCASCOREOFTHEWHOGETMIDDLESCHOOLANDTHEABOVEEDUCATIONWEREHIGHERTHANTHOSEWHO

簡介：浙江大學醫(yī)學院碩士學位論文杭州地區(qū)腹瀉嬰幼兒諾如病毒感染狀況及危險因素研究姓名孫晝申請學位級別碩士專業(yè)流行病與衛(wèi)生統(tǒng)計學指導教師陳坤20100401浙江人學碩上學位論文中文摘要材料與方法20052007年每年1112月及2008年1月至12月，從浙江省兒童醫(yī)院內科門診采集在杭州持續(xù)居住半年以上，年齡在5歲以下，臨床診斷為病毒性腹瀉的就診患幾糞便標本。采用熒光實時RTPCR法檢測標本諾如病毒核酸，同時采用膠體凝集試驗法檢測樣本中的A群輪狀病毒，并開展患兒一般情況、臨床表現、感染的危險因素的專項調查。選擇同期前往浙江省兒童醫(yī)院外科及呼吸道發(fā)熱門診就診，近二周內未發(fā)生過腹瀉癥狀的患兒作為對照組。收集2006年至2008年，杭州地區(qū)發(fā)生的實驗室診斷為諾如病毒暴發(fā)疫情的流行病學資料，了解疫情的危害及可能的暴發(fā)原因。本研究主要采用SPSSL30統(tǒng)計分析軟件進行，對正態(tài)分布計量資料作T檢驗，非正態(tài)分布計量資料采用秩和檢驗，計數資料作卡方檢驗，通過分析篩選出諾如病毒感染有影響的相關因素。對單因素分析中顯著性水平小于O25的變量放入回歸模型，通過逐步回歸方法分別擬合多因素非條件LOGISITC回歸模型，模型中顯著性水平小于005的予以納入，大于O10的予以剔除。結果1本次研究共完成634例臨床診斷為病毒性腹瀉患兒的調查與糞便標本采集檢測工作，根據診斷標準確定78例諾如病毒感染患兒及271例輪狀病毒感染患兒，完成161例對照人群的調查工作。經檢測，諾如病毒總陽性檢出率為1230％78／634，輪狀病毒總陽性檢出率為4274％271／634，未發(fā)現混合感染病例。1月、2月、11月、12月為檢出高峰月。2諾如患兒的主要臨床表現為發(fā)熱，腹瀉、嘔吐等胃腸道癥狀，與輪狀病毒感染的患兒相比，諾如病毒感染的患兒更易出現嘔吐癥狀。3杭州地區(qū)嬰幼兒諾如病毒胃腸炎感染的影響因素包括家庭居住地、流動人口、家庭月收入、便后家長洗手習慣，定期清洗抹布及母乳喂養(yǎng)等。478株諾如病毒分子分型結果顯示，GⅡ遺傳組占大多數，GⅡ／4型基因型是本地區(qū)流行的主要基因型。52006年至2008年，杭州地區(qū)共報告7起群體性諾如病毒急性胃腸炎暴發(fā)疫III

簡介：目的慢性乙型病毒性肝炎是一種嚴重危害我國人民健康的疾病。局部的調查顯示，國內一般人群HBSAG陽性率約為9％。這些乙肝病毒攜帶者中的大部分機體最終將病毒清除，但是仍有相當一部分攜帶者轉變成為慢性乙型肝炎。同一種病毒感染不同的宿主，產生不同的后果，說明慢性乙型病毒性肝炎的發(fā)生，除了病毒感染以外，還與宿主的遺傳易感性有關。本實驗擬觀察慢性乙肝病人和健康體檢者中CCR5基因表達的多態(tài)性情況，以探討CCR5表達和慢性乙型病毒性肝炎的關系。方法實驗一實驗組病例選自本院肝病?？撇》渴罩蔚穆砸倚筒《拘愿窝撞∪耍\斷標準參照2000年9月西安第十次全國傳染病和寄生蟲病學術會議制定的病毒性肝炎防治方案中的診斷標準，并排除以下病人①病人重疊有丙型，丁型肝炎的；②病人合并有肝臟惡性腫瘤的。對照組選白同期在我院進行健康體檢的普通人群，并排除體檢結果中有①HBSAG陽性，②肝功能ALT或者GGT大于正常值上限③HBVDNA定量大于500COPIESML的個體。實驗組病人入院后抽靜脈血，測定GGT，ALT，測定乙肝五項，對照組體檢者測定GGT，ALT和乙肝五項。同時留EDTA抗凝血標本2ML，先用簡化鹽析法提取DNA備用。對于符合入選標準的標本，進行PCR擴增。擴增后的DNA片段經限制性核酸內切酶消化。酶切產物經20％瓊脂凝膠電泳，最后用紫外線凝膠成像系統(tǒng)進行分析。實驗二病例選自本院肝病專科病房收治的慢性乙型病毒性肝炎病人，診斷標準，排除標準同實驗一，病人入院后抽靜脈血，測定HBVDNA定量，測定GGT，ALT，測定乙肝五項，同時留EDTA抗凝血標本2ML，先用簡化鹽析法提取DNA備用。對于符合入選標準的標本，后續(xù)實驗步驟同實驗一。結果用特異性引物擴增的DNA片段起始于CCR5基因的97位，終止于53位，片段長1010BP，BGLⅡ識別序列AGATCT，當503位的堿基是G時即503位沒有發(fā)生突變在所擴片段中僅有503位符合該識別序列的酶切位點，所以該產物片段被切成兩個部分；當503位的堿基是T時即503位發(fā)生了點突變在所擴片段中沒有符合該識別序列的酶切位點，該產物片段不能被該酶消化。BSTMCI識別序列CGATCG，當999位點堿基是G時即999位沒有發(fā)生突變在所擴片段中沒有符合該識別序列的酶切位點，該產物片段不能被該酶消化；當999位的堿基是T時即999位發(fā)生了點突變，1000位符合該識別序列中的酶切位點，從而使該片段可以被該酶消化，產物被分為兩個片段。CCR5基因的503位點，在慢性乙型病毒性肝炎的病人中，表達G的個體較多，而在對照的健康體檢人群中，表達T的個體較多，二者相比有顯著性差異P＜0005。同樣的，CCR5基因的999位點，在慢性乙型病毒性肝炎的病人中，表達G的個體較多，而在對照的健康體檢人群中，表達T的個體較多，二者相比有顯著性差異P＜005。在慢性乙型病毒性肝炎病人中，CCR5基因的503、999位點同時發(fā)生變異，或者503、999位點的其中一個發(fā)生變異的病人和兩個位點均不發(fā)生變異的個體之間比較，兩組病人之間的HBVDNA水平有顯著性差異P＜005，而CCR5基因的503、999位點同時發(fā)生變異，503和999位點其中一個發(fā)生變異的三組個體比較，HBVDNA水平無明顯差異P＞005。結論當CCR5基因503位表達T時，和或999位表達T時，其產物可能有保護機體免受乙型肝炎病毒侵害的作用或者有促進機體清除乙型病毒性肝炎病毒的作用，但尚不能證明二者同時變異時有協同作用。

簡介：中文摘要人乳頭瘤狀病毒HPV感染和MHCI類分子表達與食管鱗狀細胞癌發(fā)生關系的研究摘要目的人乳頭瘤狀病毒HUMANPAPILLOMAVIRUS，HPV是一種嗜上皮性的球形DNA病毒，能引起皮膚黏膜的鱗狀上皮增生。1978年HARALDZURHANSEN提出HPV可能是性傳播致癌的因素，并證實宮頸癌的發(fā)生與HPV的直接關系。之后研究者陸續(xù)發(fā)現HPV可能與直腸癌、食管癌、口腔癌、扁桃體癌等疾病有關。HPVDNA在宿主細胞中有二種存在方式，即整合狀態(tài)和游離狀態(tài)染色體外的附加形式，在癌前組織中病毒常位于染色體外，而在癌癥進展期，病毒DNA以單拷貝或多拷貝串聯形式整合到宿主細胞DNA中，其結合位點多位于E2基因附近，結果導致HPVE2基因對E6、E7基因啟動的負向調節(jié)作用缺乏，使E6、E7基因表達異常，導致細胞生長失控。主要組織相容性復合體IMAJORHISTOCOMPATIBILITYCOMPLEXI，MHCI參與內源性抗原病毒抗原、腫瘤抗原等加工、處理，其作用是將蛋白抗原處理成抗原肽，呈遞給抗原特異性T淋巴細胞，進行抗原抗體反應，清除有害抗原。有研究發(fā)現食管癌、胃癌、大腸癌、肺癌、宮頸癌中MHCI類相關分子蛋白表達下調，本實驗室前期研究發(fā)現DON脫氧雪腐鐮刀菌烯醇可使食管上皮細胞及人單個核細胞中皿AI、CALNEXIN、TAP】、LMP2表達降低。許多病毒可感染人的皮膚和黏膜組織，干擾MHCI抗原提呈過程，使其逃避宿主免疫應答。惡性腫瘤的發(fā)生是多種因素參與的過程，除與病毒感染有關外，機體免疫狀況也發(fā)揮著重要作用。有研究者發(fā)現食管鱗狀細胞癌與HPV感染有關，HPV感染人食管鱗狀上皮后，其E6、E7致癌基因異常表達，E6可使抑癌基因P53基因失活，而E7則與抑癌基因PRB有關。在宮頸癌發(fā)病機制研究中發(fā)現高危型HPV的E5基因可以下調MHCI類分子蛋白表達，抑制腫瘤抗原提呈，使其無法被清除，被認為是宮頸癌的致癌機制之一。但也有學者研究發(fā)現在宮頸癌形成后，E5基因丟失，而在宮頸癌前病變中如CINI級中可以檢測到E5基因，所以有學者認為E5基因只在癌癥發(fā)生前起作用?；谝陨涎芯拷Y果，本實驗設想E5基因是否影響HPV感染的食管

簡介：山西醫(yī)科大學碩士學位論文太原地區(qū)五歲以下腹瀉住院兒童輪狀病毒的分子流行病學研究姓名蘭蓓申請學位級別碩士專業(yè)流行病與衛(wèi)生統(tǒng)計學指導教師李佩珍20100505PQ醫(yī)科人學碩I學何論文MOLECULAREPIDEMIOLOGYOFROTAVIRUSAMONGCHILDRENUNDER5YEARSOLDHOSPITALIZEDFORDIARRHEAINTAIYUANABSTRACTOBJECTIVESTBSTUDYTHEINFECTEDINFORMATION，CLINICALSYMPTOMARLDNNMOLECULAREPIDEMIOLOGICALCHARACTERISTICSOFHRVINFECTION鋤ONGHOSPITALIZEDCHILDRENWITHACUTEDIA玎HEAUNDER5YEARSOLDIN1’AIYUAN，FBM2007TO2008；TOCOREECTTHEBACKGROUNDDATARELATEDWITHVIRALDI礎EA；TOPMVIDEREFERENCESFORPREVENTIONANDTREATOFTHEDISEASEMETHODSATOTALOF346STOOLS、VERECOLLECTEDFROMHOSPITALIZEDCHILDRENWITHACUTEDIARRHEA明DER5YEARSOLDINTAIYUANBET、，EEN2007，LLTO2008，L0，ROTAVIMSPOSITIVESPECIMENSⅥ，EREIDENTIFIEDBYELISAKITG／PTYPINGASSAYSWERECONFIRMEDWITHMULTIPLEXSEMINESTEDFMPCRTHESEPOSITIVEPRODUCTSWEREPURIFIED，EXTRACTEDPLASMID，THENSELECTEDTHESPECIEMESWHICHWERECONFINNEDBYPLASMIDPCRTESTTOBESEQUENCEDTHENUCLEICACIDIDENTIFYTHEGENOTYPEANDGENOGROUPOFAVAILABLESTRAINSRESULITSATOTALOF346STOOLSWERECOLLECTEDFBOMHOSPITALIZEDCHILDRENWITHACUTEDIARRHEAUNDER5YEARSOLDINTAIYUANBET、VEEN2007，1LTO2008，LOOFTHE346SPECIMENS，THEPERCEMAGEOFSAMPLES謝THI沁TAVIMSWAUS408％AMONG14LROTAVIMSPOSITIVESAMPLES，SERO哆PEGL426％WASTHEPREDOMINAILTS仃AINFOLLO、ⅣEDBYG3262％，G9106％ANDMIXEDGINFECTION64％142％OFSTRAINSREMAINEDT0BENONTYPEABLEPGENO帥INGSHOWEDP8】681％WASMOSTCOMMONFOLLOWEDBYP【4】07％，ANDNONTYPEABLE241％THEMOSTCOMMONCOMBINATIONOFGANDP、VASGLP【8】319％，FOIIOV，EDBYG3P8】184％A11DG9P8】71％M0RETHAN957％OFVIRALDIARRHEAPATIENTSUNDERHOSPITALIZATIONOCCURREDAMONGCHILDRENYOUNGERTHAN2YEARSCONCLUSIONSROTAVIMSREMAINSTLLEMOSTSIGNIFICANTVIRALAGENTCAUSINGDIAHHEAHOSPITALIZATIONAMONGCHILDRENUNDERMEAGEOF5YEARSINTAIYUANTHEMOSTCOMMONCHILDRENWITHROTAVIMSINFECTIONSWEREYOUNGERTHAIL2YEARSOLDRVPREVALENCEPEAKEDFROMSEPTEMBERTONOVEMBER7IHEPREDOMINANTSTMINSOFROTAVIRUSWEREG1ANDP8】INTAIYUANCITYINFORMATIONONTHEDIVERSITYANDCOMPLEXITYOFRVSTRAINSCIRCULATINGINTAIYUANPROVIDESUSEFULDATAFORFO硼ULATINGVACCINEPOLICYANDEVALUATINGVACCINEE伍CACYKEYWORDSROTAVIMS；DIALLRHEA；MOLECULAREPIDEMIOLOGYII

簡介：點擊查看更多護理專業(yè)大學生生活事件、認知情緒調節(jié)與心理韌性的關系研究.pdf精彩內容。

簡介：甲肝病毒HEPATITISAVIRUS，HAV和戊肝病毒是腸道傳播的肝炎病毒。兩種都是無包膜的正鏈小RNA病毒。HAV主要感染兒童，但隨著年齡增加，一旦感染，肝炎癥狀會更嚴重。戊肝暴發(fā)主要發(fā)生在許多發(fā)展中國家，導致數萬人感染。在孕婦患者中，戊肝致死率較高，可達20％。此外，HAV和HEV從流行病學到臨床癥狀都很相似，主要依靠實驗室檢查進行鑒別。已有文獻報道因飲用了被HAV和HEV污染的水而同時感染甲肝和戊肝的病例。本論文主要研究了HAVVP1和HEVF2編碼的抗原片斷形成嵌合類病毒顆粒的免疫原性。將HAVVP1AA24～171與HEVF2AA431～615N端相連，形成重組抗原AEAG342或與F2C端相連，形成EAAG342重組抗原。將上訴兩種嵌合抗原基因插入表達載體PBV220，在大腸桿菌BL21中獲得了高效表達。但只有重組蛋白EAAG342能形成直徑10～20MM的VLP顆粒。SDSPAGE顯示該抗原能形成部分二聚體結果，WESTERNBLOT顯示該二聚體能與人抗HAV和HEV陽性血清反應。本研究評價了重組蛋白AEAG342和EAAG342誘導的特異體液免疫反應。兩組昆明鼠，每組5只，分別注射一種重組抗原10ΜG弗氏佐劑，3周后再注射一次，同時設一組空白對照組。于第一次免疫后2，4，6，8和10周采血測特異性抗HAV和HEVIGG滴度。結果顯示EAAG342誘導的抗體滴度在第8周達到了180000，顯著高于AEAG342組。同時，EAAG342組的抗HAV抗體滴度達到了17000，也高于AEAG342組。本研究的結果說明了嵌合VLPEAAG342可以誘導良好的抗HAV和HEV免疫反應。此外，嵌入的HAVP1片斷可以增強VLP的免疫原性，同時VLP也賦予了HAVVP1良好免疫原性。

簡介：目的應用RNAIRNAINTERFERENCE技術探討靶向Α13半乳糖基轉移酶Α13GT的SHRNA重組慢病毒載體抑制小鼠血管內皮細胞Α13GT和Α13半乳糖殘基GALΑ13GAL表達的可行性。方法采用組織植塊法體外培養(yǎng)小鼠血管內皮細胞；經體外設計合成針對Α13GTMRNA的序列特異性SHRNA并構建攜帶Α13GTSHRNA的重組慢病毒載體，以慢病毒感染小鼠血管瘤內皮細胞系EOMA；熒光實時定量PCR檢測轉染后Α13GTMRNA表達水平的變化，免疫熒光檢測異種抗原GALΑ13GAL表達水平的變化；使用SPSS130FWINDOWS進行數據分析。結果體外組織植塊培養(yǎng)可獲得純度較高的小鼠血管內皮細胞；成功構建了重組慢病毒載體質粒。經病毒包裝后，得到了攜帶Α13GTSHRNA的成熟的重組慢病毒顆粒；熒光實時定量PCR檢測顯示構建的重組慢病毒轉染EOMA，能抑制Α13GT的表達，抑制率約為88％P005；免疫熒光檢測顯示Α13GTSHRNA重組慢病毒轉染后細胞GALΑ13GAL抗原水平較對照組明顯降低P005。結論通過組織植塊法可實現小鼠血管內皮細胞的原代培養(yǎng)并傳代，但傳代的次數有限；本實驗成功構建了靶向Α13GT基因的重組慢病毒載體，并利用該慢病毒載體成功地將Α13GTSHRNA表達框架轉導入EOMA細胞，使其持續(xù)表達，實現了靶向Α13GT基因的RNA干擾。重組慢病毒載體有效地抑制了Α13GTMRNA，并且抑制了其所催化的蛋白GALΑ13GAL的表達。通過實驗，初步說明慢病毒載體介導的RNAI技術對沉默Α13GT基因從而下調異種抗原GALΑ13GAL表達的策略是可行的。從而為進一步研究利用RNAI技術減輕異種移植超急性排斥反應提供了實驗依據。

簡介：溫州醫(yī)學院碩士學位論文皮膚惡性黑素瘤與人乳頭瘤病毒感染的相關性研究姓名高宇申請學位級別碩士專業(yè)皮膚性病學指導教師吳式琇20080501溫州醫(yī)學院碩上學位論文超過3年者26例，3年內病死者39例，HPV表達陽性率分別為28．21％11／39和7．69％2／26經X2檢驗差異有統(tǒng)計學意義PO．05。以生存時間分類變量為應變量，以年齡、性別、病灶直徑、CLARK病理分級、病程進展狀況為協變量作LOGISTIC回歸分析，P病程進展狀況0．06，P咿VO．04，B咿、R2．24，B病程進展概O．997，皮膚惡性黑素瘤細胞HPV表達有減少患者長期生存的危險，病程進展狀況有影響患者長期生存的趨勢。結論HPV感染可能與皮膚惡性黑素瘤的發(fā)病有一定關系，且HPV陽性者可能影響皮膚惡性黑素瘤患者長期生存。關鍵詞惡性黑素瘤人乳頭瘤病毒預后

簡介：目的艾滋病是一種嚴重危害人類生命健康的致死性慢性傳染病，雖然至今還沒有有效的疫苗，但大量研究證實CD8T細胞介導的CTL應答在疾病的控制過程中起了重要作用。急性期CTL應答的出現伴隨著病毒載量的明顯下降，并在很大程度上決定著病毒調定點水平的高低。近年來，男男同性MENWHOHAVESEXWITHMEN，MSM傳播方式增長迅速，同時基于人群水平的分子流行病學研究表明，在中國MSM感染者中CRF01AE亞型已經成為主要流行亞型。雖然關于歐美及高加索人群中流行的B、C亞型病毒的CTL應答已經有了廣泛而深入的研究，但不同病毒亞型及不同感染人群CTL應答特征及控制疾病的方式不盡相同，中國男同人群中CRF01AE亞型CTL應答特征及控制疾病的方式尚不清楚，針對我國男同人群CTL疫苗的研究仍缺乏基礎資料的支持，因此急需對這部分人群進行急性期CTL應答的研究，以明確中國男同人群中CRF01AE亞型CTL應答特征，同時探索與疾病控制相關的因素。我們在前期研究的基礎上設計合成了CRF01_AE亞型傳播簇特異性的GAG、POL、NEF區(qū)段的重疊肽段及部分HLA型別限制的最佳表位，對15例CRF01AE亞型HIV1急性感染者進行動態(tài)CTL應答的研究，同時獲得了動態(tài)GAG克隆序列，我們發(fā)現在CRF01AE亞型的MSM感染者中，針對GAG區(qū)段表位產生持續(xù)的免疫顯性應答可以有效控制病毒，為基于中國CRF01AE亞型MSM患者的疫苗設計提供了理論基礎。材料和方法1、研究對象從2008年開始對遼寧大規(guī)模MSM高危人群隊列進行定期隨訪并進行血清學ELISA篩查實驗和WESTERNBLOT確認實驗，對血清學陰性者進行集合核酸檢測，滿足以下一項或多項者1）在3個月內HIV抗體開始變陽性者2）HIV抗體陰性但HIVRNA陽性者3）HIV抗體弱陽性但在兩周之內可以重復并OD值較前次升高者4）WB抗體檢測少于4條蛋白條帶者，認定為新發(fā)感染者。HIV新發(fā)感染者感染時間的估計方法為患者核酸檢測陽性前14天作為HIV感染時間，初篩陽性患者以此次陽性與末次陰性的中間時間作為HIV感染時間，有可靠高危性行為史的患者結合高危行為史判定。本研究共對15例新發(fā)感染者感染3個月點和1年點PBMC和血漿樣本進行縱向研究。2、肽段合成根據前期獲得的50余條遼寧新發(fā)CRF01_AE亞型第二簇的全長序列，利用BIOEDIT軟件合成共享氨基酸序列，然后用HIVDATABASE中PEPTGENPEPTIDEGENERAT軟件生成長度為1718MER，10個氨基酸OVERLAP的GAG、POL、NEF的重疊肽段，合成CRF01AE亞型第二簇肽段（SIGMAALDRICH，美國）。同時合成了中國人群中較為常見的HLAⅠ類等位基因A02、A11、A24、B13、B40、B51限制的已發(fā)表的最佳表位，及具有明確保護性作用的B27限制的KK10表位，所有表位均按照CRF01AE亞型中序列進行合成。3、ELISPOT肽庫篩查及單肽確認采用1416的二維矩陣肽庫對GAG、POL、NEF區(qū)段肽段進行篩查，肽段反應終濃度為5ΜGML，每孔加入01MILLION細胞。陽性判斷標準為大于50SFC106PBMC同時大于3倍陰性對照平均值。同時將篩查的肽庫進行拆解，進行單肽確認實驗。實驗操作同上述ELISPOT篩查實驗。反應結果的計算及陽性判斷標準也與篩查實驗相同。4、ELISPOT最佳表位實驗對具有HLAⅠ類等位基因A02、A11、A24、B13、B27、B40、B51的個體，將相應HLA型別限制的最佳表位進行ELISPOT實驗，實驗操作同上述篩查實驗。反應結果的計算及陽性判斷標準也與篩查實驗相同。5、DNA提取外周血DNA的提取，使用1MLEDTA抗凝外周靜脈血，采用QIAAMPDNAMINI試劑盒，按照試劑盒說明書標準方法快速提取全基因組DNA200ΜL。將純化后的DNA置20℃保存?zhèn)溆谩?、HLA等位基因分型檢測HLA分型采用PCRSSP方法，采用ONELAMDA公司的MICROSSPTM試劑盒。7、GAG克隆1HIV1基因組RNA提取病毒基因組RNA使用QIAAMPVIRALRNAMINIKITQIAGEN，GERMAN按操作說明從血漿標本提取基因組RNA，80℃保存?zhèn)溆谩?NESTEDPCRGAG基因擴增及TA克隆測序采用TAKARAONESTEPRNAPCRKITAMV擴增GAG全長。第一輪外側引物172A5ATCTCTAGCAGTGGCGCCCGAACAG3628648NTOFHIV1HXB2和GAG65TAATGCTTTTATTTTYTCTTCTGTCAATGGC326512621NTOFHIV1HXB2，第二輪內側GAG7635TGACTAGCGGAGGCTAGAAGG3763783NTOFHIV1HXB2和GAG55TTCCYCCTATCATTTTTGGTTTCC323772400NTOFHIV1HXB2。擴增條件第一輪50℃，30MIN94℃變性5MIN94℃30S，50℃30S，72℃2MIN3個循環(huán)94℃30S，55℃30S，72℃2MIN32個循環(huán)72℃延伸10MIN4℃保溫。第二輪94℃變性5MIN94℃30S，55℃30S，72℃2MIN30個循環(huán)72℃延伸10MIN4℃保溫。1％瓊脂糖凝膠電泳后，對比MARKER切下1600BP陽性片段，QIAGEN膠純化試劑盒按照操作說明純化回收目的基因片段。純化產物以40UL去離子水洗脫。將其連接入TOPO載體克隆后獲得每一個患者的GAG序列，并進行測序分析。8、統(tǒng)計學分析應用SPSS170進行統(tǒng)計學分析，采用應用MANNWHITNEYUTEST檢驗對CD4計數、病毒載量、SETPOINT進行分析，P＜005認為有統(tǒng)計學差異。結果1、15例樣本基本臨床信息本研究共納入15例新發(fā)感染者，均為MSM感染者，且均為CRF01_AE亞型第二簇。在感染1年點時平均CD4計數和病毒載量較3個月點時均有所下降，但均無統(tǒng)計學差異P＞005。15例患者中A02、B15、B13、C03等位基因頻率較高。2、3個月點和1年點CTL應答的特征通過分析15例患者感染3個月點和1年點不同蛋白的應答頻率發(fā)現，各區(qū)段蛋白在3個月點的應答頻率整體低于1年點時的應答頻率，其中P17、P24、RT和NEF區(qū)在3個月點和1年點應答頻率均較高，在3個月點這4個區(qū)段應答頻率均大于40％，在1年點應答頻率均大于65％，而P15、GPTF、PR和IN區(qū)應答頻率相對較低，在3個月點及1年點應答頻率均小于30％。通過強度分析發(fā)現，各區(qū)段蛋白在3個月點的平均應答強度同樣整體弱于1年點時的平均應答強度，P24、RT和NEF區(qū)在3個月點和1年點平均應答強度均較強，在3個月點這3個蛋白區(qū)段平均應答強度均大于600SFU106PBMC，在1年點平均應答強度均大于1200SFU106PBMC，而P15、GPTF、PR和IN區(qū)應答強度相對較弱，在3個月點和1年點平均應答強度均小于200SFU106PBMC。3、不同個體呈現不同的免疫顯性應答模式結合單肽確認信息、最佳表位反應信息、GAG克隆序列對3個月點和1年點樣本進行縱向分析，發(fā)現不同患者呈現不同的免疫顯性應答模式。按照不同的免疫顯性應答模式，15例患者可以分成2個組。第一個組為在3個月點和1年點均針對同一區(qū)段表位產生免疫顯性應答的患者，其中320009、320669、320016和3250204例患者均呈現持續(xù)的GAG區(qū)段表位的免疫顯性應答，這4例患者SETPOINT均較低＜36COPIESML，320353和4401052例患者均呈現持續(xù)的POL區(qū)表位的免疫顯性應答，這2例患者的SETPOINT分別為430COPIESML和461COPIESML，320088、320018、440020、3209754例患者均呈現持續(xù)的NEF區(qū)段表位的免疫顯性應答，這4例患者SETPOINT較高＞44COPIESML，其中320018、440020、3209753例患者SETPOINT均＞5COPIESML。第二組為在3個月點和1年點針對不同區(qū)段表位呈現免疫顯性應答的患者，其中320135和3211372例患者均在3個月點針對GAG區(qū)段表位呈現免疫顯性應答，在1年點時GAG區(qū)段表位應答強度下降，同時產生針對NEF區(qū)段表位免疫顯性應答。320842和3004302例患者均在3個月點針對POL區(qū)表位呈現免疫顯性應答，而在1年點時均針對GAG區(qū)段表位產生免疫顯性應答。320019患者在3個月點針對NEF區(qū)段表位產生免疫顯性應答，在1年點時針對NEF區(qū)段表位應答強度下降，同時產生針對GAG區(qū)段表位免疫顯性應答。在這5例患者中，320135患者SETPOINT為375COPIESML，其余4例患者SETPOINT在429462COPIESML之間。4、持續(xù)的GAG區(qū)段表位的免疫顯性應答可以有效控制病毒通過對不同個體免疫顯性應答模式及動態(tài)變化分析發(fā)現，有持續(xù)GAG區(qū)段免疫顯性應答的個體其SETPOINT要顯著低于無持續(xù)GAG區(qū)段免疫顯性應答的個體P0001，有持續(xù)NEF區(qū)段免疫顯性應答的個體其SETPOINT要顯著高于無持續(xù)NEF區(qū)段免疫顯性應答的個體P0018，而有無持續(xù)POL區(qū)段免疫顯性應答的個體其SETPOINT無顯著差異P08。5、GAG區(qū)段表位免疫顯性應答驅動病毒變異通過分析6例在3個月點針對GAG區(qū)段表位產生免疫顯性應答的患者其免疫顯性表位序列縱向的變異情況發(fā)現，6例患者在3個月點均針對不同的GAG區(qū)段表位產生免疫顯性應答，其中僅有320669患者針對的B27限制的KRWIILGLNKKK10GAG263272表位在1年點時仍呈現免疫顯性應答，其余5例患者在3個月點時呈現免疫顯性應答的表位在1年點時雖仍有應答但均不是免疫顯性應答。序列分析發(fā)現，僅有320669患者針對的B27限制的KRWIILGLNKKK10GAG263272表位和320135患者針對的B13限制的GQMREPRGSDIGI11GAG226236表位序列未發(fā)生變異，其余4例患者在1年點時免疫顯性表位序列均發(fā)生了較大程度的變異≥50％。同時320135患者針對的B13限制的GQMREPRGSDIGI11GAG226236表位序列雖未發(fā)生變異，但表位側區(qū)序列在1年點時發(fā)生了V210A的變異，提示GAG區(qū)段表位免疫顯性應答會對病毒造成較強的免疫壓力。結論1、在CRF01_AE亞型中GAG、POL、NEF區(qū)段蛋白在3個月點的應答頻率和應答強度整體均低于1年點時的應答頻率和應答強度。P24、RT和NEF區(qū)在3個月點和1年點應答頻率和強度均較高。2、CRF01_AE亞型MSM人群中持續(xù)的GAG區(qū)段表位免疫顯性應答與低SETPOINT相關，可以較好控制病毒持續(xù)的NEF區(qū)段表位免疫顯性應答與高SETPOINT相關，不能控制病毒復制。

簡介：東南大學碩士學位論文女性性激素、腦源性神經營養(yǎng)因子與認知功能的關系姓名王艷申請學位級別碩士專業(yè)婦產科學指導教師任慕蘭20090602東南大學碩士學位論文無統(tǒng)計學意義FFO05。⑤相關性分析62例圍絕經期及絕經后女性中，血清BDNF水平與血清E2水平有相關性RO303，PO017，而與血清T水平無相關性RO154，0232，與血清FSH水平無相關性嚴0138，盧0286；生育年齡對照組16例中，血清BDNF水平與血清E2水平有相關性RO527，PO036，而與血清T水平無相關性RO312P0240，與血清FSH水平無相關性嚴一0312，盧0240；絕經后組女性中，血清BDNF與絕經年限無明顯相關性產0004，尸0978。2與認知功能正常組比較，認知功能障礙組女性血清E2，T水平明顯下降P依次為0025，0038，差異有統(tǒng)計學意義，而FSH、BDNF差異無統(tǒng)計學意義尸005。結論1①圍絕經期女性卵巢功能下降，在圍絕經期血清T水平的變化早于E2水平的變化，血清T水平的變化有望作為預測卵巢功能下降的早期指標之一。②女性體內BDNF水平與內源性E2水平密切相關。⑨圍絕經期及絕經后女性體內BDNF水平顯著下降，而BDNF水平與絕經年限無關，提示對于認知功能的保護，性激素治療的最佳時機選擇似乎應該在絕經過渡期或更早。2絕經后女性認知功能的下降可能與內源性E2、T水平下降有關。關鍵詞性激素；腦源性神經營養(yǎng)因子；認知功能；絕經；圍絕經期Ⅱ

簡介：乙型肝炎病毒HEPATITISBVIRUS，HBV感染可引起慢性肝炎、肝硬化、甚至肝癌嚴重危害人類健康，是醫(yī)學界多年來致力攻關的一個難題。Α干擾素INTERFERONALPHA，IFNΑ是目前少數臨床治療乙型肝炎有效的藥物之一，但對其抗病毒機制尚未完全明了。本室前期研究結果表明，IFNΑ誘生的髓樣細胞分化蛋白MYD88可發(fā)揮抗HBV復制的作用，可導致細胞總成分和胞漿中的HBVRNA水平顯著下調，提示在轉錄后水平調控HBV的復制。目前已知，MYD88蛋白是TOLL樣受體、白介素1受體、白介素18受體介導的信號通路中的關鍵分子，可通過信號級聯最終引起核因子KAPPABNUCLEARFACTKAPPAB，NFΚB依賴性信號通路的活化。已有研究表明，部分細胞因子以及干擾素誘生的抗病毒蛋白可在轉錄后水平調控HBV的基因復制和表達，機理涉及對HBVRNA核外運輸以及穩(wěn)定性調節(jié)等環(huán)節(jié)，但尚不清楚IFNΑ誘生的MYD88蛋白是否以同類機制在轉錄后水平抑制HBV的基因復制。本課題擬從細胞信號轉導以及轉錄后水平調控兩方面探討MYD88蛋白抑制HBV復制的分子機制。為探討MYD88蛋白介導的NFΚB信號系統(tǒng)活化在抗HBV效應中的作用，首先構建了MYD88的截短突變體，然后與HBV復制型質粒瞬時轉染HUH7細胞，研究它們對HBV復制的影響。結果證實，MYD88全長蛋白、及其兩個截短突變體M1151、M151296活化NFΚB的程度不同，并與抑制HBV蛋白以及復制中間體DNA合成的水平相一致，提示MYD88蛋白抑制HBV復制的效應與MYD88激活NFΚB信號通路相關。進一步以NFΚB的超抑制劑SUPERREPRESSIKBASR抑制NFΚB信號通路，研究NFΚB信號通路在MYD88拮抗HBV效應中的作用。結果顯示，與空載相比，單獨轉染MYD88和HBV的細胞中HBVCE蛋白的合成顯著降低；而當加入IΚBΑSR共同瞬轉后細胞中CE蛋白的表達量顯著增加。檢測HBEAG和HBSAG以及HBV復制中間體DNA，得到相似結果，上述結果提示MYD88蛋白抑制HBV復制的效應依賴于NFΚB信號通路的活化。進一步將HBV的復制型質粒與NFΚB信號通路激活劑IKKΑIKKΒ表達質粒共轉染HUH7細胞，結果發(fā)現IKKΑIKKΒ在細胞內過表達后可顯著降低細胞培養(yǎng)上清中HBEAG和HBSAG和復制中間體DNA的合成，并呈劑量依賴關系。同時將HBV復制型質粒和IKKΑIKKΒ、MYD88、IΚBΑSR分別或共同轉染后檢測HBVRNA的水平。結果發(fā)現，轉染IKKΑIKKΒ或MYD88均可抑制HBV在細胞內的轉錄；而IΚBΑSR轉染細胞中HBVRNA轉錄體水平則上調。以上結果提示，NFΚB信號通路的活化在MYD88蛋白抑制HBV復制中發(fā)揮了關鍵作用。此外，為排除P38MAPK或ERK12活化在MYD88蛋白抑制HBV復制中的作用，在MYD88與HBV復制型質粒瞬時轉染HUH7細胞時加入SB20538或PD98059以抑制P38MAPK或ERK12的活化。結果發(fā)現，MYD88蛋白抑制HBV的效應在抑制劑處理組與非處理組間無顯著差異，提示MYD88蛋白調控HBV復制不依賴P38和ERK12信號通路的活化。為進一步探討MYD88蛋白在轉錄后水平調控HBV復制的機理。首先采用HBV啟動子控制下的報告基因，檢測MYD88蛋白對HBV啟動子的活性的影響，結果發(fā)現MYD88蛋白對HBV啟動子活性無顯著影響，排除了MYD88蛋白通過調節(jié)乙肝病毒啟動子活性抑制HBV轉錄激活的可能性。進一步在HUH7細胞中瞬時轉染HBV復制型質粒和MYD88表達質粒，分離細胞核與細胞漿中的HBVRNA，用RNASLOT和REALTIMEPCR分析HBVRNA在兩者中的分布。結果顯示，表達MYD88蛋白可同時下調細胞核與細胞漿中HBVMRNA的水平，但HBVRNA的核漿比值增加了了2～3倍，提示MYD88蛋白有可能通過改變HBVRNA的核、漿分布比例從而影響HBV的基因復制。進一步利用轉錄后調節(jié)元件PREPOSTTRANIONALREGULATEELEMENT調控下的氯霉素乙酰轉移酶CAT報道系統(tǒng)分析MYD88蛋白將HBVRNA滯留于細胞核內的可能機理。結果發(fā)現，MYD88穩(wěn)定表達細胞株中報道基因CAT的表達水平顯著降低；在HUH7細胞中采用瞬時轉染的方式也證明MYD88蛋白可特異性地抑制報道基因的表達，提示MYD88蛋白影響PRE序列介導的HBVMRNA的核外運輸過程。另外，進一步對細胞轉染MYD88后HBVRNA的半衰期檢測發(fā)現，MYD88蛋白可降低HBVRNA的穩(wěn)定性。以上研究結果提示，MYD88蛋白可能通過影響PRE序列介導的HBVMRNA的核外運輸過程、降低HBVRNA的穩(wěn)定性來調控HBV的復制。綜上所述，在本室前期研究發(fā)現IFNΑ誘生的髓樣細胞分化蛋白MYD88可發(fā)揮抗HBV復制作用的基礎上，本研究進一步證實NFΚB信號通路的活化在MYD88蛋白抑制HBV復制中發(fā)揮了關鍵作用，而MYD88蛋白可能通過影響PRE序列介導的HBVMRNA的核外運輸過程、降低HBVRNA的穩(wěn)定性來調控HBV的復制。以上發(fā)現豐富了對干擾素誘生的MYD88蛋白抑制HBV復制機理的認識。從多角度深入探討MYD88蛋白調控HBV復制的分子機制，可有利于加深對細胞信號轉導機制以及細胞基因功能等的認識，揭示病毒和宿主細胞相互作用的分子機理，并可為臨床治療及研制新型抗HBV藥物提供理論依據和實驗基礎。

簡介：碩士學位論文學校代碼10023學號2012007005小鼠羊膜干細胞改善APPSWE／PSIAE9雙轉基因小鼠認知功能的研究所院醫(yī)學實驗動物研究所姓名曲春輝指導教師秦川導師小組秦川張連峰魏強學科專業(yè)病理學與病理生理學研究方向神經退行性疾病機制的研究完成日期二零一五年四月中國醫(yī)學科學院北京協和醫(yī)學院碩士學位論文14主要抗體3315主要試劑配制方法342實驗方法3721轉基因動物的鑒定3722ADSCS移植3923行為學檢測4024小鼠腦組織取材4125腦組織海馬蛋白提取、濃度鑒定4126免疫組織化學及硫黃素S熒光染色4227ELISA檢測AB含量4428WESTERNBLOTTING實驗步驟4429統(tǒng)計方法46結果471APPSWE／PSL△E9小鼠基因型的鑒定472BDNF在6月齡AD模型小鼠和WT小鼠海馬內分泌情況473ADSCS移植并在腦內存活484，行為學檢測小鼠空間學習記憶能力和自主活動及焦慮狀態(tài)情況495檢測腦組織海馬內膠質細胞激活情況5L6腦組織海馬內BDNF、SYNAPTOPHYSIN蛋白水平變化537腦組織內APP、A42、A阻0及PTAUTHR231蛋白水平變化548ADSCS移植后小鼠腦內APPSWE伊SL△E9小鼠腦內老年斑沉積情況559ADSCS移植后對小鼠腦形態(tài)和結構的影響5510ADSCS移植后對小鼠腦內神經元的影響56討J滄58小結63全文總結64參考文獻65縮略詞語72個人簡介及發(fā)表文章一742

簡介：點擊查看更多認知性情緒調節(jié)問卷中文版（CERQ-C）的信效度研究.pdf精彩內容。

簡介：第一部分PLB基因反義RNA腺相關病毒載體的構建及其對培養(yǎng)的大鼠心肌細胞的作用結論1利用AAVHELPERFREESYSTEM成功構建重組腺相關病毒RAAVASPLB和RAAVLACZ2重組腺相關病毒不影響細胞活力能安全有效地感染培養(yǎng)的心肌細胞3RAAVASPLB對培養(yǎng)的大鼠心肌細胞PLBMRNA和蛋白質表達具有抑制作用增強肌漿網CAATPASE活性降低靜息狀態(tài)的CAI增加異丙腎上腺素刺激后CAI的變化幅度第二部分RAAVASPLB改善糖尿病大鼠心肌肌漿網CAATPASE活性和左心功能結論1、腹腔注射STZ能夠誘導出糖尿病大鼠模型糖尿病組和鹽水組的糖尿病大鼠較正常大鼠心功能降低PLBMRNA轉錄和蛋白表達水平升高肌漿網CAATPASE活性降低2、心肌注射RAAVASPLB后治療組大鼠的心功能雖然在靜息時未能恢復正常但是較糖尿病組和鹽水組明顯升高并且對異丙腎上腺素的刺激反應提高心臟儲務增加心功能得到改善3、心肌注射RAAVASPLB后隨著心功能的改善治療組大鼠心肌的PLBMRNA轉錄和蛋白表達水平降低肌漿網CAATPASE活性提高4、RAAVASPLB用作糖尿病心肌病所致心力衰竭基因治療有一定的效果但是仍需要進一步研究