簡介：四川大學博士學位論文水泡口炎病毒（VSV）基質(zhì)蛋白（M）抗腫瘤作用研究姓名趙菊梅申請學位級別博士專業(yè)腫瘤學指導(dǎo)教師魏于全200604012006年四川大學博士學位論文水皰口炎病毒VSV基質(zhì)蛋白M抗腫瘤作用研究水泡口炎病毒VSV基質(zhì)蛋白M抗腫瘤作用研究研究生趙菊梅導(dǎo)師魏于全教授中文摘要水泡口炎病毒VESICULARSTOMALJTISVJFUS，VSV是彈狀病毒科的原型病毒，為有包膜的負鏈RNA病毒。由于它可以在腫瘤細胞中選擇性復(fù)制而被用于腫瘤治療，在多種腫瘤模型中都表現(xiàn)出明顯的抗腫瘤作用，因此VSV是一種較有前途的溶瘤病毒。但可復(fù)制的溶瘤病毒應(yīng)用于腫瘤臨床治療始終存在著安全隱患，因此有必要探尋更為安全的利用病毒治療腫瘤的方法。文獻報道，在VSV病毒編碼的五種蛋白中基質(zhì)MATRIXPROTEIN，M蛋白在VSV誘導(dǎo)的細胞病變中起著重要的作用，如引起細胞變圓和細胞凋亡，而且在沒有VSV其他蛋白成分存在的情況下M蛋白仍然可以引起細胞這些特征性病變?；贔蟹白的這一重要功能，同時為了避免復(fù)制完全型病毒在臨床治療中可能面L臨的諸多問題，我們設(shè)想將VSV病毒的功能基因一M蛋白基因用于腫瘤的基因治療研究中，通過其誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡，從而達到抗腫瘤效應(yīng)。同時M蛋白基因?qū)霗C體后表達的M蛋白又可以激發(fā)機體的抗腫瘤免疫反應(yīng)，從而使M蛋白的抗腫瘤作用增強。為了探討這一假設(shè)，我們構(gòu)建了含有VSVM蛋白基因的真核表達質(zhì)粒PCDNA31一M，簡稱為PM，經(jīng)酶切、RTPER測序鑒定M基因插

簡介：第三軍醫(yī)大學碩士學位論文基于特異性表位的1型單純皰疹病毒免疫學診斷方法建立與初步應(yīng)用研究姓名姬小薇申請學位級別碩士專業(yè)臨床檢驗診斷學指導(dǎo)教師毛旭虎20061101第三軍醫(yī)大學碩士學位論文4以純化的8GGLL2127作為包被抗原建立并優(yōu)化了檢測HSV1感染的間接ELISA抗原的最佳包被濃度為5UG／ML；抗原最佳吸附方式為37℃，4H后轉(zhuǎn)4℃過夜；待檢血清稀釋度為L40；反應(yīng)條件為37℃溫育60MIN；5％脫脂奶粉作封閉液。以上述條件建立的ELISA對35份HSV1感染的陽性血清和43份陰性血清進行檢測，其敏感度為914％；特異度為976％；陽性預(yù)測值為969％；陰性預(yù)測值為933％；準確度為948％。同樣，以此法對6份血清進行批間、批內(nèi)三次重復(fù)性實驗，顯示其重復(fù)性良好。用本研究建立的ELISA方法與進口ELISA試劑盒同時對臨床收集的100份待檢血清進行檢測，結(jié)果一致性為98％。結(jié)論GGLL2127是HSV1型特異性抗原表位，本研究成功表達并獲得了8GGLL2127的重組蛋白，此蛋白具有良好的抗原性和特異的免疫反應(yīng)性，以重組蛋白建立的檢測HSV1感染的間接ELISA方法，初步應(yīng)用表明有良好的特異性和一定的靈敏性。本研究為研發(fā)HSV感染鑒別診斷的血清學檢測試劑盒奠定了理論和實踐基礎(chǔ)。關(guān)鍵詞單純皰疹病毒1型；型特異性表位；G蛋白；酶聯(lián)免疫吸附實驗6

簡介：研究背景乙型肝炎病毒HEPATITISBVIRUS，HBV感染是我國乃至全球范圍內(nèi)的重大公共衛(wèi)生問題，全世界約有35億至4億的慢性HBV感染者。我國是全世界HBV感染人數(shù)最多的國家，感染人數(shù)約為9300萬。HBV慢性感染可能導(dǎo)致慢性肝損害、肝硬化（LIVERCIRRHOSIS，LC）、肝細胞癌HEPATOCELLULARCARCINOMA，HCC等嚴重肝臟疾病。目前，由于慢性HBV感染導(dǎo)致的肝衰竭、肝硬化和原發(fā)性肝癌所引起的死亡人數(shù)約為100萬年。雖然慢性乙肝病毒感染是影響人類生活質(zhì)量，危害人類健康的重要危險因素，各國家對HBV致病性研究也投入了大量人力財力，但其致病機制仍不明確，治療手段仍不理想。HBV核心啟動子區(qū)ENHANCERⅡBCPPCREGION及前S區(qū)PRESREGION的核苷酸突變是慢乙肝患者進展為慢性肝損害、肝硬化、肝癌的可能原因之一，同時血清中病毒載量高、乙肝病毒C基因型及血清E抗原陽性等人體血清學特征也可能顯著增加終末期肝病的患病風險。我國乙肝病毒攜帶者多，可能說明我國居民的宿主遺傳因素與乙肝病毒感染風險關(guān)系密切我國乙肝患者分布地區(qū)有差異，可能說明環(huán)境因素在病毒感染過程中發(fā)揮重要作用。HLADQ屬于人類白細胞抗原HUMANLEUKOCYTECELL，HLAⅡ類分子，負責細胞外抗原遞呈，是參與機體免疫防御和調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答的重要分子。由于乙肝病毒慢性感染可激活感染者機體免疫系統(tǒng)，引起非可控性炎癥，而病毒本身又在機體免疫選擇的壓力下產(chǎn)生適應(yīng)性進化，進一步加劇炎癥反應(yīng)甚至促進細胞惡變，因此研究HLADQ遺傳多態(tài)性、乙肝病毒突變及二者在乙肝病毒相關(guān)肝病中的相互作用，對明確乙肝病毒在體內(nèi)清除或慢性化的致病機制具有重大意義。研究目的分析HLADQ兩個位點RS2856718、RS9275319的單核苷酸多態(tài)性（SINGLENUCLEOTIDEPOLYMPHISM，SNP）是否影響乙肝病毒清除、乙肝病毒慢性感染、乙肝后肝硬化及肝癌的發(fā)生分析HLADQSNP基因型分布及性別分布是否與HBV突變頻率相關(guān)，以及HLADQ基因型及乙肝病毒突變的交互作用是否影響乙肝后肝硬化、肝癌的發(fā)生發(fā)展。研究方法本研究共納入1342例健康者、327例乙肝病毒自然清除者、611例無癥狀乙肝表面抗原攜帶者、1144例慢性乙型肝炎患者、734例乙肝后肝硬化患者以及1531例乙肝后肝癌患者。采用熒光探針實時定量PCR法對HLADQ兩個位點進行單核苷酸多態(tài)性分型采用巢式PCR法擴增HBV基因組的ENHⅡBCPPC和PRES兩區(qū)并進行核苷酸測序采用MEGA50將樣本HBV序列與野生型序列進行比對以獲得病毒突變采用非條件LOGISTIC回歸分析法分析HLADQ單核苷酸多態(tài)性與HBV相關(guān)疾病的關(guān)系、HLADQ單核苷酸多態(tài)性與病毒突變頻率的關(guān)系，并分析HLADQ單核苷酸多態(tài)性與病毒突變的交互作用對乙肝相關(guān)終末期肝病的影響。研究結(jié)果1、HLADQ基因多態(tài)性與乙肝病毒相關(guān)肝病的關(guān)系1HLADQ基因多態(tài)性與乙肝病毒慢性感染及乙肝病毒清除的關(guān)系由于年齡和性別等因素影響分析結(jié)果，我們在校正年齡和性別因素的基礎(chǔ)上，得出RS2856718和RS9275319的AG基因型及顯性模型AGGG均可顯著降低健康人感染慢性乙肝病毒的風險RS2856718AGA081，95％CI069095，P0009AGGGA08395％CI071096P0015RS9275319AGA06995％CI058083P456105AGGGA07095％CI059084P587105當以乙肝病毒清除者作為對照時，未發(fā)現(xiàn)RS2856718與乙肝病毒慢性感染的關(guān)系，而RS9275319的AG基因型及顯性模型AGGG能顯著增加乙肝病毒的清除，降低乙肝病毒的慢性感染AGA063，95％CI047085，P0003AGGGA065，95％CI048087，P0003。將所有樣本進行基因型及性別分層后，無論是以健康人還是乙肝病毒清除者作對照，RS9275319的AG基因型及顯性模型（AGGG）均可在男性人群及基因型C人群中顯著增加乙肝病毒清除，降低乙肝病毒慢性感染的風險。2HLADQ基因多態(tài)性和乙肝病毒相關(guān)終末期肝病發(fā)生發(fā)展的關(guān)系RS2856718的基因型GG及顯性模型AGGG可顯著增加乙肝病毒慢性感染者進展為肝硬化患者的風險GG152，95％CI117197，P0002AGGG127，95％CI104154，P0017，該位點變異型顯性模型AGGG可顯著降低健康者、乙肝病毒慢性感染者、肝硬化患者發(fā)生乙肝后肝癌的風險。將HBV感染者進行基因型分層，分析結(jié)果顯示在基因型C感染者中，RS2856718G等位基因與肝癌的關(guān)系較基因型B感染者更為明顯進行性別分層后，男性中的分析結(jié)果和在未進行分層的總體人群中結(jié)論一致，而在女性中二者則無相關(guān)性。RS9275319能降低非HBV感染人群的發(fā)病風險AGA068，95％CI057082，P576105AGGGA070，95％CI058084，P949105，但與乙肝病毒相關(guān)肝硬化及肝癌的發(fā)生均無顯著關(guān)聯(lián)。2、HLADQ基因多態(tài)性與乙肝病毒突變頻率的關(guān)系在基因型C感染者中，RS2856718的AG基因型及顯性模型AGGG可顯著增加A1726C（肝硬化危險性、肝癌保護性突變）的突變頻率，RS9275319的GG基因型可顯著增加PRES1啟動子突變的頻率。在基因型B感染者中，未發(fā)現(xiàn)HLADQ基因多態(tài)性和HBV突變頻率存在統(tǒng)計學關(guān)聯(lián)。3、HLADQ基因多態(tài)性與HBV突變的交互作用對乙肝后肝硬化及肝癌發(fā)生發(fā)展的影響1HLADQ基因多態(tài)性和HBV突變的交互作用對乙肝后肝硬化發(fā)生的影響在基因型B感染者中，RS2856718的顯性模型AGGG和G1652A（肝硬化危險性HBV突變）在乙肝后肝硬化的發(fā)展中存在顯著的協(xié)同性交互作用A628，95％CI1143459，P0035，二者的交互作用共同促進肝硬化的發(fā)生在基因型C感染者中，RS2856718的顯性模型AGGG和T1753V（肝硬化危險性HBV突變）存在顯著的拮抗性交互作用（A026，95％CI009078，P0016），二者的共同作用降低了肝硬化的發(fā)生風險。2HLADQ基因多態(tài)性和HBV突變的交互作用在對乙肝后肝癌發(fā)生的影響在基因型C感染者中，RS2856718的AG基因型與C1673T存在顯著的拮抗性交互作用，可增加肝癌的發(fā)生風險A280，95％CI102766，P0045RS2856718的顯性模型AGGG和A1846T（肝癌危險性HBV突變）在肝癌的發(fā)生過程中存在顯著的拮抗性交互作用，降低了肝癌的發(fā)生風險A053，95％CI029098，P0042在基因型B中，RS2856718的顯性基因型AGGG與T1673C（HCC危險性HBV突變）存在協(xié)同性交互作用，可顯著降低肝癌的發(fā)生風險A025，95％CI007093P0039。結(jié)論1、RS2856718突變基因型（AG與AGGG基因型）可降低HBV慢性感染的風險，同時還可增加乙肝后肝硬化發(fā)生風險，降低乙肝后肝癌的發(fā)病風險RS9275319的突變基因（AG與AGGG基因型）可顯著增加乙肝病毒的清除，降低乙肝病毒的慢性感染風險。2、HLADQSNP和乙肝相關(guān)肝病的關(guān)系在HBVC基因型比B基因型明顯，在男性人群中較女性人群中明顯。3、HLADQSNP可影響HBV的核苷酸突變頻率，二者在乙肝后肝硬化及肝癌的發(fā)生中存在復(fù)雜的交互作用。

簡介：目的拉米夫定是抗病毒核苷類藥物對乙型肝炎病毒HBV有明顯的抑制作用但拉米夫定易復(fù)發(fā)和血清轉(zhuǎn)換率低。因此拉米夫定治療乙型肝炎的最大問題是長期治療后產(chǎn)生病毒變異而耐藥和停藥后HBVDNA的反跳。本研究探討拉米夫定治療后乙型肝炎病毒耐藥位點出現(xiàn)的變化規(guī)律分析其發(fā)生機制對進一步治療方案的確定、分析YMDD變異對治療效果的影響具有重要臨床價值。方法選擇應(yīng)用拉米夫定治療的患者14例常規(guī)離心后收集外周血清定量PCR擴增純化后通過雙脫氧測序的方法獲得HBVDNA序列最后通過計算機MCLONE軟件進行分析動態(tài)觀測不同耐藥時段HBVDNA變異位點發(fā)生規(guī)律。結(jié)果應(yīng)用拉米夫定的患者隨著使用時間的延長HBVDNA水平逐漸轉(zhuǎn)陽經(jīng)過測序發(fā)現(xiàn)大部分的患者都出現(xiàn)YMDD變異其中有11例為YVDD變異而3例出現(xiàn)YIDD變異。隨著用藥時間的進一步延長部分患者出現(xiàn)ALT反彈進行第2次測序中發(fā)現(xiàn)在原有YMDD變異基礎(chǔ)之上又出現(xiàn)許多新的變異位點主要發(fā)生位點有A181VT184SA181TS202IA181TS202IA181TV214T184SV214AA181VT184ST184SS202IA181VQ215SA181VT184SV214AA181TA181SV214AS202TS239CC304S等變異株的發(fā)生變異位點集中于181位點與214位點之間。結(jié)論拉米夫定耐藥株以YMDD基序214位點為基礎(chǔ)在經(jīng)過第二次選擇以氨基酸181位點和214位點為中心BC和D區(qū)建立具有致病能力的病毒株上述位點可能與拉米夫定作用HBVDNA聚合酶的位置有關(guān)。隨著治療時間的延長患者存在不同程度的生物化學突破表現(xiàn)為不同程度的ALT的升高。

簡介：第二軍醫(yī)大學博士學位論文促紅細胞生成素對血管性癡呆大鼠認知功能影響的實驗研究姓名黃樹其申請學位級別博士專業(yè)神經(jīng)病學指導(dǎo)教師邵福源20050401第二軍醫(yī)大學博士論文摘要【摘要】目的建立血管性癡呆VAD大鼠模型和原代海馬神經(jīng)元低氧培養(yǎng)模型，研究促紅細胞生成素對VAD認知功能的影響及其可能機制。方法WISTAR大鼠結(jié)扎雙側(cè)頸總動脈制作VAD動物模型，Y迷宮測試學習記憶能力，觀察大鼠腦組織形態(tài)，采用免疫組織化學和RTPCR的方法檢測大鼠海馬CAL區(qū)膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶CHAT、BAX、BCL2、MAP2及SYN表達的變化；采用WESTERNBLOT方法槍測低氧培養(yǎng)的海馬神經(jīng)元BAX和BCL2蛋白表達變化。結(jié)果VAD大鼠應(yīng)用促紅細胞生成素治療后，Y迷宮作業(yè)成績改善，腦組織損傷減輕，海馬CAL區(qū)凋亡細胞減少，海馬CAL區(qū)BAX表達減少，而CHAT、BCL2、MAP2及SYN的表達增加；EPO干預(yù)可以明顯抑制低氧培養(yǎng)海馬神經(jīng)元BAX蛋白表達，促進BCL一2蛋白表達。且濃度為100IU／ML時呈現(xiàn)最大保護作用。結(jié)論促紅細胞生成素能減輕VAD大鼠腦組織損傷，并改善其認知功能障礙，其機制可能與改善膽堿能系統(tǒng)的功能，抑制神經(jīng)元凋亡及調(diào)節(jié)神經(jīng)突觸的可塑性等有關(guān)。【關(guān)鍵詞】血管性癡呆；促紅細胞生成素；動物模型膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶凋亡；突觸素；微管相關(guān)蛋白2；BCL2；BAXIABSTACT】OBJECTIVETOESTABLISHALLANIMALMODELOFVASCULARDEMENTIAVADANDAMODELOFHIPPOCAMPINEURONPRIMARYCULTUREINHYPOXIA，ANDTOSTUDYTHEEFFECTOFERYTHROPOIETINONCOGNITIONOFVADMETHODSTHEBILATERALCOMMONCAROTIDARTERIESOFWISTARRATSWEREPERMANENTLYLIGATEDTOESTABLISHEDVADMODELSTHESPACIALSTUDYANDMEMORYINYMAZEISOBSERVE，THEMORPHOLOGYOFBRAINSISESTIMATED，ANDTHEEXPRESSIONOFCHAT、BAX、BCL2、MAP2ANDSYNINCA1REGIONOFHIPPOCAMPUSBYIMMUNOHISTOCHEMISTRYANDRTPCRISOBSERVED；THECHANGEOFBCL一2ANDBAXPROTEINEXPRESSIONOFHIPPOEAMPINEURONPRIMARYCULTUREINHYPUXIAWERETESTEDWITHWESTERNBLOTMETHODRESULTSTHERATSTREATEDBYERYTHROPOEITINGROUPHADBETTERPERFORMANCEINYMAZE，LESSNEURONSWITHSERIOUSDAMAGES，LESSNEURONAPOPTOSIS，LOWEREXPRESSIONOFBAXANDHIGHEREXPRESSIONOFCHAT、BCL2、MAP2ANDSYNINCA1REGIONOFHIPPOCAMPUSTHANVADGROUP；EPOCANOBVIOUSLYINHIBITTHEBAXPROTEINEXPRESSIONOFHIPPOCAMPINEURONWHICHWASCULTUREDINHYPOXIAANDOBVIOUSLY

簡介：本文主要研究平滑跟蹤眼動的認知機制，主要包含兩個方面的內(nèi)容。第一，在不同跟蹤目標速度條件下，研究眼睛的跟蹤效果和對呈現(xiàn)在目標外周的刺激的識別效果，探索二者的內(nèi)在聯(lián)系，揭示平滑跟蹤條件下的速度變化與注意分配的關(guān)系；第二，研究平滑跟蹤過程中瞳孔的變化趨勢，解密平滑跟蹤眼動過程中導(dǎo)致瞳孔收獲和擴張的原因。研究結(jié)果表明眼睛的跟蹤效果隨著跟蹤目標速度增大而下降，刺激的識別率也隨著目標速度的增大而降低，而且這兩個參數(shù)在速度為20DEGS和25DEGS之間發(fā)生急劇變化。研究結(jié)果表明，平滑跟蹤眼動的過程中存在水平與垂直方向的各向異性，當速度低于20DEGS時各向異性效果顯著。另外，本研究中水平方向的刺激在跟蹤目標前和跟蹤目標后的識別效果沒有差異，通過仔細研究眼睛滯后和超前跟蹤目標時檢測刺激出現(xiàn)在跟蹤目標前和跟蹤目標后的識別率，我們發(fā)現(xiàn)平滑跟蹤眼動過程中注意分配確實偏好于跟蹤目標的前方，但是由于注意的空間分配參與作用導(dǎo)致了總體目標前和后的識別率沒有差異。根據(jù)跟蹤效果和識別效果的研究結(jié)果表明，20DEGS是研究平滑跟蹤眼動的速度上限。平滑跟蹤眼動的過程中，視覺刺激觸發(fā)眼睛瞳孔使其發(fā)生了兩次急劇的變化。第一次是瞳孔收縮，發(fā)生在跟蹤目標呈現(xiàn)之后；第二次是瞳孔擴張，發(fā)生在識別任務(wù)閃現(xiàn)之后。研究證明第一，瞳孔收縮是由于眼睛搜索到跟蹤目標之后對目標的準確定位導(dǎo)致的；第二，刺激出現(xiàn)后瞳孔的擴張是視覺識別任務(wù)導(dǎo)致的。根據(jù)研究結(jié)果，瞳孔的變化參數(shù)可以用來監(jiān)測平滑跟蹤眼動過程中被試者是否認真執(zhí)行相應(yīng)的視覺任務(wù)。

簡介：復(fù)旦大學博士學位論文SARS冠狀病毒的分子進化研究姓名張原申請學位級別博士專業(yè)生物信息學指導(dǎo)教師鐘揚20071015摘要這兩個數(shù)據(jù)集進行了分支特異性的適應(yīng)性進化檢測。結(jié)果一致表明，S基因在不同物種群體的不同傳播時期都經(jīng)歷了正選擇。為了探索S蛋白受體結(jié)合域結(jié)構(gòu)變異的功能效應(yīng)，我們對它同細胞受體或中和抗體形成的復(fù)合體結(jié)構(gòu)進行了結(jié)構(gòu)生物信息學分析，模擬了受體結(jié)合域變異體和物種特異性的宿主受體之間的相互作用，計算結(jié)果同實驗證據(jù)十分吻合，并且預(yù)測了一系列可能顯著提高復(fù)合體親和力的氨基酸突變用于抗病毒抑制劑研發(fā)設(shè)計，另外，還采用同源建模技術(shù)預(yù)測了蝙蝠源的類SARS冠狀病毒受體結(jié)合域的三維結(jié)構(gòu)，結(jié)果表明它同SARS冠狀病毒的對應(yīng)區(qū)域存在顯著的結(jié)構(gòu)差異，因此我們推測類SARS冠狀病毒可能無法感染人類。此外，我們還討論了進一步的研究方向，指出未來的工作主要包括建立SARS冠狀病毒進化分析服務(wù)器、對SARS冠狀病毒進行模擬進化分析、檢測其它基因的適應(yīng)性進化、以及冠狀病毒物種之間的基因組進化分析等。關(guān)鍵詞SARS冠狀病毒基因組生物信息學分子進化適應(yīng)性進化中圖分類號QLLL．2II

簡介：流感是由流感病毒引起的一種急性呼吸道傳染病，其傳染性強，傳播速度快，容易引起在世界范圍內(nèi)的廣泛流行，是嚴重危害人類健康及社會安全的重要傳染病之一。流感病毒可分為甲A、乙B、丙C三型，其中甲型流感病毒的抗原性較易發(fā)生變異，曾多次引起世界性的流感大流行，導(dǎo)致了大量的人員死亡與巨大的經(jīng)濟損失。目前預(yù)防流感的最主要手段就是接種流感疫苗，傳統(tǒng)的流感疫苗主要以雞胚為生產(chǎn)基質(zhì)，由于生產(chǎn)方法與生產(chǎn)工藝的限制，很難在流感大流行爆發(fā)時，短時間內(nèi)向人群提供足夠的疫苗。而在傳統(tǒng)的流感疫苗中加入安全有效的佐劑，可以增強抗原的免疫原性，顯著降低疫苗的抗原用量，這樣，不但可以保證在流感大流行時人群可以及時的接種流感疫苗，還可以降低疫苗的制造成本。在前期研究工作的基礎(chǔ)上，本課題主要對納米乳佐劑及普洱茶提取物作為流感疫苗佐劑的免疫效果及安全性等進行了相關(guān)研究，從中得到的一些結(jié)果希望能為疫苗佐劑的進一步深入研究和應(yīng)用提供一些思路與依據(jù)。第一部分納米乳作為H3N2流感病毒滅活疫苗佐劑的相關(guān)研究納米乳是一種由油相、水相、表面活性劑、助表面活性劑按適當?shù)谋壤旌辖M成的一種熱力學穩(wěn)定的均相分散體系。由于其對疫苗抗原具有顯著的緩釋作用，能夠誘導(dǎo)高水平抗體的產(chǎn)生，并且能夠引起良好的細胞免疫應(yīng)答，因而將其作為疫苗佐劑的研究展現(xiàn)出了良好的發(fā)展前景。本實驗首先選擇以白油、液體石蠟作為油相，然后通過選取不同的表面活性劑、助表面活性劑與以上兩種油相進行組合，將以上三種組分進行混勻，在不斷攪拌的條件下通過加水滴定法配制納米乳，并通過繪制偽三元相圖，尋找油相、表面活性劑、助表面活性劑之間的最優(yōu)比例，從而配制出穩(wěn)定清透的納米乳劑。本實驗通過篩選，選取了TWEEN20、SPAN80、1，2丙二醇、液體石蠟配方，并按最優(yōu)比例配制出清透乳劑。之后對其理化性質(zhì)進行了相關(guān)檢測。在此之后，將其配制成疫苗免疫小鼠，結(jié)果卻并不理想，含有納米乳佐劑的組，小鼠抗體效價均難以起來，甚至達不到無佐劑疫苗組的效果。之后，對此配方中水相的加入量進行了調(diào)整，在配制方法上做出了調(diào)整，重新進行了動物實驗，并設(shè)置了低抗原劑量組，結(jié)果納米乳佐劑組產(chǎn)生了良好的免疫佐劑效果，其產(chǎn)生的抗體效價均高于鋁佐劑疫苗組，更要遠高于無佐劑疫苗組，在較低抗原劑量的情況下，其產(chǎn)生的免疫效果也要遠高于無佐劑組。脾淋巴細胞增殖實驗顯示納米乳佐劑能夠顯著提高細胞免疫應(yīng)答水平。通過對初免后7天內(nèi)小鼠的體重進行監(jiān)測，未見乳劑組小鼠體重變化與其他組有顯著性差異。納米乳佐劑急性毒性試驗，在最大給藥量條件下各組小鼠7天之內(nèi)全部存活，且未見明顯的毒性反應(yīng)，7天后處死小鼠進行解剖，未見小鼠體內(nèi)各臟器有明顯的病變，因此初步判定此種液體石蠟納米乳佐劑是一種安全有效的疫苗候選佐劑。第二部分普洱茶提取物作為H3N2流感病毒滅活疫苗佐劑的相關(guān)研究普洱茶是原產(chǎn)于我國云南的歷史名茶，具有降血脂、降血壓、預(yù)防心血管疾病等保健功效，特別是其還具有增強機體免疫力的功效。本實驗采用普洱茶提取物作為疫苗佐劑，免疫小鼠，測定血凝抑制抗體效價，結(jié)果顯示，普洱茶提取物佐劑組的抗體效價雖低于氫氧化鋁佐劑組的抗體效價，但是要顯著高于無佐劑疫苗組的抗體效價，重復(fù)驗證試驗結(jié)果證明普洱茶提取物具有明顯的佐劑效果。初免后連續(xù)7天監(jiān)測小鼠體重變化，結(jié)果未見其體重變化與對照組小鼠有明顯差異，初步表明其具有良好的安全性。對實驗組小鼠進行體外脾淋巴細胞增殖反應(yīng)實驗，結(jié)果顯示，普洱茶提取物佐劑組淋巴細胞刺激指數(shù)要顯著高于無佐劑疫苗組，證明其確能有效刺激小鼠脾淋巴細胞的轉(zhuǎn)化增殖。由以上實驗結(jié)果可知，普洱茶提取物作為疫苗佐劑具有良好的安全性，且佐劑效果較為明顯，但是不難看出，普洱茶提取物是一種復(fù)合物，究竟是何種成分起到了免疫增強的作用還有待進一步研究。

簡介：研究目的本課題應(yīng)用不同流感病毒株H5N1、H3N2、H1N1，分別在細胞模型和動物模型觀察其體內(nèi)外抗病毒效果，并為抗病毒機制研究提供依據(jù)。研究方法1體外抗H1N1和H3N2流感病毒作用本實驗采用MDCK細胞培養(yǎng)法進行體外抗流感病毒作用的實驗研究，分先感染病毒后加藥、先加藥后感染病毒兩種方法進行研究，藥物作梯度稀釋，每濃度4個復(fù)孔，同時設(shè)達菲陽性對照組，病毒對照組和正常細胞對照組。37℃、5％CO2，飽和濕度培養(yǎng)72H，每天用倒置顯微鏡觀察細胞病變CPE情況并記錄，據(jù)CPE實驗結(jié)果判斷藥物的作用效果。用REEDMUENEH法計算藥物的半數(shù)有效濃度EC50。以藥物劑量的對數(shù)為橫坐標，以細胞CPE抑制率為縱坐標繪圖。探討不同給藥方式下，其量效關(guān)系曲線走勢，及藥物對流感病毒的抑制作用。2構(gòu)建流感小鼠模型分別構(gòu)建H5N1禽流感、H1N1和H3N2人流感小鼠模型。BALB／E小鼠隨機分組，以乙醚輕度麻醉后，分別滴鼻感染H5N1、H1N1和H3N2流感病毒，每只10ΜL。并按不同的劑量STATIN50ΜGCAFFEINE200ΜG或STATIN25ΜGCAFFEINE200ΜG，不同的給藥方式滴鼻或灌胃、不同的處理方式預(yù)防或治療，觀察藥物在小鼠體內(nèi)的抗流感作用。同時設(shè)陽性對照、病毒對照和空白對照。從感染之日起，連續(xù)觀察14D，觀察小鼠的發(fā)病癥狀。3肺組織病理檢測在H3N2和H1N1流感病毒動物實驗中，在病毒感染后第5天和14天，每組分別處死5只小鼠；在H5N1流感病毒動物實驗中，在病毒感染后第9和13天，每組分別處死5只小鼠。打開胸腔分別取氣管及肺臟，肉眼觀察記錄各組小鼠肺大體病變情況。并按常規(guī)方法做組織切片HE染色，在光學顯微鏡觀察各組動物肺及氣管的病理變化。4熒光定量RTPCR分析用TRIZOL法提取肺組織中的RNA，檢測樣品的A260／280比值在18～20之間，采用實時熒光定量RTPCR方法檢測小鼠肺內(nèi)H3N2、H1N1、H5N1流感病毒核酸的量，探討藥物對流感病毒NP基因復(fù)制的抑制作用。研究結(jié)果1體外抗H1N1流感病毒作用在病毒吸咐前和在病毒吸咐后用藥，STATIN／CAFFEINE在體外均具有抗病毒活性，CAFFEINE、STATIN、STATIN／CAFFEINE、達菲的半數(shù)有效濃度EC50分別為4529／4746UG／ML、1039／1069UG／ML、3023／3056UG／ML和5372／4629UG／ML。且在不同的給藥方式下，其量效關(guān)系曲線走勢比較接近，說明藥物對流感病毒的抑制作用接近。聯(lián)合用藥組STATIN／CAFFEINE在病毒吸咐前用藥的效果優(yōu)于病毒吸咐后用藥。2體外抗H3N2流感病毒作用在病毒吸咐前和病毒吸咐后用藥，STATIN／CAFFEINE在體外均具有較強的抗H3N2流感病毒的作用。CAFFEINE、STATIN、STATIN／CAFFEINE、達菲的半數(shù)有效濃度EC50分別為4572／4676UG／ML、1153／1124UG／ML、3029／3350UG／ML和4836／4537UG／ML。且抑制H3N2流感病毒致細胞病變的作用都隨著藥物劑量的增加而增強，隨藥物濃度增加，其抗病毒活性增強，且聯(lián)合用藥組STATIN／CAFFEINE在病毒吸咐前用藥的效果優(yōu)于病毒吸咐后用藥。3體內(nèi)抗H5NL流感病毒作用H5N1流感動物實驗中，STATIN50ΜG／CAFFEINE200ΜG預(yù)防滴鼻組和達菲200ΜG治療灌胃組的肺組織病變程度相近。說明STATIN／CAFFEINE對H5N1病毒感染引起的肺組織病理改變有一定的抑制作用，與達菲灌胃的效果相似。與達菲200ΜG治療滴鼻組J組相比，STATIN50ΜG／CAFFEINE200ΜG預(yù)防滴鼻組A組和馬抗IGG預(yù)防滴鼻組G組的H5特異性病毒核酸量相對較低P005，其他組間無差別。結(jié)果提示，STATIN／CAFFEINE能抑制H5N1流感病毒在肺臟的復(fù)制，且優(yōu)于達菲滴鼻的效果，與馬抗IGG預(yù)防滴鼻的效果相似。4體內(nèi)抗H3N2流感病毒作用H3N2流感動物實驗中，與達菲200ΜG預(yù)防滴鼻組Ⅰ組相比，STATIN50ΜG／CAFFEINE200ΜG預(yù)防滴鼻A組和灌胃組E組、利巴韋林200ΜG預(yù)防滴鼻組G組和達菲200ΜG治療灌胃組J組的肺組織病變程度明顯減輕P005。同時，這些組間肺組織病變程度相近。說明STATIN／CAFFEINE對H3N2病毒感染引起的肺組織病理改變有一定的抑制作用，且優(yōu)于達菲滴鼻的效果，與達菲灌胃的效果相似。與STATIN50ΜG／CAFFEINE200ΜG預(yù)防灌胃組E組相比，STATIN50ΜG／CAFFEINE200ΜG治療滴鼻組B組、STATIN25ΜGCAFFEINE200ΜG預(yù)防滴鼻組C組和治療滴鼻組D組、病毒唑200ΜG治療灌胃組H組和達菲200ΜG預(yù)防滴鼻組Ⅰ組的H3特異性病毒核酸量相對較高P005，其他組間無差別。提示聯(lián)合應(yīng)用STATIN／CAFFEINE能抑制H3N2流感病毒在肺臟的復(fù)制，且優(yōu)于達菲滴鼻和病毒唑治療灌胃的效果，且聯(lián)合應(yīng)用STATIN／CAFFEINE預(yù)防給藥的效果優(yōu)于治療給藥的效果，STATM高劑量50ΜG的效果要優(yōu)于低劑量25ΜG的效果。5體內(nèi)抗H1N1流感病毒作用H1N1流感動物實驗中，STATIN50ΜGCAFFEINE200ΜG治療滴鼻組B組和預(yù)防灌胃組E組與利巴韋林200ΜG預(yù)防滴鼻組G組和達菲200ΜG治療灌胃組J組的肺組織病變程度相近，提示聯(lián)合應(yīng)用STATIN／CAFFEINE對H1N1流感病毒感染引起的肺組織病理改變有一定的抑制作用，且與達菲和利巴韋林的效果相似。與利巴韋林200ΜG預(yù)防滴鼻組G組和達菲200ΜG治療灌胃組J組相似，STATIN50ΜG／CAFFEINE200ΜG治療滴鼻組B組和預(yù)防灌胃組E組有相對高的CT均值，說明這些組小鼠體內(nèi)的H1特異性病毒核酸量相對較低。結(jié)果提示，聯(lián)合應(yīng)用STATIN／CAFFEINE能抑制H1N1病毒在肺臟的復(fù)制，且預(yù)防和治療的效果均較好，與利巴韋林和達菲的效果相似。結(jié)論1、聯(lián)合應(yīng)用STATIN／CAFFEINE在體外有明顯的抗H3N2和H1N1流感病毒作用，其抑制流感病毒致細胞病變的作用隨著藥物劑量的增加而增強，且呈明顯的量效關(guān)系，且病毒吸咐前用藥的效果優(yōu)于病毒吸咐后用藥。2、在流感動物實驗中，聯(lián)合應(yīng)用STATIN50ΜG／CAFFEINE200ΜG可預(yù)防并緩解H5N1／H3N2／H1N1流感病毒感染的癥狀，有效抑制肺組織損傷，并抑制病毒在肺內(nèi)的復(fù)制，且效果相當于或優(yōu)于達菲。在H3N2流感動物實驗中，高劑量聯(lián)合用藥STATIN50ΜG／CAFFEINE200ΜG的功效要高于低劑量聯(lián)合用藥STATIN25ΜG／CAFFEINE200ΜG，且聯(lián)合應(yīng)用STATIN／CAFFEINE預(yù)防給藥的效果優(yōu)于治療給藥的效果。提示聯(lián)合應(yīng)用STATIN／CAFFEINE可作為預(yù)防和治療H5N1、H3N2和H1N1流感病毒的藥物。

簡介：I碩士學位論文論文題目慢性強迫游泳運動對大鼠放射性認知功能障礙影響及相關(guān)機制的實驗研究研究生姓名張媛指導(dǎo)教師姓名田野教授朱雅群副教授專業(yè)名稱腫瘤學研究方向腫瘤放射治療學論文提交日期2014年3月III

簡介：研究背景和目的重癥監(jiān)護室INTENSIVECAREUNIT，ICU是對危重癥患者提供生理功能嚴密監(jiān)測及有效及時的診治的場所，其中呼吸機輔助的機械通氣已成為危重癥患者呼吸支持的一種常用治療及生命支持手段。目前，機械通氣在ICU中使用非常普遍。ESTEBAN等2000年通過對北美、南美、西班牙和葡萄牙的412個內(nèi)科、外科ICU病人情況的大型調(diào)查顯示，ICU患者中39％接受機械通氣治療。但是在使用呼吸機進行機械通氣時，患者可能會發(fā)生一些通氣相關(guān)性并發(fā)癥，呼吸機相關(guān)性肺炎（VENTILATASSOCIATEDPNEUMONIA，VAP）就是其中的一種并發(fā)癥。隨著人們對機械通氣研究的逐步深入，降低通氣相關(guān)性并發(fā)癥和易于脫機的機械通氣策略已經(jīng)使諸多危重患者受益，但是VAP感染率仍居高不下。研究發(fā)現(xiàn)接受機械通氣患者中VAP的發(fā)生率為8％28％，死亡率可達24％76％，死亡風險增加了210倍。VAP可使機械通氣時間延長1032天，ICU住院時間延長9天，額外增加醫(yī)療費用約US40000。降低VAP的措施越來越受到重視，世界各國家各組織紛紛發(fā)布了降低VAP的相關(guān)指南，如2004年由加拿大危重病學會和危重病臨床試驗組的聯(lián)合組成的一個專家委員會制定了以循證醫(yī)學為依據(jù)的VAP臨床預(yù)防指南。隨著循證醫(yī)學理念的不斷普及，“循證實踐指南”在醫(yī)療護理服務(wù)過程中的作用顯得尤其重要。降低VAP的循證護理能有效降低VAP的發(fā)生，且簡單可行、安全、成本較低。但是，降低VAP相關(guān)指南的發(fā)布，并沒有帶來臨床實踐改變的預(yù)期效果。2003年，RICART等發(fā)現(xiàn)在ICU護士中不依從率達到223％。在西班牙ICU中，也同樣發(fā)現(xiàn)預(yù)防與診斷過程與循證推薦差異顯著。針對VAP循證指南臨床實踐依從性不佳的情況，國外學者對此進行了調(diào)研分析，試圖找出其影響因素。但是所采用方式大多是主觀片面調(diào)查常見因素，未能從理論角度完整地系統(tǒng)評價護士臨床實踐，并由此切實指導(dǎo)臨床行為的改善。在國內(nèi)，降低VAP循證護理的認知、臨床實踐現(xiàn)狀研究較少，尤其是綜合分析比較認知與實踐及科學分析臨床實踐影響因素尚缺乏研究。本研究旨在分析目前在重視培訓的環(huán)境下，護士循證護理知識掌握程度及臨床實踐的依從性現(xiàn)狀及兩者間的一致性，并通過系統(tǒng)評價找出其影響因素，對干預(yù)對策進行分析與研究，旨在為臨床預(yù)防VAP實踐改善提供可靠依據(jù)。研究方法1、基于美國疾病預(yù)防控制中心、美國胸科協(xié)會、加拿大危重病學會發(fā)布的預(yù)防VAP循證指南，以及MEDLINE數(shù)據(jù)庫文獻檢索的系統(tǒng)評價、META分析及隨機對照實驗總結(jié)的最佳實踐，結(jié)合中國臨床文化自行設(shè)計ICU科室降低VAP措施調(diào)查問卷，經(jīng)由DELPHI專家咨詢法測定其效度。檢索中文數(shù)據(jù)庫中多省市ICU護士的EMAIL地址。通過EMAIL對ICU護士發(fā)放問卷，調(diào)查其所在的ICU科室降低VAP的整體實踐現(xiàn)狀。選取廣東省為調(diào)查點，采用方便抽樣法，對廣州、深圳、珠海、佛山、汕頭、湛江、清遠、陽江八地市22家三級醫(yī)院的ICU護士進行郵寄問卷調(diào)查。分析ICU護士降低VAP臨床實踐的特點，比較護士具體實踐與科室護理質(zhì)量標準、國際循證指南的一致性。2、參考循證指南項目及國外“重癥護士預(yù)防VAP循證指南知識問卷”，結(jié)合本科室護理實踐責任范疇與制定的護理措施標準，自行設(shè)計“ICU護士呼吸機相關(guān)肺炎知識調(diào)查問卷”。采用方便抽樣法，選取廣州某三甲醫(yī)院重癥醫(yī)學科全體護士為研究對象，由研究者直接向護士發(fā)放問卷，調(diào)查降低VAP循證知識現(xiàn)狀。選取循證知識調(diào)查中認知較好的兩項床頭抬高、氣管插管氣囊壓作為臨床實踐監(jiān)測項目。以與知識調(diào)查中相同工作場所的重癥醫(yī)學科患者為研究對象。在符合納入標準的研究對象中，由研究者在每個工作日（周一至周五），按照方便抽樣的方式，選取67名患者作為當日研究對象，在任一時間點對監(jiān)測項目直接測定。使用量角器測量床頭抬高角度，使用氣囊壓力儀測定氣囊壓，對臨床實踐進行現(xiàn)狀調(diào)查，以分析比較循證認知與臨床實踐的吻合度。3、在MEDLINE、PSYCARTICLES、NURSINGCONSULT、THECOCHRANELIBRARY數(shù)據(jù)庫中進行檢索，以（NURSENURSESNURSINGSTAFFNURSINGSTAFFS）BEHAVIOURINTENTIONPLANNEDBEHAVI為檢索方式，同時在中國生物醫(yī)學文獻數(shù)據(jù)庫、維普期刊數(shù)據(jù)庫和萬方資源數(shù)據(jù)庫中進行檢索，對基于計劃行為理論（THEYOFPLANNEDBEHAVI，TPB）的護士臨床實踐行為的影響因素研究進行系統(tǒng)評價，以分析護士臨床實踐的影響因素并提出改善策略。4、關(guān)注時間對臨床循證實踐的影響，采用方便抽樣法，選擇2011年4月入住某三甲醫(yī)院重癥醫(yī)學科的全部患者，以中文版護理活動評分量表NAS為研究工具，由一名有NAS使用經(jīng)驗的研究者每日800按照NAS上的護理工作項目，根據(jù)護士每日工作記錄及醫(yī)療病歷，評估所有患者前一日所需的護理工作量，同時收集患者基本資料、臨床疾病資料并進行急性生理學及慢性健康狀況評分、記錄住院時間及結(jié)局。結(jié)合患者特點及科室人力資源，分析NAS得分的影響因素，以提出科學合理的人力資源配置方案，以在有限的資源內(nèi)提高護士的時間效能，幫助改善護理臨床實踐。5、關(guān)注影響床頭抬高循證實踐因素中存在的知覺行為控制因素，為解決措施認同問題，對床頭抬高降低VAP的效能進行研究。選取某三甲醫(yī)院重癥醫(yī)學科機械通氣24小時以上的患者，根據(jù)入科時間按照隨機數(shù)字表，將研究對象隨機分為三組對照組不給予任何額外干預(yù)，遵從護士常規(guī)護理方法45°組，研究者給予將床頭抬高至45°的干預(yù)，余護理措施同對照組30°組，研究者給予將床頭抬高至30°的干預(yù)，余護理措施同對照組。由研究者每日8001800中每小時觀察、測量并調(diào)整床頭角度，囑托當班護士將床頭擺放于研究角度。使用床頭指示卡維持床頭角度，并用量角器對角度進行測定。研究終止指標病人拔管、出科或死亡。研究結(jié)果1、多省市ICU科室降低VAP臨床實踐現(xiàn)狀調(diào)查顯示接受調(diào)查的ICU科室中，565％具備感染控制護士口腔護理實踐中，17％的ICU使用指南推薦的氯已定作為口腔護理溶液，217％采用了牙刷刷牙的口腔護理循證措施，大部分口腔護理頻率為12H次腸內(nèi)營養(yǎng)實踐中，761％的ICU執(zhí)行間斷性鼻胃管腸內(nèi)營養(yǎng)中每次鼻飼前評估胃殘留量，795％在持續(xù)性鼻胃管腸內(nèi)營養(yǎng)中每48小時監(jiān)測胃殘留量體位護理實踐中，913％的ICU最常采用半臥位，630％運用角度卡評估床頭抬高角度呼吸管道管理實踐中，348％的ICU使用密閉式吸痰系統(tǒng)，457％每8小時測定氣囊壓，413％使用持續(xù)或間斷的聲門下吸引手衛(wèi)生實踐中，913％的ICU反映“一直”或“頻繁”執(zhí)行手衛(wèi)生標準。廣東省ICU護士臨床實踐現(xiàn)在調(diào)查顯示ICU護士降低VAP臨床實踐行為與科室護理質(zhì)量標準吻合度的分析中，將吻合度分為15五個等級≥833、667％、533％、333％、≤167％，125％的回答者實踐行為吻合度達第1等級，達第2、3、4、5等級吻合度的回答者分別占253％、294％、174％、81％具體的臨床實踐分析中，在口腔護理方面，304％的回答者使用指南推薦的氯已定作為口腔護理溶液，551％依然選用生理鹽水，810％選用棉球作為口腔護理用具，大部分口腔護理頻率為2次天。腸內(nèi)營養(yǎng)實踐中，在間斷性鼻胃管腸內(nèi)營養(yǎng)時970％執(zhí)行每次鼻飼前評估胃殘留量，在持續(xù)性腸內(nèi)營養(yǎng)時948％每48小時監(jiān)測胃殘留量體位護理實踐中，915％的回答者最常采用半臥位，666％“一直”或“頻繁”運用角度卡評估床頭抬高角度呼吸管道管理實踐中，310％的回答者使用密閉式吸痰管，789％按需吸痰，680％每48H測定氣囊壓，有532％不使用持續(xù)性聲門下吸引手衛(wèi)生實踐中，992％的回答者自我評價“一直”或“頻繁”執(zhí)行手衛(wèi)生。2、降低VAP循證知識現(xiàn)狀調(diào)查結(jié)果顯示“使用呼吸機的病人在無禁忌癥的情況下應(yīng)將床頭抬高3045°”的回答正確率為972％，“氣管插管氣囊壓應(yīng)維持在2030CMH2O”回答正確率為100％，“使用聲門下吸引”的回答正確率分別為889％，“鼻飼前胃殘留量的測定知識”回答正確率為222％，“呼吸機管道的更換”回答正確率為139％。護士循證認知良好的前提下，護理項目的臨床實踐現(xiàn)狀研究結(jié)果顯示臨床實踐調(diào)查中共測量床頭抬高152次，其中機械通氣患者74次，非機械通氣患者78次，兩類患者床頭抬高的角度沒有顯著差異。在機械通氣患者中，床頭抬高最小10°，最大52°。其實踐符合3045°標準的僅25次，符合率為338％。648％的床頭角度不足30°。共測量氣囊壓122次，其中機械通氣患者80次，非機械通氣患者42次（帶氣管插管下自主呼吸）。在機械通氣患者中，氣囊壓最小2CMH2O，最大100CMH2O。其實踐符合2030CMH2O標準有32次，符合率為400％。438％的壓力不足，162％的壓力過大。3、文獻系統(tǒng)評價結(jié)果顯示共12篇符合納入標準而列入系統(tǒng)評價中，基于TPB理論的模型對行為意向的預(yù)測效能R2范圍為155％88％，其平均權(quán)重R2為535％（研究數(shù)12，護士總數(shù)5107）。10項研究均表明態(tài)度對行為意向的明顯預(yù)測效益，其余2項研究中未能預(yù)測的行為意向有關(guān)HIVAIDS患者護理及手衛(wèi)生9項研究認為表明主觀規(guī)范對行為意向有明顯預(yù)測效益。其作用較弱的行為意向為HIVAIDS患者的護理、SARS患者的護理及冠心病指南中戒煙建議依從行為僅有一項研究反映知覺行為控制在預(yù)測行為意向中不起作用。研究者對基礎(chǔ)理論框架進行了擴展，護士的知識、過去的經(jīng)驗、實踐能力、工作年限、護理單元活動強度等加入理論框架中，加大了對行為意向的預(yù)測及解釋能力。4、影響臨床循證實踐的時間因素對策分析結(jié)果顯示患者住院期間NAS得分為322801分，平均560±97分。每日患者人數(shù)為1425例，平均185±25例。每日護理工作量為18753012工時，平均2314工時。每日不足的工時為2771118工時，平均690工時每班需增加15名護士，平均3名。機械通氣患者NAS平均分為592±82，非機械通氣患者NAS平均分為514±101，兩組得分有顯著統(tǒng)計學差異P0013。用單因素分析探討護理工作量的預(yù)測因子，結(jié)果表明疾病嚴重度P0014、通氣方式P0013、結(jié)局P0006是護理工作量的影響因子。5、影響臨床循證實踐的措施認同對策分析中床頭抬高護理措施實施效能研究結(jié)果顯示共收集了44例，其中對照組15例，30°組15例，45°組14例。對照組6例400％發(fā)生VAP，1例為微生物證實，5例為臨床懷疑30°組4例267％發(fā)生VAP，1例微生物證實，3例臨床懷疑45°組3例214％發(fā)生VAP，2例微生物證實，1例臨床懷疑。三組間未能發(fā)現(xiàn)統(tǒng)計學差異P0541。三組間機械通氣時間、整個ICU住院時間及死亡率也未發(fā)現(xiàn)統(tǒng)計學差異。研究結(jié)論1、多省市ICU科室臨床實踐調(diào)查結(jié)果可供參考感染控制護士未普遍配備，腸內(nèi)營養(yǎng)實踐與手衛(wèi)生執(zhí)行較好，口腔護理實踐與國際循證指南標準差距較大，呼吸管道管理及體位護理實踐執(zhí)行還有待改善。廣東省ICU護士臨床實踐調(diào)查中，護士的臨床實踐與科室護理質(zhì)量標準存在一定的距離，總體實踐現(xiàn)狀與多省市ICU科室臨床實踐調(diào)查結(jié)果類似，但呈現(xiàn)出與國際循證指南標準更接近的趨勢。2、通過科室培訓等措施，ICU護士降低VAP循證護理的認知狀況較好，但是需要注意加強護士主動的循證護理意識，并通過主動連續(xù)的教育更新并鞏固知識架構(gòu)。護理人員降低VAP的臨床實踐與循證認知不吻合，依從性差。而且臨床實踐活動中未能考慮不同類型患者個體化的護理，需要理解特定循證指南的適用人群，以評判性思維提供護理服務(wù)。3、影響護士臨床實踐行為的因素不僅僅是知識，還包括態(tài)度、主觀規(guī)范、知覺行為控制、資源、環(huán)境支持、時間等?；谟媱澬袨槔碚摰淖兞磕軌蚪忉尣㈩A(yù)測護士的臨床行為，可以依據(jù)綜合理論框架的主要影響因素設(shè)計干預(yù)方案來促進護士行為的發(fā)展或改善。4、ICU內(nèi)護理人力資源缺乏，護士工作負荷重，用于每位患者的護理時間有限，會對護士的臨床循證實踐有影響。在現(xiàn)有人力資源下，我們推薦科室按照1名護士負責3名患者的比例進行基礎(chǔ)排班，其中1名患者為機械通氣患者，其余2名為非機械通氣患者對于病情較重的患者考慮安排有經(jīng)驗的護士去照護這些患者，有條件的可以適當增加助理護士輔助對于科室總體NAS護理工作量加大的情況，應(yīng)考慮彈性增加人力配置。5、針對護士對床頭抬高措施認同性所致知覺行為控制對行為影響的問題，本研究未能提供足夠的證據(jù)支持將床頭角度抬高維持在30°或45°的臨床實踐降低VAP的效能。但是，研究表明了床頭抬高角度越高VAP發(fā)生越少的趨勢。對于床頭抬高循證實踐的對策，應(yīng)結(jié)合患者風險特點，權(quán)衡利弊給予恰當護理行為，其具體標準還需進一步深入研究。

簡介：本文研究目的測評機械通氣患者的舒適度；了解醫(yī)生、護士對機械通氣患者舒適度的認知狀況；探討提高機械通氣患者舒適度的對策方法。研究方法于2005年3月至2006年4月，對中南大學湘雅一醫(yī)院有治療、護理機械通氣患者經(jīng)歷的37名醫(yī)生、50名護士以及在該院接受機械通氣的43名患者收集三方面的資料調(diào)查對象的一般情況、對機械通氣舒適度的認知狀況、對機械通氣舒適度影響因素的認知狀況。采用美國國立衛(wèi)生研究所制定的視覺模擬評分法VISUALANALOGUESCALE，VAS研究患者舒適度，采用自制調(diào)查問卷研究三組研究對象對機械通氣患者舒適度影響因素的認知狀況。采用SPSS130統(tǒng)計軟件對資料進行描述性分析、卡方檢驗、T檢驗或方差分析、多因素LOGISTIC回歸分析。研究結(jié)果1、醫(yī)生、護士、患者對機械通氣舒適度的認知平均得分為6240±1211，6560±1431，4910±1525，醫(yī)生、護士的平均得分高于患者。三者均數(shù)兩兩比較，醫(yī)生組與護士組差異無統(tǒng)計學意義，醫(yī)生組、護士組與患者組差異有統(tǒng)計學意義。2、醫(yī)生、護士、患者對機械通氣舒適度影響因素的認知平均得分分別為51351±8613，66160±10769，5125±12255，護士的平均總得分最高。三者均數(shù)兩兩比較，護士與醫(yī)生、患者差異有統(tǒng)計學意義，醫(yī)生與患者無統(tǒng)計學意義。3、醫(yī)生、護士、患者對機械通氣舒適度各影響因素的認知，在生理因素方面，氣管插管、溝通障礙、呼吸機不合拍、口干口渴、物理約束、活動受限6個因素的得分有統(tǒng)計學差異；在心理因素方面，害怕、緊張2個因素的得分有統(tǒng)計學意義；在社會因素方面，周圍環(huán)境、缺乏家人支持、缺乏醫(yī)務(wù)人員支持3個因素的得分差異有統(tǒng)計學意義。4、多元線性回歸分析結(jié)果表明對患者舒適度影響大的因素有溝通障礙、睡眠障礙、吸痰、呼吸機不合拍、口干口渴、物理約束、不了解病情、害怕、缺乏醫(yī)務(wù)人員支持。研究結(jié)論機械通氣患者承受著中度不舒適；醫(yī)生、護士、患者對機械通氣舒適程度及影響因素的認知有差異；影響患者舒適度的主要因素有口干口渴、呼吸機不合拍、不了解病情、害怕、吸痰、睡眠障礙、溝通障礙、物理約束、缺乏醫(yī)務(wù)人員支持。提示醫(yī)生、護士應(yīng)重視對機械通氣患者的舒適治療與護理，正確評估患者的舒適度，準確地把握影響患者舒適度的因素，提高機械通氣患者的生活質(zhì)量。

簡介：第一軍醫(yī)大學2003級碩士學位論文單純皰疹病毒II型糖蛋白G重組質(zhì)粒的構(gòu)建、表達及鑒定、Y974709CONSTRUOTION，EXPRESSIONANDIDENTIFIOATIONOFTHERECOMBINEDPIASMIDOFGIYCOPROTEINGOFHSV一2課題來源自選課題專業(yè)名稱學位申請人指導(dǎo)教師皮膚病與性病學成桂明楊慧蘭教授答辯委員會主席曾凡欽教授答辯委員會成員賴維教授曾抗教授張錫寶教授王捷副教授論文評閱人張?zhí)玫陆淌诶钇淞纸淌?006年6月9曰廣卅摘要IGM陽性血清及正常人血清。在退火溫度為52℃時擴增出與預(yù)期結(jié)果相符的目的基因片段1241BP。重組質(zhì)粒的PCR鑒定及雙酶切鑒定可擴增出與目的基因片段大小一致的DNA片段。初步證實目的基因片段FGG一2已正確插入質(zhì)粒載體PGEX4T一1中。經(jīng)過比對分析，結(jié)果顯示所測得的DNA序列與目的基因序列一致，且閱讀框架正確。進一步證實DNA插入序列正確。重組表達蛋白RFGG一2的SDSPAGE電泳檢測顯示誘導(dǎo)后重組質(zhì)粒菌在分子量約662KD處出現(xiàn)特異蛋白條帶，與預(yù)測的大小相符。對該產(chǎn)物進行免疫印跡檢測，結(jié)果顯示在非誘導(dǎo)表達條件下的表達產(chǎn)物未出現(xiàn)與HSV2GG單克隆抗體MCAB反應(yīng)的條帶；而1PTG誘導(dǎo)產(chǎn)生的RFGG2蛋白與MCAB出現(xiàn)明顯的反應(yīng)條帶。表明誘導(dǎo)表達的RFGG一2蛋白抗原與HSV2一GG的MCAB具有良好的抗原性和特異性。GST柱純化獲得的融合表達蛋白HSV2GG／GST，經(jīng)SDSPAGE電泳檢測顯示在662KD處出現(xiàn)一條清晰的特異蛋白條帶。表明已獲得純化的HSV2一GG／GST融合蛋白。間接ELISA檢測顯示，該融合蛋白抗原能分別與抗HSV一2IGGGH性血清、抗HSV2IGM陽性血清反應(yīng)，而不與正常人血清反應(yīng)。表明HSV2GG／GST融合蛋白抗原對抗HSV2陽性血清抗體具有較好的抗原性和特異性。本研究利用分子克隆技術(shù)成功構(gòu)建了高效融合表達的單純皰疹病毒II型糖蛋G重組質(zhì)粒PGEX4T1／HSV2GG；已獲得抗原性和特異性較強的純化HSV2GG／GST融合蛋白抗原。為進一步研制HSV一2診斷試劑盒奠定了一定的基礎(chǔ)。關(guān)鍵詞單純皰疹病毒外膜糖蛋白G基因克隆基因表達純化鑒定

簡介：；冬『⑧論文作者簽名指導(dǎo)教師簽名贏H伽論文評閱人1整垂宣∑圭堡醫(yī)短∑浙江太堂醫(yī)堂院隘屬筮三醫(yī)醫(yī)評閱人2邊健∑圭魚醫(yī)痖∑揎劌立筮二厶匱醫(yī)院評閱人3遞蠱掛∑副圭絲醫(yī)瘟∑揎劃壹笈±厶匿醫(yī)院答辯委員會主席奎惠查∑圭堡醫(yī)痖∑浙江太堂醫(yī)堂瞳醴屬笈三醫(yī)睦委員I王墾彥∑圭堡醫(yī)短∑浙江省厶民醫(yī)院委員2馮越∑圭絲醫(yī)瘟∑浙江笪童回德醫(yī)院委員3垡惠蠱∑圭絲醫(yī)垣∑植劌立箜±厶醫(yī)醫(yī)瞳委員4吳睦∑副童堡醫(yī)垣∑逝江太堂醫(yī)堂暄隘屬疊逸去醫(yī)院答辯日期2Q223。，_晨1，蜃移。，量1|量1■■＼1刪些嚶浙江大學研究生學位論文獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進行的研究工作及取得的研究成果。除了文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得迸婆盤堂或其他教育機構(gòu)的學位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。學位論文作者簽名穗№K簽字日期鋤L『年乙月玎日學位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學位論文作者完全了解逝望盤堂有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交本論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)逝姿盤堂可以將學位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索和傳播，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學位論文。保密的學位論文在解密后適用本授權(quán)書學位論文作者簽名癍H佃導(dǎo)師簽名簽字日期如I『年工月歹日簽字日期如IF年2／月≯蜇F

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