下調(diào)miR-18a和miR-328抑制肺腺癌A549細胞的侵襲和遷移.pdf

1、【目的】：
　　肺癌是全身各種腫瘤中發(fā)病率與死亡率最高的惡性腫瘤，男性位居第一，女性僅次于乳腺癌位居第二，嚴重威脅人們的健康與生命。隨著腫瘤相關(guān)分子機制研究的深入以及分子靶向藥物的應用，以基因為導向的個體化多學科綜合治療將扮演著越來越重要的角色。微小 RNA（miRNA）是一類長約22個核苷酸的保守非編碼小分子RNA，通過調(diào)控目標基因表達，影響腫瘤細胞的增殖、分化及凋亡。本研究旨在分析miR-18a和miR-328在肺腺癌A549

2、細胞中的表達，探討下調(diào)miR-18a或miR-328的表達對其侵襲和遷移能力的影響。
　　【方法】：
　?。?）運用實時熒光定量PCR法檢測肺腺癌A549細胞和正常支氣管上皮BEAS-2B細胞中miR-18a和miR-328的相對表達量。
　?。?）通過獲取人 miR-18a、miR-328序列，設(shè)計并合成其 inhibitor序列及NC序列，應用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染技術(shù)，以下調(diào)miR-18a或miR-328的表達，從而建立低表

3、達miR-18a或miR-328的A549細胞模型。
　?。?）進一步采用TranswellTM侵襲和遷移實驗分別檢測各組A549細胞侵襲和遷移能力的變化。
　　【結(jié)果】：
　?。?）與正常支氣管上皮BEAS-2B細胞相比，肺腺癌A549細胞中miR-18a和miR-328均呈高表達，差異有統(tǒng)計學意義（均P<0.05）。
　?。?）與空白對照組和陰性對照組相比，肺腺癌A549細胞中，轉(zhuǎn)染miR-18a inhib

4、itor組的miR-18a的表達明顯降低，差異有統(tǒng)計學意義（均P<0.05）；轉(zhuǎn)染miR-328 inhibitor組的miR-328的表達同樣明顯降低，差異有統(tǒng)計學意義（均P<0.05）。
　?。?）TranswellTM侵襲實驗檢測結(jié)果顯示，與空白對照組和陰性對照組相比，轉(zhuǎn)染miR-18a inhibitor組的A549細胞侵襲能力明顯降低，差異有統(tǒng)計學意義（均P<0.01)；轉(zhuǎn)染miR-328 inhibitor組的A549

5、細胞侵襲能力明顯降低，差異有統(tǒng)計學意義（均P<0.01）。
　　（4）與空白對照組和陰性對照組相比，轉(zhuǎn)染miR-18a inhibitor組的A549細胞與轉(zhuǎn)染miR-328 inhibitor組的A549細胞遷移能力均明顯降低，差異有統(tǒng)計學意義（均P<0.01)。
　　【結(jié)論】：
　　在A549細胞中miR-18a和miR-328均呈高表達，下調(diào)A549細胞miR-18a或miR-328的表達水平均可有效抑制腫瘤細胞