溫度應激和順鉑(Cisplatin)對雄鼠睪丸損傷的蛋白質(zhì)組學研究.pdf

1、冷熱應激和化療藥物已成為造成男性不育的主要因素。本論文利用蛋白質(zhì)組學技術探索冷熱應激和化療藥物順鉑對雄鼠睪丸的影響。1.以成年雄性大鼠為實驗材料，優(yōu)化和構建了大鼠睪丸組織損傷的冷應激和熱應激模型，利用蛋白質(zhì)組學和生物信息學技術發(fā)現(xiàn)冷、熱應激響應蛋白。2.以成年雄性小鼠為實驗材料，使用臨床化療藥物順鉑對小鼠睪丸造成藥物損傷，每只2.5mg/kg/d的順鉑用藥量，連續(xù)腹腔注射5天，分別在注射后1天、17天、34天、68天取樣觀察，選取損傷最

2、嚴重的小鼠睪丸利用蛋白質(zhì)組學技術，揭示順鉑造成小鼠睪丸損傷的響應蛋白?；谏镄畔W揭示順鉑損傷響應蛋白參與的代謝通路，優(yōu)選出可能緩解順鉑損傷的靶蛋白。
　　熱應激研究中采用43℃熱水浴浸泡大鼠陰囊1小時構建睪丸熱應激模型，立即取樣后發(fā)現(xiàn)雖大鼠睪丸組織形態(tài)未發(fā)生改變，但細胞凋亡實驗顯示已造成大鼠睪丸生精細胞發(fā)生凋亡，實驗組與對照組相比產(chǎn)生的差異表達的蛋白有18個，其中上調(diào)蛋白7個，下調(diào)11個。這些蛋白功能涉及刺激應答、蛋白水解、總

3、代謝、氧化還原、信號傳導、凋亡等，包括Prdx6、Hspa5、Sod1、Uchl1等多種熱應激大鼠睪丸響應蛋白。
　　冷應激研究中采用0℃冷水浴浸泡大鼠陰囊1小時構建睪丸冷應激模型，取樣后發(fā)現(xiàn)雖大鼠睪丸組織形態(tài)未發(fā)生改變，但細胞凋亡實驗顯示已造成大鼠睪丸生精細胞發(fā)生凋亡，實驗組與對照組相比產(chǎn)生的差異表達蛋白有23個，其中上調(diào)蛋白11個，下調(diào)12個。這些蛋白功能涉及刺激應答、蛋白水解、總代謝、氧化還原、信號傳導、凋亡等，包括Hnrn

4、pk、Hspd1、Hnrnpa2b1、Uchl1等多種冷應激大鼠睪丸響應蛋白。
　　化療藥物毒性損傷研究中采用小鼠腹腔注射順鉑2.5mg/kg/d連續(xù)5天構建小鼠睪丸組織順鉑損傷模型，注射后第17天后小鼠睪丸組織損傷最嚴重，用該組小鼠睪丸蛋白與對照組相比產(chǎn)生的差異表達的蛋白有31個，其中上調(diào)蛋白23個，下調(diào)8個。這些蛋白功能涉及刺激應答、蛋白水解、氧化還原、轉運、凋亡、抗氧化等，包括Gstm1、Pgam1、Prdx6、Nme1和N