4個位點單核苷酸多態(tài)性與冠心病易感相關性研究.pdf

1、冠心病是最常見的心血管疾病之一，是由環(huán)境因素和遺傳因素相互作用引起的一類復雜性多基因遺傳性疾病。近年來，隨著基因測序技術突飛猛進的發(fā)展以及越來越廣泛的應用，單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymorphisma，SNP)已成為醫(yī)療技術研究的熱點。尤其自2007年以來，全基因組關聯(lián)研究(genome-wideassociation study，GWAS)已發(fā)現(xiàn)與冠心病發(fā)病相關的多個多態(tài)性位點，為冠心病的易感人群及患

2、者的預防、診斷及治療提供了新的依據(jù)。但這些多態(tài)性位點對不同的人群冠心病的影響尚不清楚，大多數(shù)位點影響冠心病發(fā)生的機制尚不明確。本文根據(jù)GWAS的研究結果篩選出了rs515135、rs1122608、rs6544713、rs216172這四個位點進行冠心病基因單核苷酸多態(tài)性研究。與這四個位點相關的基因分別為APOB基因，LDLR基因，ABCG5-ABCG8基因，SMG6基因。
　　目的:
　　本研究目的在于對延邊漢族人群rs5

3、15135、rs1122608、rs6544713、rs216172四個單核苷酸多態(tài)性位點進行分析，探討這四個SNPs位點的等位基因頻率、基因型頻率與冠心病易感性的相關性，同時研究SNPs位點與臨床各參數(shù)的相關性，從而為進一步明確延邊漢族人群冠心病的發(fā)病機制、評估冠心病病變程度以及判斷冠心病預后提供新的治療目標。
　　方法:
　　1.研究對象
　　本文采用病例對照研究方法，收集延邊地區(qū)漢族冠心病患者及其同期年齡、性別相

4、匹配的正常漢族人群共405例。其中病例組標本204例，選自2014年3月至2015年11月的漢族冠心病患者，其在延邊大學附屬醫(yī)院心血管內科確診并住院治療，年齡34-81歲，平均年齡64.7±9.9歲，男119例，女85例。選擇同期在延邊大學附屬醫(yī)院體檢科健康體檢的漢族正常人群為對照組，共201例，年齡50-88歲，平均年齡64.8±9.3歲，男111例，女90例。
　　2.候選基因和SNPs位點的選擇
　　本文研究意在根據(jù)G

5、WAS在冠心病易感性中的研究結果.同時結合查閱大量相關文獻，共篩選出rs515135、rs1122608、rs6544713、rs216172這四個位點進行研究。
　　3.SNPs位點檢測方法
　　采用基于熒光標記單堿基延伸原理的SNaPshot技術進行SNP的分型檢測，檢測過程主要包括引物設計合成、DNA提取、預擴增、預擴增產物純化、延伸反應、延伸產物純化，最后上機檢測進行數(shù)據(jù)分析。
　　結果:
　　(1)臨床

6、參數(shù)
　　冠心病組204例，平均年齡64.7±9.9歲，其中男119例，女85例。正常對照組共201例，平均年齡64.8±9.3歲，男111例，女90例。兩組別之間高血壓、吸煙史、HDL、LDL有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），而年齡、性別、BMI、收縮壓、舒張壓、糖尿病史、TG、TC無統(tǒng)計學意義。
　　(2)Hardy-Weinberg平衡檢驗
　　APOB基因rs515135位點、LDLR基因rs1122608位點、S

7、MG6基因rs216172位點這3個SNP均符合Hardy-Weinberg平衡檢驗，表明本研究所選取的樣本具有較好的群體代表性。
　　(3)冠心病組與對照組之間的相關分析結果
　?、賰山M間等位基因頻率的相關分析:LDLR基因的rs1122608位點的等位基因頻數(shù)在冠心病組和對照組之間有顯著的統(tǒng)計學差異(P=0.005，P＜0.01)
　?、趦山M間基因型頻率的相關分析:SMG6基因的rs216172位點的三種基因型頻率

8、在冠心病組和對照組之間有統(tǒng)計學差異（P=0.009，P＜0.05），說明該位點與冠心病有關聯(lián)。
　?、蹆山M間基因模型模擬的基因型頻率的相關分析:通過模擬基因模型，當SMG6基因的rs216172位點的等位基因G為顯性遺傳時，在GC+GG型與CC型兩組之間有顯著性差異（P=0.004，P＜0.01）。
　　(4)不同基因型間臨床參數(shù)的比較
　　對這4個SNP位點在BMI、收縮壓、舒張壓、TC、TG、HDL、LDL間比較，

9、統(tǒng)計分析應用單因素方差分析，所得結果4個SNP位點的不同基因型間在這些臨床參數(shù)均無統(tǒng)計學意義。
　　(5)4個SNP位點與心肌梗死的相關分析
　　APOB基因的rs515135位點的三種基因型頻率在MI組和非MI組兩組之間有統(tǒng)計學差異（P=0.047，P＜0.05），說明該位點與MI有關聯(lián)。
　　(6) CAD相關的危險因素分析
　　rs216172、高血壓、LDL與冠心病的發(fā)病風險相關（P＜0.05），有統(tǒng)計學

10、差異;而OR值分別為1.479、1.737、1.782，是冠心病的危險因素。
　　結論:
　　對于延邊地區(qū)漢族人群中實驗研究結論:
　　1.SMG6基因的rs216172位點(C/G)與冠心病的發(fā)病有相關性，其CC基因型可能對冠心病發(fā)病起保護性作用。
　　2.LDLR基因的rs1122608位點(G/T)的T等位基因是冠心病的保護性基因。
　　3.APOB基因的rs515135位點(G/A)與心肌梗死發(fā)病相