一個(gè)水稻金黃色穎殼與節(jié)間基因的定位與功能分析.pdf

1、植物色素的組成和代謝對(duì)植物的生長(zhǎng)發(fā)育具有重要作用。水稻金黃色穎殼與節(jié)間表型作為1個(gè)經(jīng)典的形態(tài)標(biāo)記性狀，長(zhǎng)期以來(lái)被廣泛應(yīng)用于育種和遺傳學(xué)研究。本研究利用經(jīng)60Coγ射線輻照后發(fā)現(xiàn)的水稻金黃色穎殼與節(jié)間突變體浙粳88GH，對(duì)其進(jìn)行了遺傳分析和分子定位，得到如下研究結(jié)果:
　　 1.與野生型相比較，突變體浙粳88GH的穎殼與節(jié)間呈金黃色且顏色深淺不一。
　　 2.利用m(a)ule試劑對(duì)突變體浙粳88GH的木質(zhì)素成分進(jìn)行了分析

2、，相對(duì)于野生型，該突變體的皮層和維管束中紫丁香基木質(zhì)素含量升高，愈創(chuàng)木基木質(zhì)素的含量降低。
　　 3.田間農(nóng)藝性狀調(diào)查結(jié)果發(fā)現(xiàn)浙粳88GH的株高、穗數(shù)、穗長(zhǎng)、千粒重等無(wú)明顯變化。
　　 4.遺傳分析表明，該突變性狀受1對(duì)隱性核基因控制，以秈稻珍汕97B與該突變體雜交的F2作為定位群體，采用SSR分子標(biāo)記和隱性群體分析法，將突變基因gh6定位在第2號(hào)染色體的短臂端編碼一個(gè)CAD蛋白(LOC_Os02g09490)的基因上。

3、測(cè)序結(jié)果顯示，與LOC_Os02g09490基因相比gh6第一個(gè)外顯子第191個(gè)堿基由C突變?yōu)镚，造成編碼區(qū)蛋白序列的改變，由絲氨酸變?yōu)楸彼帷?br>　　 5.對(duì)LOC_Os02g09490基因在各物種間的同源蛋白進(jìn)行同源性分析，發(fā)現(xiàn)LOC_Os02g09490基因與玉米的蛋白最為接近。同時(shí)發(fā)現(xiàn)GH6在翻譯時(shí)存在三種mRNA，分別將其命名為GHcDNA1，GHcDNA2和GHcDNA3，其對(duì)應(yīng)的cDNA編號(hào)分別為AK071794.1

4、，AK105011.2和AK059804.1。
　　 6.組織表達(dá)分析發(fā)現(xiàn)LOC_Os02g09490屬于組成型表達(dá)基因，在根和莖中表達(dá)量最高，花藥和內(nèi)稃中次之，葉中表達(dá)量最低。
　　 7.構(gòu)建LOC_Os02g09490全基因組互補(bǔ)載體，對(duì)該基因所編碼的蛋白進(jìn)行了亞細(xì)胞定位分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)該蛋白定位于細(xì)胞膜與細(xì)胞核上。
　　 本研究發(fā)現(xiàn)了一個(gè)LOC_Os02g09490基因新的突變位點(diǎn)，為該基因功能的深入研究及應(yīng)