金釵石斛中生物堿積累規(guī)律及抗腫瘤活性研究.pdf

1、金釵石斛(Dendrobium nobileLindl)，蘭科石斛屬多年生草本，是我國(guó)珍稀的藥用植物。本試驗(yàn)以金釵石斛莖為材料，以溴甲酚綠來檢測(cè)提取液中的生物堿含量，探究其的積累規(guī)律。并且以單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果為依據(jù)，利用Box-Behnke響應(yīng)面分析法獲得最佳提取工藝條件。對(duì)純化后的金釵石斛生物堿進(jìn)行抗腫瘤活性測(cè)定。而且對(duì)每一月份的金釵石斛莖和葉中的生物堿含量進(jìn)行檢測(cè)與分析，具體研究?jī)?nèi)容及實(shí)驗(yàn)結(jié)論如下:
　　實(shí)驗(yàn)通過對(duì)金釵石斛莖（上部

2、，下部）、葉每個(gè)月的生物堿含量的測(cè)定，可以看到，隨著月份的變動(dòng)，生物堿的含量也在變動(dòng)。從總體上看來，金釵石斛莖和葉的部分的生物堿含量在8-11月期間迅速積累，9-10月到達(dá)整年的最高值，石斛莖的上部，下部和葉的生物堿含量分別為1.25、0.77、2.12mg/g，這與金釵石斛11月的采收期是相符合的。12月過后表現(xiàn)出總體下降趨向，在3月-4月期間會(huì)有少量增長(zhǎng)。其中，上半部分，下半部分年平均含量分別為0.77、0.51mg/g，可以看出，

3、金釵石斛生物堿的含量是莖的上半部分大于下半部分的。
　　用酶液對(duì)金釵石斛經(jīng)過一段時(shí)間的處理后熱回流提取，以單因素?cái)?shù)據(jù)為基礎(chǔ)，對(duì)酶處理過程中的酶含量、溫度、時(shí)間和酶液的PH環(huán)境等參量進(jìn)行考察。從單因素的實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出來，酶含量、酶處理溫度和酶處理的pH值對(duì)生物堿的提取有顯著的作用效果。確定它們?yōu)樘崛」に嚾蛩?，進(jìn)行三因素三水平的響應(yīng)面優(yōu)化實(shí)驗(yàn)，得到了最合適的提取條件:酶含量為2.34mg/ml，酶處理溫度為41.91℃，pH值為5

4、.08。在此前提下的金釵石斛莖多酚實(shí)際提取量為:0.821±0.03(mg/g)，接近于理論預(yù)測(cè)值0.850(mg/g)，說明優(yōu)化后的提取條件能成功提高金釵石斛莖中總生物堿的提取率。
　　近年來，生物堿在抗腫瘤方面的醫(yī)學(xué)價(jià)值愈發(fā)得到關(guān)注。大量的藥理實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明:天然植物中，特別是一些具有藥用價(jià)值的植物中的一些物質(zhì)通過抑制腫瘤細(xì)胞的增殖從而達(dá)到一定的醫(yī)學(xué)效果，如喜樹堿、苦參堿等。
　　在本次實(shí)驗(yàn)中，采用了CCK-8法檢測(cè)金