TLR2和TLR4的表達與自然流產的相關性研究.pdf

1、目的：流產(Abortion)是指懷孕未滿28周、胎兒體重未滿1000g而使懷孕受到終止，早期流產是指發(fā)生在懷孕12周以前者，晚期流產是指發(fā)生在滿12周及其之后者。自然流產是早孕期間比較多見的病癥，其發(fā)病原因和機制十分繁雜，除去常見的解剖結構異常（如子宮畸形、宮頸功能不全等）、染色體異常、遺傳、內分泌、理化環(huán)境及感染等因素外，近年來生殖免疫成為研究熱點之一，也有相關研究表明了免疫因素與自然流產密切相關。該理論認為，從免疫移植學角度而言，

2、之所以懷孕期間孕囊作為帶有“外來”抗原的同種異體移植物可以存在于母親體內，是因為母體胎兒面免疫系統(tǒng)的精細和復雜的調節(jié)。很多因素可以經過活化母親體內Toll樣受體（Toll like receptors,TLRs），改變母體胎兒面多種活性因子的分布水平，破壞了母體胎兒面的免疫均衡，使得孕囊被母親體內的免疫反應所排斥，引發(fā)流產。TLRs是一類能辨識病原微生物的模式分子，有調控天然免疫和獲得性免疫的作用，并且參與母體胎兒面的抗病原微生物的天然

3、免疫應答，TLRs既表達在免疫活性細胞，也在其他部位表達，如絨毛滋養(yǎng)細胞、蛻膜組織等，在維系健康妊娠和自然流產發(fā)病中起到不可忽視的作用。目前關于與妊娠流產的相關TLRs中，對Toll樣受體2和4的研究相對較多，它們是體內非常關鍵的自然免疫蛋白，也是TLRs家族亞類特征性的兩個，在大部分細胞系的細胞膜上都有分布，骨髓中單核細胞分布最多，在中性粒細胞、巨噬細胞、樹突狀細胞等細胞膜上也分布較多，另外，還分布于心肌細胞、微血管內皮細胞、氣道上皮

4、細胞、脂肪細胞、消化道上皮細胞、人胚胎腎細胞、齒齦纖維母細胞、人表皮和臍靜脈內皮細胞以及胎盤滋養(yǎng)細胞[1]。Toll樣受體2辨識肽聚糖，Toll樣受體4辨識脂多糖、內毒素等，經過髓樣分化蛋白88(MyD88)依賴性和非依賴性反應轉導路徑引起母體胎兒面的免疫活性因子Th1/Th2失去平衡。Th1分泌的趨化因子產生過多，對滋養(yǎng)層細胞產生細胞毒性作用而形成免疫損傷，直接或間接影響孕囊的著床和成長發(fā)育，而Th2則起到了維持母體胎兒面的免疫保護作

5、用。故而，當Th1/Th2偏向Th1時發(fā)生病理性懷孕的風險增加。如果對自然流產的患者盲目給予保胎，而不是對因治療，往往達不到醫(yī)生和患者所期待的效果。因此盡最大可能進行分析和尋找病因變的重要之至。文章就Toll樣受體2和4在絨毛和外周血中的分布情況與自然流產的相關性進行探索。
　　方法：選擇2014年06月-2014年12月在解放軍第105醫(yī)院婦產科門診患者（年齡<35歲、孕周<12周）作為本次實驗的研究對象：本次懷孕結局為自然流產

6、者、因意外懷孕自愿行人流終止妊娠的健康的早孕婦女。
　　納入的研究對象均由?？漆t(yī)師對病史進行問詢，包括既往史、月經史、婚育史、家族史等，并核實填寫項目是否真實、準確。體格檢查包括：一般體格檢查：血壓、身高、體重、甲狀腺、乳腺等，及常規(guī)婦科檢查。所有對象均接受基礎性激素檢查、B超檢查、夫婦染色體檢查、有無急慢性傳染病、婦科炎癥及與懷孕相關聯的免疫抗體（如抗磷脂抗體、抗β2糖蛋白抗體、抗核抗體、抗甲狀腺抗體、狼瘡抗凝血因子等為陽性者）

7、等輔助檢查，盡可能排除遺傳、染色體、解剖等相關因素。
　　本次懷孕結局為自然流產患者列為研究組；將曾有懷孕和生育史，本次因意外懷孕自愿行人流終止妊娠的健康孕婦列為對照組，每組各20例。
　　采用免疫組化法檢查每例患者絨毛滋養(yǎng)細胞中Toll樣受體2和4的分布水平（每個樣本隨機抽選一張切片，以觀察絨毛滋養(yǎng)細胞胞漿內是否含有棕黃色顆粒為判斷標準)。采用 SPSS17.0統(tǒng)計軟件進行分析處理。用平均值加減標準差分析。若P<0.05，

8、則有統(tǒng)計學差異；采用流式細胞儀檢測TLR2和TLR4分別在外周血淋巴細胞群、單核細胞群和粒細胞群的分布比值進行分析。
　　結果：1、自然流產組與妊娠對照組之間的年齡、孕齡和孕次的差異等均無統(tǒng)計學意義。2、TLR2和 TLR4在自然流產組和妊娠對照組的絨毛滋養(yǎng)細胞均見分布，主要分布在合體滋養(yǎng)細胞的胞漿中。3、TLR2在自然流產組和妊娠對照組的絨毛、外周血中單核細胞群和粒細胞群的分布水平差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)， TLR2在自

9、然流產組和妊娠對照組的外周血中淋巴細胞群的分布水平差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。4、自然流產組和妊娠對照組相比，TLR4在兩組絨毛及外周血淋巴細胞群、單核細胞群和粒細胞群的分布水平差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　結論：1.TLR2和TLR4在自然流產組和妊娠對照組絨毛滋養(yǎng)細胞、外周血淋巴細胞群、單核細胞群和粒細胞群中都有表達。2.TLR2在自然流產組外周血中淋巴細胞群的表達明顯升高， TLR4在自然流產組絨毛滋養(yǎng)細胞