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文檔簡介
1、背景:半乳凝素-9(galectin-9),是一種起源于T淋巴細胞的具有嗜酸性粒細胞趨化作用的因子,最早在活化的T淋巴細胞中發(fā)現(xiàn),隨后在多種正常人體組織中發(fā)現(xiàn)galectin-9的存在,具有多種生物學功能如細胞聚集、粘附、增殖、凋亡及炎性調(diào)節(jié),并且首次在霍奇金淋巴瘤組織中發(fā)現(xiàn)其存在,至今已在多種腫瘤組織如乳腺癌、結(jié)腸癌、胃癌等發(fā)現(xiàn)galectin-9的表達并在多種不同方面影響腫瘤生物學行為。Galecin-9在膠質(zhì)瘤中的是否存在及其作用
2、報道少見,我們研究其在膠質(zhì)瘤中可能的作用。
目的:研究外源性半乳凝素-9(galectin-9)對膠質(zhì)瘤細胞系U251增殖和遷移能力的影響,在galectin-9作用同時觀察乳糖的加入對該作用的影響,并探討其作用機制。
方法:利用實時定量PCR方法檢測膠質(zhì)瘤細胞系中galectin-9的表達情況;選取代表性細胞系U251進行下一步實驗,在U251細胞培養(yǎng)基中加入不同濃度(1、4、8、16ug/ml)外源性galect
3、in-9蛋白處理一定時間(12、24、36h)后,使用細胞計數(shù)試劑盒CCK-8檢測膠質(zhì)瘤細胞增殖能力的變化,使用transwell實驗檢測膠質(zhì)瘤細胞遷移能力的變化;另外在galectin-9處理細胞的同時加入其競爭性抑制劑乳糖,再使用同樣方法檢測增殖和遷移能力,觀察乳糖能否影響galectin-9對膠質(zhì)瘤細胞系的作用。
結(jié)果:PCR結(jié)果顯示4種膠質(zhì)瘤細胞系均極低水平表達galectin-9,其中U251細胞系幾乎不表達gale
4、ctin-9。在增殖試驗中,被高濃度galectin-9(8、16ug/ml)處理組的細胞增殖率較空白對照組明顯降低(P<0.001); U251細胞在同一濃度galectin-9處理時,隨著時間延長,不同時間點的細胞增殖率逐漸降低(P<0.01);在相同濃度galectin-9處理的基礎上,添加乳糖組細胞增殖率相對于未加乳糖組增高(P<0.05)。在遷移試驗中,外源性galectin-9刺激U251細胞一定時間后,統(tǒng)計穿至膜下的細胞數(shù)
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