椎體內注射醫(yī)用生物蛋白膠對松質骨創(chuàng)面出血的實驗研究.pdf

1、在脊柱外科領域，有關術中出血相關問題的探討比骨科其他領域（例如關節(jié)置換）相對較少，相關研究也不多。脊柱外科術中出血主要來源有三個：一是軟組織出血，二是椎管靜脈叢出血，三是松質骨創(chuàng)面出血。 在椎體切除或截骨手術中，椎體松質骨創(chuàng)面由于血竇豐富、結構松散，術中出血往往較多，而且不能通過一般的結扎、縫扎、壓迫或電凝處理獲得止血。因此松質骨創(chuàng)面出血構成了上述手術術中出血的主要來源。Cho KJ等報道41例經(jīng)椎弓根截骨術平均術中出血量高達2

2、617±1645ml。盡管局部止血藥對于松質骨創(chuàng)面的止血療效已得到證實，但傳統(tǒng)的局部給藥方法都是在骨創(chuàng)面暴露后直接應用于創(chuàng)面表面。在椎體切除或截骨的過程中，松質骨創(chuàng)面的暴露是一個不斷重復的動態(tài)過程，傳統(tǒng)的給藥方法很難達到止血效果。因此，探索一種能在椎體松質骨創(chuàng)面暴露之前預防或減少創(chuàng)面出血的方法顯得非常有必要。 醫(yī)用生物蛋白膠是一種生物蛋白制劑，其利用血液中參與凝血的有關成分模擬機體凝血過程的最后階段形成高粘度的纖維蛋白凝膠而發(fā)揮

3、藥理作用。因其具有創(chuàng)面止血、促進傷口愈合、封閉組織缺損、防止組織粘連等作用而廣泛應用于臨床各大外科手術。在脊柱外科領域，醫(yī)用生物蛋白膠已被先后報道應用于固定脊柱植骨塊、CT引導下經(jīng)皮穿刺注射治療術后或自發(fā)性腦脊液漏硬脊膜的修補及治療骶神經(jīng)根囊腫性下腰痛。還有人將生物蛋白膠與聚乙二醇酸篩網(wǎng)結合進行硬脊膜缺損修補。在創(chuàng)面止血方面，已被應用于減少脊柱側凸后路矯形手術術中松質骨創(chuàng)面及椎管靜脈叢的出血。但椎體切除或截骨前預先阻塞松質骨血竇減少創(chuàng)面

4、出血尚未見報道。 本實驗選擇醫(yī)用生物蛋白膠作為實驗研究材料，通過椎體內注射的方式，利用其形成的高粘度纖維蛋白凝膠閉塞血竇及填充骨小梁腔隙，從而在骨創(chuàng)面暴露之前預防或減少創(chuàng)面出血。本實驗通過評價該技術方法的有效性與安全性，為臨床應用提供實驗依據(jù)。 目的： 1.評價椎體內注射醫(yī)用生物蛋白膠對松質骨創(chuàng)面止血的有效性，探討椎體松質骨創(chuàng)面止血的新方法； 2.觀察椎體內注射醫(yī)用生物蛋白膠椎體內擴散范圍，評價這種給藥方

5、式的可行性； 3.評價椎體內注射生物蛋白膠的安全性，為臨床應用提供實驗依據(jù)。 方法： 1.有效性評價 成年家犬6只，術前禁食12小時，以戊巴比妥鈉30mg/kg靜脈全麻，氣管插管、備皮。仰臥位固定后術區(qū)皮膚消毒、鋪巾。取左側腹壁外側斜行切口暴露腰2-5椎體，同一動物相鄰兩椎體即腰2-3及腰4-5分別配對后隨機分為兩組，實驗組椎體內注射蛋白膠，對照組為空白對照（未予處理）。實驗組于椎體正前方鉆一直徑3.5m

6、m，深3mm孔道，將配好的蛋白膠沿孔道以0.5ml/s的速度均衡注入，劑量為2.5ml。給藥30s后同時于兩椎體正前方鉆孔（實驗組以給藥孔為中心鉆孔），鉆孔直徑8mm深度為6mm，觀察并記錄骨創(chuàng)面控制出血時間（由骨創(chuàng)面暴露至骨創(chuàng)面出血為輕微滲出為止）、止血時間（由骨創(chuàng)面暴露至骨創(chuàng)面完全止血為止，以觀察創(chuàng)面止血后1min創(chuàng)面不再出血為準）、出血量（骨創(chuàng)面出血用鑷子鉗夾干燥棉球粘取，電子天平稱出棉球粘血前后質量變化為出血量）、各組10min

7、內止血百分比（各組內10min內止血椎體數(shù)與椎體總數(shù)的百分比）。 2.生物蛋白膠椎體內擴散觀察 4只家犬前路顯露腰2-5椎體（方法同上）后用碘海醇注射（300mgl/ml）分別與生物蛋白膠主體膠、催化劑溶液以1：5體積混合后注入腰2-5椎體內（該比例混合經(jīng)試驗對蛋白膠凝固無明顯影響），劑量為2.5ml，給藥方式同上述實驗組。給藥30min后行腰2-5椎體CT掃描獲得橫斷面影像。根據(jù)擴散藥物與周圍松質骨的對比度應用GE L

8、ight Speed16 CT測量不規(guī)則圖形面積的軟件在圖像上勾畫出二者的邊界分別獲得其每一層的面積（Si），再根據(jù)每一層的高度（hi）（注：每一層高度即為掃描層厚）算出每層的體積Vi=Si×hi，根據(jù)微積分原理物體的總體積V=V1+V2+V3+…+Vn=∑Vi。計算藥物擴散體積與椎體體積并求出擴散體積百分比。 3.安全性評價 觀察可能由于蛋白膠靜脈滲漏引起的凝血功能變化、靜脈回流造成的肺栓塞以及局部滲漏導致的神經(jīng)結構受

9、壓。實驗前后采血檢測凝血酶原時間（PT），分別計算實驗前后PT轉異率（PT異常動物例數(shù)與總例數(shù)的比值）；藥物造影組術后行脊柱CT橫斷面掃描觀察生物蛋白膠滲漏情況并計算滲漏量（體積計算方法同上述蛋白膠擴散體積計算方法）；術后觀察肢體活動情況；所有動物術后3天照胸片后處死，剖胸探查肺梗死灶。 采用SPSS13.0統(tǒng)計分析軟件進行統(tǒng)計學處理，組間差異采用兩樣本t檢驗，百分比和率的比較采用Fisher確切概率檢驗，P<0.05為差異具有

10、統(tǒng)計學意義。 結果： 1.有效性評價 實驗組和對照組平均控制出血時間分別為97.50±48.20s和417.83±101.18s（t=9.901，P<0.001）；平均止血時間分別為291.08±167.18s和890.83±237.32s（t=7.157，P<0.001）；平均出血量分別為0.80±0.67g和4.39±1.84g（t=6.338，P<0.001）；10min內止血百分比分別為91.67%和16

11、.67%（P=0.001）。 2.生物蛋白膠椎體內擴散觀察 椎體內生物蛋白膠擴散體積百分比平均值為72.11±11.19%，最小值為47.80%，最大值為87.60%。 3.安全性評價 實驗前后PT值的轉異率變化無顯著性差異（20.00%vs40.00%，P=0.628）；藥物造影組（16個椎體）CT掃描顯示蛋白膠椎管內滲漏椎體5個（31.25%），椎間孔滲漏1個（6.25%），平均滲漏量為0.73±0.