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文檔簡介
1、目的:利用Transwell小室體外趨化模型初步探索人骨髓間充質干細胞對胰腺癌細胞(ASPC-1)的趨向性及其機制。
方法:取健康成人骨髓用密度梯度離心法分離hMSCs,體外培養(yǎng)、傳代純化。采用免疫組化方法鑒定其表面標記(CD73,CD105,CD45)并檢測ASPC-1表達SDF-1和hMSCs表達CXCR4的情況。然后利用Transwell小室觀察ASPC-1、正常胰腺細胞和無細胞培養(yǎng)基對hMSCs趨化作用,并觀察加入
2、抗CXCR4抗體后對hMSCs趨化作用的影響。
結果:分離出來的hMSCs表達CD73和CD105,不表達CD45;實驗組和正常胰腺細胞對照組均觀察到有hMSCs遷移到底膜下表面,但細胞數量前者明顯大于后者且有統(tǒng)計學意義(p<0.05),而空白對照組未觀察到該現象;SDF-1和CXCR4分別在胰腺癌細胞和hMSCs表面呈陽性表達;加入CXCR4中和型抗體后,ASPC-1對hMSCs的趨化作用顯著減弱(p<0.05)。
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