Podoplanin在膽囊癌中的表達及意義.pdf

1、目的：膽囊癌是膽道系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤之一，近年來我國膽囊癌發(fā)病率有增高趨勢。膽囊癌缺乏特異性的臨床癥狀和體征，起病隱匿，早期診斷困難，多數(shù)患者就診時已有局部的擴散和淋巴道轉(zhuǎn)移。研究表明，許多惡性腫瘤在發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移時，均有新生淋巴管形成，淋巴管生成與惡性腫瘤早期淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及其預(yù)后密切相關(guān)。探討膽囊癌淋巴道轉(zhuǎn)移機制，對深入了解膽囊癌的發(fā)展以及轉(zhuǎn)移的生物學行為具有重要意義。
　　 近來發(fā)現(xiàn)，腎小球上皮細胞整合膜蛋白（podopla

2、nin），能夠選擇性表達于多種正常組織和腫瘤的淋巴管內(nèi)皮，而不表達于血管內(nèi)皮，在單層內(nèi)皮構(gòu)成的新生淋巴管中表達最明顯，是淋巴內(nèi)皮細胞的特異性標志物。血管內(nèi)皮生長因子-C（VEGF-C）為血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）家族的一個成員，是近年來新發(fā)現(xiàn)的促淋巴管生長因子，同時具有血管源和淋巴管源性，可通過與其受體VEGFR-2及VEGFR-3的結(jié)合來調(diào)控淋巴管和血管生成，促進腫瘤的生長和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。
　　 本研究通過檢測膽囊癌組織內(nèi)po

3、doplanin、VEGF-C和VEGFR-3的表達情況，分析膽囊癌組織內(nèi)淋巴管密度（lympatic vessel density，LVD）的變化，及其與VEGF-C和VEGFR-3之間的相關(guān)性。以此來進一步探討淋巴管生成在膽囊癌發(fā)展以及轉(zhuǎn)移過程中所起的作用。
　　 方法：
　　 選取河北醫(yī)科大學第二醫(yī)院病理科2000年1月至2007年12月間手術(shù)切除、經(jīng)病理證實的膽囊癌存檔蠟塊46例，對照為慢性膽囊炎組織11例。

4、r>　　 采用免疫組織化學SP法，在膽囊癌及慢性膽囊炎組織中，用podoplanin標記淋巴管并計數(shù)LVD值，用相應(yīng)抗體檢測VEGF-C及VEGFR-3的表達情況。LVD計數(shù)參照文獻報道方法，先在低倍鏡40×視野下觀察整張切片的淋巴管分布情況，再選擇淋巴管最豐富的區(qū)域，在200×視野下計數(shù)podoplanin陽性脈管數(shù)，每例計數(shù)3個視野，并求其200×視野下的均值即為淋巴管密度（LVD），數(shù)值以x±S表示。
　　 實驗數(shù)據(jù)采用

5、SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析。數(shù)據(jù)分析采用t檢驗、X2檢驗、Fisher確切概率計算法和相關(guān)分析。
　　 結(jié)果：
　　 1、Podoplanin在膽囊癌和慢性膽囊炎組織中的表達情況
　　 Podoplanin在腫瘤細胞中不表達，陽性表達的淋巴管分布于膽囊癌的腫瘤組織邊緣和間質(zhì)內(nèi)。在11例慢性膽囊炎組織中，Podoplanin在6例中有少量表達，標記在間質(zhì)中的淋巴管內(nèi)皮上，LVD值1.09±1.51，顯著低

6、于膽囊癌LVD值（6.92±4.54），兩者比較有顯著性差異（P<0.01）。
　　 2、VEGF-C在膽囊癌和慢性膽囊炎組織中的表達情況
　　 VEGF-C在膽囊癌組織中的陽性表達率為86.96％（40/46），慢性膽囊炎組織中的陽性表達率為0％。VEGF-C在兩者之間表達陽性率及評分差異有顯著性（P<0.01）。
　　 3、VEGFR-3在膽囊癌和慢性膽囊炎組織中的表達情況
　　 VEGFR-3在11

7、例慢性膽囊炎組織中，僅有1例表達陽性；在膽囊癌中，陽性表達29例，表達率為63.04％。VEGFR-3在兩者之間表達陽性率及評分差異有顯著性（P<0.01）。
　　 4、Podoplanin、VEGF-C、VEGFR-3在膽囊癌表達的相關(guān)性
　　 VEGF-C表達陽性的40例膽囊癌中LVD值為7.55±4.47；VEGF-C表達陰性的6例膽囊癌中LVD值為2.75±2.44。LVD值與VEGF-C在膽囊癌中的表達存在正相

8、關(guān)性（r=0.373.P<0.05）。
　　 VEGFR-3表達陽性的29例膽囊癌中LVD值為18.17±4.62；VEGFR-3表達陰性的17例膽囊癌中LVD值為4.79±3.61。兩者的差別有統(tǒng)計學意義（P<0.05），LVD值與VEGF-C在膽囊癌中的表達存在正相關(guān)性（r=0.352，P<0.05）。
　　 在VEGF-C呈陽性表達的40例膽囊癌中，VEGFR-3有28例陽性表達，12例呈陰性表達；VEGF-C陰性

9、表達的6例膽囊癌中，VEGFR-3有1例陽性表達，5例呈陰性表達。VEGF-C和VEGFR-3在膽囊癌的表達中呈的正相關(guān)關(guān)系（r=0.372，P<0.05）
　　 LVD值、VEGF-C、VEGFR-3的表達與患者的性別、年齡、TNM分期、Nevin分期、腫瘤的分化程度以及臨近器官有無轉(zhuǎn)移無關(guān)。
　　 膽囊癌伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者LVD值低于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者（P<0.05），且淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與否與LVD值相關(guān)，低LVD值和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈

10、正相關(guān)（r=0.312，P<0.05）。
　　 結(jié)論：
　　 1、膽囊癌中LVD值明顯升高且與膽囊癌組織學分級無關(guān)。
　　 2、膽囊癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與否可能與LVD值相關(guān)，低LVD值和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)，提示LVD值可能成為判斷腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與否的一項指標。
　　 3、VEGF-C、VEGFR-3在膽囊癌的陽性表達率明顯增高，提示 VEGF-C、VEGFR-3在膽囊癌發(fā)展過程中發(fā)揮作用。
　　 4、膽