細胞周期相關(guān)激酶在卵巢癌中的作用及作用機制的研究.pdf

1、細胞周期相關(guān)激酶(cell cycle—related kinase，CCRK)具有促進細胞增殖的作用，但對其作用機制目前還有爭議。為了研究CCRK在卵巢癌發(fā)生、發(fā)展過程中的作用及可能機制，我們利用組織芯片進行免疫組織化學(xué)染色檢測CCRK在正常卵巢組織、卵巢良性囊腺瘤、卵巢交界性腫瘤和卵巢癌組織中的表達情況；利用反轉(zhuǎn)錄PCR技術(shù)和免疫印跡法(Western blotting)檢測正常卵巢組織和卵巢痛組織中以及卵巢癌細胞株中CCRK表達情

2、況；利用RNA干擾的方法下調(diào)卵巢癌細胞H0-8910和OVCAR—3中CCRK，觀察了CCRK下調(diào)后細胞增殖和細胞周期的改變；觀察了TOV—21G細胞在CCRK過表達后的細胞增殖、細胞周期及細胞在裸鼠體內(nèi)生長能力的變化；最后用免疫印跡法檢測了與細胞增殖及細胞周期相關(guān)的一些分子蛋白水平的改變。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與正常卵巢組織相比，卵巢腫瘤組織中CCRK表達明顯上調(diào)，從卵巢良性囊腺瘤、卵巢交界性腫瘤到卵巢癌組織CCRK表達上調(diào)比例逐漸升高；CCRK

3、表達上調(diào)與卵巢癌患者臨床病理特征密切相關(guān)，在卵巢癌組織學(xué)分型中，未分化型上調(diào)比例最高(72％)，在組織學(xué)分級中，G3級上調(diào)比例最高(67％)，臨床分期越晚CCRK上調(diào)比例越高；CCRK表達上調(diào)與患者預(yù)后密切相關(guān)；在被檢測的5株卵巢癌細胞中，CCRK均有表達，但其表達水平不一致；用RNA干擾的方法下調(diào)卵巢癌細胞H0-8910和OVCAR—3中CCRK可以抑制細胞體外增殖及引起細胞周期G1期阻滯，但并不引起細胞凋亡；過表達CCRK可以促進卵

4、巢癌細胞TOV—21G的體外增殖和細胞由G1期進入S期；過表達CCRK可以顯著促進TOV—21G移植瘤在裸鼠體內(nèi)的生長；用RNA干擾的方法下調(diào)卵巢癌細胞H0-8910中CCRK可以在mRNA和蛋白水平顯著降低細胞周期蛋白D1表達水平；過表達CCRK可以使卵巢癌細胞TOV21G中細胞周期蛋白D1輕度升高。因此，我們認為卵巢癌中CCRK表達上調(diào)是卵巢癌患者預(yù)后不良的一個標志；CCRK在卵巢癌發(fā)生、發(fā)展過程中具有癌基因的作用，有可能成為卵巢癌